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本文格式为Word版,下载可任意编辑——磁珠法分开纯化DNA原理及其步骤磁珠法分开纯化DNA原理及其步骤
日期:2023-05-22来源:互联网标签:核酸纯化核酸分开磁珠法纯化DNA
摘要:磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分开。本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分开与纯化的原则、核酸分开与纯化的步骤。
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磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分开。本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分开与纯化的原则、核酸分开与纯化的步骤。
磁珠法纯化DNA原理
磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。硅磁(MagneticSilicaParticle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料,来吸附核酸,其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料(如DEAE,COOH)等,从而达到吸附核酸目的。不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。使用磁珠法来纯化核酸的最大优点就是自动化。磁珠在磁场条件下可以发生聚集或分散,从而可完全摆脱离心等所需的手工操作流程。Omega拥有全面的磁珠法核酸分开试剂盒,基于这种技术的试剂盒,名称前都有’Mag-Bind’。
核酸分开与纯化的原则
核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分开主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开。在分开核酸时应遵循以下原则:保证核酸分子一级结构的完整性:排除其他分子污染。
核酸分开与纯化的步骤
大多数核酸分开与纯化的方法一般都包括了细胞裂解、酶处理、核酸与其他生物大分子物质分开、核酸纯化等几个主要步骤。每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。
1.细胞裂解:核酸必需从细胞或其他生物物质中释放出来。细胞裂解可通过机械作用、化学作用、酶作用等方法实现。
(1)机械作用:包括低渗裂解、超声裂解、微波裂解、冻融裂解和颗粒破碎等物理裂解方法。这些方法用机械力使细胞破碎,但机械力也可引起核酸链的断裂,因而不适
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