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文档简介
(优选)章核苷酸和核酸现在是1页\一共有28页\编辑于星期二2.脱氧核苷酸的水解——脱嘌呤现在是2页\一共有28页\编辑于星期二3.紫外线和一些化学因子、烷化剂对DNA的损伤现在是3页\一共有28页\编辑于星期二亚硝酸现在是4页\一共有28页\编辑于星期二烷化剂:乙基甲烷磺酸(EMS)现在是5页\一共有28页\编辑于星期二紫外线诱导胸腺嘧啶二聚体现在是6页\一共有28页\编辑于星期二4.与嵌合剂的反应现在是7页\一共有28页\编辑于星期二现在是8页\一共有28页\编辑于星期二溴乙啶丫啶橙
放线菌素D
现在是9页\一共有28页\编辑于星期二二、DNA的酶法甲基化(methylation)甲基供体:S—腺苷甲硫氨酸甲基受体:被修饰碱基(A、C多于G、T)碱基的甲基化修饰不是随机的,而是限于一定的顺序或DNA的某一区域,在甲基化酶的作用下进行,甲基化是可逆的。甲基化的意义:帮助细胞识别和区分自身DNA和外来DNA;调节基因表达;帮助DNA修复等。现在是10页\一共有28页\编辑于星期二第八节
核酸酶和DNA限制性内切酶现在是11页\一共有28页\编辑于星期二一、核酸酶(nuclease)能水解核酸的酶为核酸酶核酸酶都是磷酸二酯酶(phosphodiesterases)现在是12页\一共有28页\编辑于星期二核酸酶的分类按底物专一性分类:核糖核酸酶(RNase)和脱氧核糖核酸酶(DNase)按作用方式分类:内切核酸酶和外切核酸酶内切核酸酶:从核酸的内部切割核酸链,产生核酸链片段。外切核酸酶:从核酸链的一端逐个切断磷酸二酯键,释放单核苷酸。按磷酸二酯键断裂方式:3’-核酸酶和5’-核酸酶现在是13页\一共有28页\编辑于星期二现在是14页\一共有28页\编辑于星期二核酸酶对其底物的作用具有特异性现在是15页\一共有28页\编辑于星期二现在是16页\一共有28页\编辑于星期二二、限制性内切酶(restrictionendonuclease)
限制性内切酶是从细菌中分离的一类专门识别和水解特定核苷酸序列的内切酶类。这类酶在原核生物体内,用于“防御”外来DNA的入侵,将外来DNA以独特的方式切成无感染能力的片段,而自身不受损害(甲基化作用)。现在是17页\一共有28页\编辑于星期二1.限制性内切酶的分类Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ
基因工程技术中常用Ⅱ型现在是18页\一共有28页\编辑于星期二不需要ATP参加;不对DNA进行甲基化或其它方式修饰。专门识别和切割特定的核苷酸序列,这个序列一般含4—6个核苷酸残基,并具回文结构“落鹤岛上岛落鹤,垂柳岸边岸柳垂”。
2.II型限制性内切酶
现在是19页\一共有28页\编辑于星期二Ⅱ类酶识别序列特点
回文结构palindrome现在是20页\一共有28页\编辑于星期二切口(kerf):粘端,平端现在是21页\一共有28页\编辑于星期二现在是22页\一共有28页\编辑于星期二现在是23页\一共有28页\编辑于星期二3.限制性内切酶的种类(约1000多种)
现在是24页\一共有28页\编辑于星期二Hin
dⅢ
属
系
株序Haemophilusinfluenzaed株流感嗜血杆菌d株的第三种酶命名naming第一个字母取自产生该酶的细菌属(genus)名,用大写;第二、第三个字母是该细菌的种(species)名,用小写;第四个字母代表株(strain);用罗马数字表示发现的先后次序(sequence)。现在是25页\一共有28页\编辑于
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