抗体b优秀公开课

第二节免疫球蛋白基因2008年AntibodyStructureandFunction瑞典首都斯德哥尔摩卡罗林斯卡医学院利根川进

一、Ig的基因结构一、Ig的基因结构二、Ig基因的重排和表达三、Ig的多样性从骨髓瘤细胞（M）和胚胎细胞（E）中提取DNA，以限制性内切酶酶解Vκ+Cκ*Vκ

Cκ*（一）实验证据一、Ig的基因结构（二）Ig的基因定位和结构

κ

λ

ＨChr(人):22214(小鼠):616121）、κ链(1)Lκgene~100个(小鼠~350)22aa

(2)Vκgene~100个1~96aa(3)Jκgene5个97~110aa(4)Cκgene1个1、L链基因的结构2）、λ链(1)Lλ

gene~100个(小鼠2)15~20aa(2)Vλ

gene~100个(小鼠2)1~97aa(3)Jλ

gene6个98~110aa(4)Cλ

gene6个111~214aa(Lλ)λ链(轻链)(100)λ62、H链基因的结构(1)LH

~250个(小鼠300~1000)(2)VH

~250个1－94aa(3)DH

~30个95－97aa(4)JH6个98－113aa(5)CH11个(LH)一、Ig的基因定位和结构二、Ig基因的重排和表达三、Ig的多样性二、Ig基因的重排和表达造血干细胞B细胞发育过程:前B细胞淋巴细胞前体定向干细胞幼B细胞B细胞AgPCAb1、轻链基因的重排和表达(1)κ链重排(2)λ链重排

LλVλ与JλCλ组合

2H链重排1、重组酶特点:(1)细胞类型特异性(2)B细胞发育阶段特异性2、Ig多样性的产生2）、重排组合的多样性（主要因素）

κ链：100×4=4×102

H链：250×30×6＝4.5×104

1）、众多的胚系基因（原始因素）(4×103)×(

4.5×107)=1.8×1011（2）非模板序列的插入增加100倍3）、重组连接的多样性（1）非精确性连接增加10倍4）、体细胞基因突变：主要是点突变4.抗体基因的表达特点：1）、等位基因排斥：是指一条染色体上Ig重链基因的有效重排，抑制另一条同源染色体重链基因重排的现象。2）、轻链同型排斥3）、重链类别转换当一个Ｂ细胞中，κ链的基因发生功能性重排后，λ链的基因重排就被阻断的现象。又称同种型转换。指B细胞在受抗原刺激后，首先合成IgM，然后转为合成IgG、IgA和IgE等的现象。

1.定义一个B细胞克隆在分化过程中V-D-J功能性基因片段保持不变，而发生C基因重排，使其表达的抗体分子发生H链类的改变，称为类别转换（classswitching）。

2.举例B细胞克隆

IgM

IgGIFN-γ

IL-4IgEIL-5IgAIg的类别转换第三节免疫球蛋白

的合成与分泌一、体液免疫应答与抗体的产生1，初应答与再应答初应答再应答抗原刺激后时间（d）5-101-3抗体产生量较少较多抗体产生量IgM>IgGIgG(IgA,IgE)>IgM抗体亲和力低，易变化高，稳定刺抗原所有抗原蛋白质抗原高剂量（+佐剂）低剂量二、免疫球蛋白的表达，装配与分泌1，mRNA的修饰与加工：加帽，接尾2，膜结合型和分泌型免疫球蛋白的表达第四节

单克隆抗体和基因工程抗体多克隆抗体（polyclonalantibody）单克隆抗体（monoclonalantibody）基因工程抗体1.定义指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。如:免疫血清（含多种特异性抗体）。2.实际意义（1）预防、治疗感染性疾病（2）临床诊断一、多克隆抗体（polyclonalantibody）1.定义

由单一克隆B细胞杂交瘤产生的，只识别抗原分子某一特定抗原决定簇的特异性抗体。

2.特点具有高度均一性。

3.杂交瘤细胞骨髓瘤细胞—无限增殖；免疫B细胞—合成、分泌特异性抗体。4.杂交瘤技术

HAT培养基：次黄嘌(H),氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)。二、单克隆抗体（monoclonalantibody,McAb）

5.实际意义（1）抗原的纯化和结构分析（2）细胞发生、分化及功能的阐明（3）临床疾病的诊断和治疗

三、基因工程抗体

1.定义在DNA水平对Ig基因进行切割、拼接或修饰，导入受体细胞表达的抗体。

2.举例人