实验三果蝇的性状、生活史观察及饲养课件

实验三果蝇的性状、生活史观察及饲养一、实验目的1.了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点；2.区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征；3.掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。二、实验原理果蝇的优点：

1.生活史短，20-25℃条件下完成一个世代需12-15天。

2.繁殖率高，一对果蝇可产卵400-500只。

3.个体小，饲养方便，培养费用低廉。

4.突变率高。

5.形态容易辨认。6.染色体数目少，只有4对，且具有较大的唾腺染色体。因此，果蝇是遗传学、细胞学、发育生物学等研究中最好的模式动物。四、实验内容1.果蝇的生活史果蝇（Drosophilamelanogaster2n=8）

中文名：黑腹果蝇果蝇属于节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属，与家蝇是不同的种。果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，15℃以下则使它的生活周期延长，同时生活力也降低，果蝇培养的最适温度为20-25℃。10℃15℃20℃25℃卵幼虫8天5天幼虫成虫57天18天6.3天4.2天从表中可以看出，25℃时，从卵到成虫约10天；在25℃时成虫约活20~30天。生活史：属于完全变态。最适温度：20-25℃生活史周期：12-15day(20-25℃)10day(26℃)57day(10℃)羽化后：8-12h后交配两天后产卵成虫存活：20-30day(25℃)卵：羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配，两天后才能产卵。卵长0.5mm，为椭圆形，腹面稍扁平，被绒毛膜，在背面的前端伸出一对触丝（filament），它能使卵附着在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。三龄幼虫4.5mm，在培养基上作沟穿孔。幼虫：从卵孵化出来后，经过两次蜕皮，发育成三龄幼虫，此时体长可达4-5mm。肉眼可见其前端稍尖部分为头部，上有一黑色斑点即为口器。口器后面有一对透明的唾液腺，透过体壁可见到一对生殖腺位于躯体后半部上方的两侧，精巢较大，外观上是一明显的黑点，而卵巢则较小，可以此作为鉴别。幼虫活动力强而贪食，它们在培养基上爬行时，留下很多条沟，沟多而且宽时，表明幼虫生长良好。蛹：幼虫生活7-8天准备化蛹，化蛹前从培养基上爬出，附着在瓶壁上，逐渐形成一梭形的蛹。在蛹前部有两个呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹壳颜色淡黄而柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，表明即将羽化了。

成虫：幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化，最后从蛹壳前端爬出。刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长，翅膀尚未展开，体表尚未完全几丁质化，故呈半透明的乳白色。透过腹部体壁，可以看到黑色的消化系统。不久，变为短粗圆形，双翅展开，体色加深。如野生型初为浅灰色，然后呈灰褐色。3.成虫雌雄的鉴别雌果蝇雄果蝇体形较大体形较小腹部椭圆形，末端稍尖腹部末端钝圆腹部背面有明显的五条黑色条纹腹部背面有三条黑色花纹，前两条细，后一条宽且延续至腹面腹部腹面有明显的6个腹片(刚毛围成一圈)四个腹片无性梳第一对跗节基部的一节有性梳外生殖器外观比较简单外生殖器外观较复杂，刚羽化的幼蝇用低倍镜可明显观察到生殖弧、肛口板及阴茎果蝇♀♂识别果蝇♀♂识别雄果蝇雌果蝇果蝇♀♂识别果蝇♀♂识别雄果蝇雌果蝇身体颜色野生型：灰色，符号为+突变型：黑檀体色，符号为e眼睛颜色野生型：砖红色，符号为+突变型：白色，符号为w翅膀形状野生型：圆卵型，长度约为腹部的2倍，符号+残翅型：翅膀退化残缺不全，符号vg刚毛形状野生型：刚毛长粗、黑硬、平直，先端略弯，符号+焦刚毛：刚毛先端分叉弯曲，符号sn3白眼w、小翅m、焦刚毛sn(刚毛卷曲如烧焦状)（全在X染色体）果蝇培养基成分水1000ml玉米粉105g红糖75g琼脂7.5-10g苯甲酸0.75g酵母粉5-10g配制方法配制时先将水分成两份：一份用于加热溶解琼脂和糖，另一份煮玉米粉，玉米粉要先用冷水搅拌，再加到煮沸琼脂红糖溶液中，边倒边搅拌。继续煮15-20分钟，关掉火后再加入苯甲酸(用少量酒精促溶)，要充分搅拌后再分装培养瓶。每瓶培养基厚度在2-3cm，置121℃高压蒸汽灭菌15分钟。待培养基冷却后，在培养基的表面滴加新鲜酵母液，插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥场所。2）果蝇继代培养

将果蝇转移到新配制的培养基中繁殖。转移时要注意转移的手法，不要使果蝇从两个瓶口的接缝处飞出。一般用黑纸包住带有亲本果蝇的培养瓶，使其飞入带有新培养基的培养瓶准备转移果蝇的亲本及培养基果蝇的转移幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上。6果蝇性状的观察1）果蝇的麻醉处理

在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中，应先将果蝇麻醉，使其保持安静状态。麻醉方法如下：（1）准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶，并配以脱脂棉塞。（2）去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对，培养瓶在上，一手稳住两瓶，另一手轻轻震拍培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶中。（3）滴数滴乙醚于麻醉瓶棉塞内，迅速将两瓶塞住，约30s，麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉状态。注意：不能麻醉过度。若蝇翅与蝇体呈45º角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡。2）观察选取一张10x10cm白纸，在白纸中央画一个半径为0.5cm小圆圈及圆心，在体视镜下找到圆圈后将白纸固定好，将麻醉后的果蝇放在白纸小圆圈内，用毛笔移动果蝇进行观察，观察完毕的果蝇务必倒入死蝇盛留器中及时处死，防止品系间混杂。转移到麻醉瓶中观察结果麻醉时转移果蝇手法果蝇的麻醉

滴加乙醚的方法果蝇的麻醉剂死亡果蝇的标志死亡果蝇的标志果蝇♀♂识别

♀♂个体大小腹纹53腹部