DB32T 4056-2021优良食味半糯粳稻品质

江苏省市场监督管理局发布ICS65.020.20CCSB2江苏省地DB32方标准DBT4056—2021Qualityofsemiglutinousjaponicaricewithgoodtaste前言苏省农业科学院提出。江苏省农作物标准化技术委员会归口。花、魏海燕、赵春芳、魏晓东、陈涛、赵庆勇、赵凌、姚姝、周丽慧、路凯、梁文化。优良食味半糯粳稻品质检验方法、检验规则及判定规则。范性引用文件，GB350稻谷GBT1354大米GBT90粮食检验一般规则GBT491粮食、油料检验扦样、分样法GBT15682粮油检验稻谷、大米蒸煮食用品质感官评价方法GBT91—2017优质稻谷GBT719稻谷整精米率检验法GBT2294粮油检验大米胶稠度的测定NY/T83米质测定方法NY/T593食用稻品种品质NY/T2639稻米直链淀粉的测定分光光度法定义半糯粳稻semi-glutinousjaponicarice等)的粳稻。优良食味半糯粳稻semi-glutinousjaponicaricewithgoodtasteidentificationmolecularmarker质量要求.2定等质量指标B一二三≥级≤123)含量/%13.0mm≥分≥法A种率检验：按照GB/T17891—2017，附录B执行。精米率检验：按照GB/T21719执行。5.6直链淀粉(干基)含量检验：按照NY/T2639执行。规则判定规则等级判定等级分类半糯粳稻。(规范性)A.1原理低直链淀粉含量突变基因Wxmp、Wxmq和Wxmw是在Wxb基因的第4、第5和第6外显子发生了单碱基突(图A.1)。仅在第4外显子第53位碱基发生G-A突变的为Wxmp基因，同时在第4外显子第53位碱基发GA发生T-C突变的为Wxmq基因，仅在第6外显子第62位碱基发生A/C突变的为Wxmw基因。利用四引物扩增受阻突变体系PCR技术可针对第4和第6外显子的变异位点进行分子标记检测；利用成对引物可针对第5外显子的变异位点进行PCR扩增和序列分析，根据突变位点的有无和类型，来判断是否含有突变基因Wxmp、Wxmq和Wxmw。A.2仪器设备R成像系统、微量可调移液器(2uL、10uL、100uL、1000uL)。A.3试剂与溶液A.3.1DNA提取试剂A.3.2PCR扩增试剂A.3.3电泳试剂DNATAE酸染料。A.3.4DNA回收试剂试剂盒。A.5分子标记序列A用于鉴定Wxmq或Wxmp的分子标记序列分子标记鉴定，四引物序列为：正向外引物(Wxmq/Wxmp-O-F)序列为5'-ATGTTGTGTTCTTGTGTTCTTTGCAGGC-3'，反向外引物(Wxmq/Wxmp-O-R)序列为5'-GTAGATCTTCTCACCGGTCTTTCCCCAA-3'，正向内引物(Wxmq/Wxmp-I-F)序列为5'-GGGTGAGGTTTTTCCATTGCTACAATCG-3'，反向内引物(Wxmq/Wxmp-I-R)序列为5'-GTCGATGAACACACGGTCGACTCAAT-3'。：正向引物(Wxmq-F)序列为5'-GGCTTCACGCAACGGCGCTACAAATAG-3'，反向引物(Wxmq-R)序列为5'-CCATTCGCCTGCAAAGAACACAAGAAC-3'。AWxmw序列正向外引物(Wxmw-O-F)序列为5'-GCTTAGCTTCCACTGGTGATTTCA-3'，反向外引物(Wxmw-O-R)序列为5'-GTAGATGCCATTGGGCTGGTAGT-3'，WxmwIF5'-AACAACCCATACTTCAAAGGAACATC-3'，反向内引物(Wxmw-I-R)序列为5'-TCTTGAGATCAATTGTAACTCCCCAT-3'。L伸5min，4℃保存。反应在PCR扩增仪(热循环仪)上进行。R伸5min，4℃保存。反应在PCR扩增仪(热循环仪)上进行。伸5min，4℃保存。反应在PCR扩增仪(热循环仪)上进行。A.8.1琼脂糖凝胶制备 A.8.2上样样品制备A.8.3电泳A.8.4凝胶成像源下进行PCR扩增产物观察，拍照备用。用成A.9结果分析A9.1分子标记检测结果分析点为杂合位点。图A.3Wxmq第5外显子突变位点的核苷酸序列分析(M：分子量标准；1,4,8,9为含第5