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文档简介

动物实验的基本操作方法第1页,共99页,2023年,2月20日,星期四

一、动物实验与实验动物二、动物实验前准备

三、实验动物的抓取固定与编号标记方法

四、实验动物的随机分组方法

五、实验动物被毛的去除方法六、实验动物给药途径和方法七、实验动物用药量的确定及计算方法八、实验动物的麻醉九、实验动物采血方法十、急性动物实验中常用的手术方法十一、实验动物的急救措施十二、实验动物的处死方法目录第2页,共99页,2023年,2月20日,星期四在医学教学、科研和医疗工作中,不论是从事基础医学还是临床医学或预防医学,都需要用实验动物来进行各种实验。通过对动物实验的观察、分析,来研究需要解决的问题,动物实验已成为研究工作中必不可少的重要手段。动物实验方法是多种多样的,在医学的各个领域内都有其不同的应用,其中一些基本方法都是共同性的,如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等。一、动物实验第3页,共99页,2023年,2月20日,星期四一、动物实验分类细胞实验组织实验器官实验1.动物实验(按机体水平不同分)无损伤整体实验有损伤整体实验亚细胞实验离体实验整体实验2.动物实验(按实验时间长短分)急性实验(2天以内)亚急性实验(1~4周)慢性实验(2~6个月或更长时间第4页,共99页,2023年,2月20日,星期四

生理学的动物实验方法病理生理学的动物实验方法药理学的动物实验方法病理解剖、组织学动物实验方法微生物、免疫学的动物实验方法一、动物实验分类3.动物实验(按不同学科分)第5页,共99页,2023年,2月20日,星期四实验动物分类

(一)按基因遗传学分类近交系(inbredstrain)封闭群(closedcolony)突变系(mutantstrain)杂交群(hybridstock)(二)按携带微生物分类普通动物(CV)---一级动物清洁动物(CL)---二级动物SPF级动物(SPF)---三级动物无菌动物(GF)---四级动物一、实验动物第6页,共99页,2023年,2月20日,星期四(一)按基因遗传学分类

1.近交系(inbredstrain)

是指连续20代以上兄妹交配(BXS,brother-sistermating)或亲子交配(PXO,Parent-offspringmating)培育而成的动物品系。

常见的近交系动物:

①普通近交系

②重组近交系

③同源突变近交系

④同源导入近交系一、实验动物第7页,共99页,2023年,2月20日,星期四

近交系动物的特点:

①基因型相同,表现型一致,近交系数大于99%;

②对受试物反应一致,实验结果重复性好,可比性强;

③遗传学背景明确;

④抵抗力差,对营养及饲养管理条件要求高;

⑤不同品系具有各自明显的特性。

一、实验动物第8页,共99页,2023年,2月20日,星期四2.封闭群(closedcolony)

它是指一个不从外界引入新的血缘,采用非近亲交配方式进行繁殖一定代次的实验动物种群。又称远交系(outbredstock)。

常见的封闭群有两类:

(1)近交系封闭群:由近交系种群采用非同胞交配至少连续繁殖在4代以上的群体称近交系封闭群。

(2)非近交系封闭群:以非近亲交配方式在一定群体内连续随机繁殖15代以上的群体称非近交系封闭群。一、实验动物第9页,共99页,2023年,2月20日,星期四

封闭群动物具有以下特点:

①群体遗传特异性保持相对稳定;

②个体间具有杂合性,存在一定的差异;

③与人类群体遗传异质性相似;

④繁殖能力较强;

⑤生产成本低,生产量大,供应充足。

一、实验动物第10页,共99页,2023年,2月20日,星期四3.突变系(mutantstrain)

突变系(mutantstrain)是指由于遗传基因发生突变而表现出某种遗传缺陷的品系动物。

突变系动物的共同特点是:

①突变系动物因其突变多为病态;

②其生活能力较弱;

③饲养管理要求严格,繁殖保种较为困难;

④适用于某一疾病机制研究。一、实验动物第11页,共99页,2023年,2月20日,星期四

第12页,共99页,2023年,2月20日,星期四4.杂交群(hybridstock)

杂交群(hybridstock)又称异系杂交,它是由两个不同的近交品系杂交而繁殖的第一代动物,又称为杂交一代(简称F1杂交动物)。

杂交群动物的特点:

①它不具有育种功能;

②杂交F1代动物遗传和表现均一性好;

③生活适应能力较近交系动物强;

④具备亲代双亲的特点,应用范围大。一、实验动物第13页,共99页,2023年,2月20日,星期四(二)按携带微生物分类

1.普通动物(conventionalanimals,CVA),又称一级动物。

特点:

①不带有动物烈性传染病和人兽共患病病原体;

②对实验的反应性较差,实验结果不可靠,仅可供教学示范及作为预备试验之用。

饲养要求:

①饲养于普通环境;②全价饲料饲养;

③饮水水质应符合国家规定的生活饮水卫生标准;

④饲料与垫料要消毒,室内温度与湿度能人工控制;

⑤能防止蚊蝇等昆虫及野鼠进入;

⑥饲养环境应定期清洁消毒。

物种来源于清洁动物或SPF动物。

一、实验动物第14页,共99页,2023年,2月20日,星期四2.清洁动物(cleananimals,CLA)

又称二级动物,除不带有普通动物应排除的病原体外,还不应携带对动物危害大和对科学实验干扰大的病原体。

饲养要求:

①必须饲养于半屏障环境中或屏障环境中;

②饲料、饮水、垫料、笼具等均须消毒;

③工作人员需更换灭菌工作服、鞋帽、口罩等后工作;

④饲养环境必须能控制温度、湿度、光照强度和光照时间。

物种来源于SPF动物或无菌动物。一、实验动物第15页,共99页,2023年,2月20日,星期四3.SPF动物(specificpathogenfreeanimals,SPFA)

又称三级动物,除不带有普通动物、清洁动物应排除的病原体外,还应排除潜在感染或条件性致病的病原体,以及对科学实验干扰大的病原体。

饲养要求:

①必须饲养于屏障系统环境中;

②饲料、饮水、垫料、笼具等必须灭菌;

③操作人员必须严格执行操作规程;

④保种最好饲养于隔离器中。

物种来源于无菌动物或悉生动物。一、实验动物第16页,共99页,2023年,2月20日,星期四4.无菌动物(germfreeanimals,GFA)

又称四级动物,指采用当前手段无法检出一切其他生命体的动物。

饲养要求:

①必须饲养于隔离的无菌环境;

②饲料、饮水、笼具必须严格灭菌,确保无菌;

③饲料中的营养成分必须齐全,满足无菌动物的

需要,特别是维生素类营养物质。

物种来源于剖腹产或无菌卵的孵化。一、实验动物第17页,共99页,2023年,2月20日,星期四实验动物选择

(一)动物种属的选择

选择原则:

1.相似性原则

2.特殊性原则

3.标准化原则

4.经济性原则一、实验动物第18页,共99页,2023年,2月20日,星期四1.相似性原则

相似性原则是指利用动物与人类生命现象(如机能、代谢、结构及疾病特点等)的相似性来选择实验动物。

例如:

烧伤研究模型动物-小型猪

因为小型猪的皮肤组织结构与人类相似,其上皮再生、皮下脂肪层、烧伤后的内分泌及代谢等也类似人体。

自发性高血压模型动物-SHR大鼠第19页,共99页,2023年,2月20日,星期四2.特殊性原则

特殊性原则是指利用不同种系实验动物机体存在的特殊结构或某些特殊反应选择解剖、生理特点符合实验目的和要求的动物。

例如:

热源试验-家兔

呕吐试验-家犬、猴和猫

过敏性试验-豚鼠

耳毒性试验-豚鼠

观察切除甲状旁腺后的生理现象-犬第20页,共99页,2023年,2月20日,星期四3.标准化原则

标准化实验动物主要是指遗传背景明确,具有已知菌丛和模型性状显著且生物学特征稳定的动物。

例如:

许多突变品系动物具有与人类相似的疾病或缺损。第21页,共99页,2023年,2月20日,星期四

第22页,共99页,2023年,2月20日,星期四4.经济性原则

经济性原则是指尽量选用容易获得、价格便宜和容易饲养的动物。

常用动物种属:

①啮齿类动物:小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠

特点:繁殖周期短,具多胎性,饲养容易,遗传和微生物控制方便,经济。

②非啮齿类动物:狗、家兔、猪。

③非人灵长类动物:猴、猩猩等第23页,共99页,2023年,2月20日,星期四实验动物选择

(二)动物个体的选择

1.年龄(根据试验目的与试验周期选择)

2.体重

3.性别(根据受试物用途)

4.生理及健康状况一、实验动物第24页,共99页,2023年,2月20日,星期四一、实验动物第25页,共99页,2023年,2月20日,星期四一、实验动物第26页,共99页,2023年,2月20日,星期四一、实验动物第27页,共99页,2023年,2月20日,星期四一、实验动物健康实验动物基本标志第28页,共99页,2023年,2月20日,星期四1.动物的购入购入或领取实验动物时,实验人员应向供应部门索取所用动物相应等级的由国家主管部门所颁发的质量合格证书,动物的遗传背景资料、动物微生物检查资料及动物年龄和健康等方面的资料。若是购入或领取清洁级以上实验动物,应采用带有空气过滤膜的无菌运输罐或带过滤帽的笼盒运输,并严格检查其密封状况。

二、动物实验前准备第29页,共99页,2023年,2月20日,星期四2.动物外观健康检查主要内容:①皮毛:有无光泽、出血、干燥;②眼:有无眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等;③耳:有无外伤、耳壳曲折、中耳炎等;④四肢:有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎;⑤肛门:有无下痢、血便、脱肛等。二、动物实验前准备第30页,共99页,2023年,2月20日,星期四3.动物饲养室及饲养器具准备饲养室面积应根据所购入动物的数量来确定。饲养动物的器具等,应在动物购入前准备好。垫料、饲料应按购入动物数量准备。各笼箱的编号及卡片、饲喂动物所用器材,如给饵器、粪便托盘、搬运车、台秤、饲料桶、电源插板等也应准备放好。动物饲养室的环境应根据所计划使用动物的微生物控制级别来进行准备,属于屏障系统的应调整好送排风系统、空气净化系统,控制好温度、湿度、风速、噪声等环境因素。动物饲养室在启用前,应对设施、笼具及用具等统一进行彻底消毒。二、动物实验前准备第31页,共99页,2023年,2月20日,星期四

正确的抓取固定动物,是为了不损害动物健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,保证实验顺利进行。抓取固定动物的方法依实验内容和动物类而定。三、实验动物的抓取与编号第32页,共99页,2023年,2月20日,星期四(一)小鼠抓取固定方法(二)大鼠的抓取固定方法(三)蛙类的抓取固定方法(四)豚鼠的抓取固定方法(五)兔的抓取固定方法(六)狗的抓取固定方法二、实验动物的抓取方法第33页,共99页,2023年,2月20日,星期四二、实验动物的抓取方法大、小鼠抓取方法步骤:

1.带上帆布手套,用右手拇指和食指捏住鼠尾巴中部将鼠提起,放在饲养盒盖上。

2.用左手拇指和食指迅速、准确地捏住鼠的两耳后、颈背部的皮肤,将鼠提起。3.对大鼠而言,当大鼠向前爬行时,用左手食指和中指夹住大鼠颈部,同时拇指和无名指滑向其左右腋下,分开前肢,拿起动物反转为仰卧位,即可进行实验操作。第34页,共99页,2023年,2月20日,星期四二、实验动物的抓取方法豚鼠的抓取第35页,共99页,2023年,2月20日,星期四二、实验动物的抓取方法家兔的抓取方法第36页,共99页,2023年,2月20日,星期四二、实验动物的抓取方法家兔抓取步骤:

1.用右手把兔的两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤,把兔提起。

2.然后用左手托住兔的臀部。第37页,共99页,2023年,2月20日,星期四二、实验动物的抓取方法比格狗照射固定架第38页,共99页,2023年,2月20日,星期四二、实验动物的抓取方法驯服动物的固定第39页,共99页,2023年,2月20日,星期四

动物在实验前常常需要作适当的分组,那么就要将其标记,使各组加以区别。标记的方法很多,良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、适用的要求。常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。三、实验动物编号标记方法第40页,共99页,2023年,2月20日,星期四(一)颜料涂染

这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。使用的颜料一般有:3-5%苦味酸溶液(黄色)2%硝酸银溶液(咖啡色)0.5%中性品红(红色)

煤焦油的酒精溶液(黑色)标记时用毛笔或棉签蘸取上述溶液,在动物体的不同部位涂上斑点,以示不同号码。编号原则:先左后右,从上而下。三、实验动物编号标记方法第41页,共99页,2023年,2月20日,星期四颜色被毛涂擦标记法第42页,共99页,2023年,2月20日,星期四(二)烙印法用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。三、实验动物编号标记方法第43页,共99页,2023年,2月20日,星期四(三)号牌法

用金属制的牌号固定于实验动物的耳上,大动物可系于颈上。对猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记,只记录它们的外表和毛色即可。三、实验动物编号标记方法第44页,共99页,2023年,2月20日,星期四

动物实验时,常常需要将选择好的实验动物,按研究需要分成若干个组,分组时为了避免人为的因素影响,常应用随机数字表进行完全随机化的分组。四、实验动物的随机分组方法第45页,共99页,2023年,2月20日,星期四1.将实验单位随机分成两组设有小鼠14只,试用随机数字表将其分成两组。先将小鼠依次编为1、2、3……14号,然后任意从随机数字表的某一行某一列的数字开始抄录14个数,编排如下(见下表),现令单数代表A组,双数代表B组。四、实验动物的随机分组方法第46页,共99页,2023年,2月20日,星期四动物编号1234567891011121314随机数目5790120207234737173154080188归组ABBBAAAAAABBAB随机数字表:/p-325295696760.htmleg.从第15行第6列开始选取14个数,如遇重复数字则剔除第2个继续往后选取。第47页,共99页,2023年,2月20日,星期四

结果列入A组的动物有8只,列入B组的动物有6只。如要使两组相等,须将A组减少一只,划入B组。应把哪一只小鼠划入B组,仍可用随机数字表,在上述抄录的14个数后面再抄录一个数字为63,此数以8除之,因为归入A组的小鼠有8只,故以8除,得余数7。于是把第7个A(即编写为第10号的小鼠)划给B组。四、实验动物的随机分组方法第48页,共99页,2023年,2月20日,星期四A组15678913B组23410111214经过这样调整,两组小鼠的分配如下:四、实验动物的随机分组方法第49页,共99页,2023年,2月20日,星期四

动物的被毛常能影响实验操作和结果的观察,因此实验中常需去除或剪短动物的被毛。

除毛的方法有剪毛、拔毛和脱毛三种。五、实验动物被毛的去除方法第50页,共99页,2023年,2月20日,星期四1.剪毛:固定动物后,用粗剪刀剪去所需部位的被毛。需注意以下几点:⑴把剪刀贴紧皮肤剪,不可用手提起被毛,以免剪破皮肤;⑵依次剪毛,不要乱剪;⑶剪下的毛集中放在一个盛水的容器内,勿遗留在手术区和兔台周围,以保证手术野的清洁和防止注射器等夹毛。五、实验动物被毛的去除方法第51页,共99页,2023年,2月20日,星期四2.拔毛:兔耳缘静脉注射或取血时以及给大、小白鼠作尾静脉注射时,需用拇指、食指将局部被毛拔去,以利操作。3.脱毛:脱毛系指用化学药品脱去动物的被毛,适用于无菌手术野的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和病理变化。五、实验动物被毛的去除方法第52页,共99页,2023年,2月20日,星期四常用脱毛剂的配方:1.适用于家兔、大白鼠、小白鼠等小动物的脱毛配方⑴硫化钠3g、肥皂粉1g,淀粉7g,加水适量调成糊状。⑵硫化钠8g、淀粉7g、糖4g、甘油5g、硼砂1g,加水75ml。⑶硫化钠8g,溶于100ml水中。2.适用于狗等大动物的脱毛配方硫化钠10g、生石灰15g,溶于100ml水内,此配方适用于狗等大动物的脱毛。五、实验动物被毛的去除方法第53页,共99页,2023年,2月20日,星期四

使用以上各种脱毛剂,都应事先剪短被毛,以节省脱毛剂,并减少对皮肤的刺激反应,应用时用棉球蘸脱毛剂,在所需局部涂一薄层,2-3分钟后,用温水洗去脱落的被毛,以纱布擦干局部,涂一层油脂即可。五、实验动物被毛的去除方法第54页,共99页,2023年,2月20日,星期四

给药的途径和方法是多种多样的,可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定。六、实验动物给药途径和方法第55页,共99页,2023年,2月20日,星期四(一)皮下注射(二)皮内注射:可见皮肤表面鼓起一小皮丘。(三)肌肉注射(四)腹腔注射(五)静脉注射(六)淋巴囊注射(七)经口给药(八)其它途径给药1.呼吸道给药2.皮肤给药3.脊髓腔内给药4.小脑延髓池给药5.脑内给药6.直肠内给药7.关节腔内给药六、实验动物给药途径和方法第56页,共99页,2023年,2月20日,星期四皮下注射第57页,共99页,2023年,2月20日,星期四腹腔注射第58页,共99页,2023年,2月20日,星期四静脉注射第59页,共99页,2023年,2月20日,星期四小鼠的灌胃给药第60页,共99页,2023年,2月20日,星期四注射途径小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.2-1.01-32-55-105-15肌肉0.1-0.20.2-0.50.2-0.50.5-1.02-5静脉0.2-0.51-21-53-105-15皮下0.1-0.50.5-1.00.5-21-33-10几种动物不同给药途径的常用注射量(ml)第61页,共99页,2023年,2月20日,星期四动物名称项目灌胃皮下注射肌肉注射腹腔注射静脉注射小白鼠最大给药量使用针头1ml9(钝头)0.4ml5(1/2)0.4ml5(1/2)1ml5(1/2)0.8ml4大白鼠最大给药量使用针头1ml静脉切开针1ml60.4ml62ml64ml5豚鼠最大给药量使用针头3ml静脉切开针1ml6(1/2)0.5ml6(1/2)4ml75ml5兔最大给药量使用针头20ml10号导尿管2ml6(1/2)2ml6(1/2)5ml710ml6猫最大给药量使用针头20ml10号导尿管20ml72ml75ml710ml6蛙淋巴囊注射最大注射量1ml/只常用实验动物的最大给药量和使用针头规格

第62页,共99页,2023年,2月20日,星期四(一)动物给药量的确定

在观察一个药物的作用时,应该给动物多大的剂量是实验开始时应确定的一个重要问题。剂量太小,作用不明显,剂量太大,又可能引起动物中毒致死,可以按下述方法确定动物的给药剂量:七、实验动物用药量的确定及计算方法

第63页,共99页,2023年,2月20日,星期四1.先用小鼠粗略地探索中毒剂量(如LD50)或致死剂量,然后用小于中毒量的剂量,或取致死量的若干分之一为应用剂量,一般可取1/10-1/5。2.植物药粗制剂的剂量多按生药折算。3.化学药品可参考化学结构相似的已知药物,特别是化学结构和作用都相似的药物的剂量。

七、实验动物用药量的确定及计算方法

第64页,共99页,2023年,2月20日,星期四4.确定剂量后,如第一次实验的作用不明显,动物也没有中毒的表现(体重下降、精神不振、活动减少或其他症状),可以加大剂量再次实验。如出现中毒现象,作用也明显,则应降低剂量再次实验。在一般情况下,在适宜的剂量范围内,药物的作用常随剂量的加大而增强。所以有条件时,最好同时用几个剂量作实验,以便迅速获得关于药物作用的较完整的资料。如实验结果出现剂量与作用强度之间毫无规律时,则更应慎重分析。七、实验动物用药量的确定及计算方法

第65页,共99页,2023年,2月20日,星期四5.用大动物进行实验时,开始的剂量可采用给鼠类剂量的1/15~1/2,以后可根据动物的反应调整剂量。6.确定动物给药剂量时,要考虑给药动物的年龄大小和体质强弱。一般说确定的给药剂量是指成年动物的,如是幼小动物,剂量应减少。如以狗为例:6个月以上的狗给药量为1份时,3-6个月的给1/2份,45-89日1/4份,20-44日的给1/8份,10-19日的给1/16份。七、实验动物用药量的确定及计算方法

第66页,共99页,2023年,2月20日,星期四7.确定动物给药剂量时,要考虑因给药途径不同,所用剂量也不同,以口服量为100时,灌肠量应为100-200,皮下注射量30-50,肌肉注射量为25-30,静脉注射量为25。药物吸收速率与给药途径密切相关,一般而言,吸收速率的大小为:静脉注射>呼吸吸入>肌肉注射>皮下注射>口服>直肠>皮肤。七、实验动物用药量的确定及计算方法

第67页,共99页,2023年,2月20日,星期四(二)实验动物用药量的计算方法动物实验所用的药物剂量,一般按mg/kg体重或g/kg体重计算,应用时须从已知药液的浓度换算出相当于每kg体重应注射的药液量(ml),以便给药。七、实验动物用药量的确定及计算方法

第68页,共99页,2023年,2月20日,星期四例1:计算给体重1.8kg的家兔静脉注射20%氨基甲酸乙酯溶液麻醉,按1g/kg的剂量注射,应注射多少ml?解:兔剂量1g/kg,注射液为20%,则氨基甲酸乙酯溶液的注射量应为5ml/kg,现在兔体重为1.8kg,应注射20%氨基甲酸乙酯溶液用量=5×1.8=9ml。七、实验动物用药量的确定及计算方法

第69页,共99页,2023年,2月20日,星期四例2:计算给体重23g的小白鼠,注射盐酸吗啡15mg/kg,溶液浓度为0.1%,应注射多少ml?解:小白鼠需吗啡量为15mg/kg,则0.1%盐酸吗啡溶液的注射量应为15ml/kg,现小白鼠体重为23g,应注射0.1%盐酸吗啡溶液的用量=15×0.023=0.345ml。七、实验动物用药量的确定及计算方法

第70页,共99页,2023年,2月20日,星期四(三)人与动物及各类动物间药物剂量的换算方法1.人与动物用药量换算

人与动物对同一药物的耐受性相差很大。一般说来,动物的耐受性要比人大,也就是单位体重的用药量动物比人大。人的各种药物的用量在很多书上可以查得,但动物用药量可查的书较少,而且动物用的药物种类远不如人用的那么多。七、实验动物用药量的确定及计算方法

第71页,共99页,2023年,2月20日,星期四

因此,必须将人的用药量换算成动物的用药量。一般可按下列比例换算:人用药量为1,小白鼠、大白鼠为25-50,兔、豚鼠为15-20,狗、猫为5-10。此外,可以采用人与动物的体表面积计算法来换算。七、实验动物用药量的确定及计算方法

第72页,共99页,2023年,2月20日,星期四2.人及不同种类动物之间药物剂量的换算(1)直接计算法

即按:

七、实验动物用药量的确定及计算方法

第73页,共99页,2023年,2月20日,星期四例:某利尿药大白鼠灌胃给药时的剂量为250mg/kg,试粗略估计狗灌胃给药时可以试用的剂量。解:实验用大白鼠的体重一般在200g左右,其体表面积(A)为:

七、实验动物用药量的确定及计算方法

第74页,共99页,2023年,2月20日,星期四250mg/kg的剂量如改以mg/m2表示,即为:七、实验动物用药量的确定及计算方法

第75页,共99页,2023年,2月20日,星期四实验用狗的体重一般在10kg左右,其体表面积(A)为:七、实验动物用药量的确定及计算方法

第76页,共99页,2023年,2月20日,星期四(2)按人与各种动物以及各种动物之间用药剂量换算已知A种动物每kg体重用药量,欲估算B种动物每kg体重用药剂量时,可先查表找出折算系数(W),再按下式计算:

B种动物的剂量(mg/kg)=W×A种动物的剂量(mg/kg)七、实验动物用药量的确定及计算方法

第77页,共99页,2023年,2月20日,星期四折算系数WA组动物或成人小白鼠(20g)大白鼠0.2Kg豚鼠0.4Kg家兔1.5kg猫2.0kg狗12kg人60kgB种动物或成人小白鼠20g1.01.61.62.73.24.89.01大白鼠0.2Kg0.71.01.141.882.33.66.25豚鼠0.4Kg0.610.871.01.652.053.05.55家兔1.5kg0.370.520.61.01.231.762.30猫2.0kg0.300.420.480.811.01.442.70狗12kg0.210.280.340.560.681.01.88人60kg0.110.160.180.3040.3710.5311.0动物与人体的每公斤体重剂量折算系数表

第78页,共99页,2023年,2月20日,星期四例如:已知某药对小鼠的最大耐受量为20mg/kg(20g小鼠用0.4mg),需折算为家兔的用药量。

解:查A种动物为小鼠,B种动物为兔,交叉点为折算系数W=0.37,故家兔用药量为0.37×20mg/kg=7.4mg/kg,1.5kg家兔用药量为11.1mg。七、实验动物用药量的确定及计算方法

第79页,共99页,2023年,2月20日,星期四(一)常用的麻醉剂1.挥发性麻醉剂2.非挥发性麻醉剂3.中药麻醉剂(二)动物的麻醉方法1.全身麻醉2.局部麻醉八、实验动物的麻醉第80页,共99页,2023年,2月20日,星期四麻醉剂动物给药方法剂量(mg/kg)常用浓度%维持时间戊巴比妥钠狗、兔静脉3032-4小时中途加上1/5量,可维持1小时以上,麻醉力强,易抑制呼吸。腹腔40-503大小鼠、豚鼠腹腔40-502硫喷妥钠狗、兔静脉15-20215-30分钟,麻醉力强,宜缓慢注射。大白鼠腹腔401小白鼠腹腔15-201氯醛糖兔静脉80-10023-4小时,诱导期不明显大白鼠腹腔502乌拉坦兔静脉750-1000302-4小时,毒性小,主要适用小动物的麻醉。大小鼠皮下或肌肉800-100020蛙淋巴囊注射0.1ml/100g20-25蟾蜍淋巴囊注射1ml/100g10常用麻醉剂的用法及剂量

第81页,共99页,2023年,2月20日,星期四采血方法的选择

主要决定于实验目的所需血量以及动物种类。1.需血量较少:如检验项目红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。2.需血量较多:静脉采血。九、实验动物采血方法第82页,共99页,2023年,2月20日,星期四采血时要注意:⑴采血场应有充足的光线;室温夏季最好保持在25-28℃,冬季,15-20℃为宜;⑵采血用具及采血部位一般需要进行消毒;⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥;⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。九、实验动物采血方法第83页,共99页,2023年,2月20日,星期四动物品种最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500猎狗50200猴1560常用实验动物的最大安全采血量与最小的致死采血量

第84页,共99页,2023年,2月20日,星期四(一)小鼠、大鼠采血法1.割(剪)尾采血2.鼠尾刺血法3.眼眶静脉丛采血4.断头取血5.心脏采血6.颈动、静脉采血7.腹主动脉采血8.股动(静)脉采血九、实验动物采血方法第85页,共99页,2023年,2月20日,星期四(二)豚鼠采血法1.耳缘剪口采血2.心脏采血3.股动脉采血4.背中足静脉取血九、实验动物采血方法第86页,共99页,2023年,2月20日,星期四(三)兔采血法1.耳静脉采血2.耳中央动脉采血3.心脏取血4.后肢胫部皮下静脉取血九、实验动物采血方法第87页,共99页,2023年,2月20日,星期四

急性动物实验中常以血压、呼吸等为指标,以静脉注射、放血等为实验方法。需要暴露气管、颈总动脉,颈外静脉,股动脉,股静脉,并做相应的插管,以及分离迷走神经,减压神经及股神经等。因此手术主要在颈部及股部进行。十、急性动物实验中常用的手术方法第88页,共99页,2023年,2月20日,星期四(一)兔、狗颈部手术动物麻醉动物固定气管及颈部血管神经分离术⑴气管暴露术⑵颈总动脉分离术⑶颈部迷走、交感、减压神经分离术⑷颈外静脉暴露术十、急性动物实验中常用的手术方法第89页,共99页,2023年,2月2

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