临床输血与检验第二部分

临床输血与检验张循善2015.3现在是1页\一共有50页\编辑于星期三医疗机构输血科（血库）承担工作和研究领域免疫血液学实验室血液相容性试验血型不合新生儿溶血病实验室诊断输血不良反应研究成分输血与自身输血血液治疗血液成分单采和置换术（造血干细胞移植）细胞治疗临床输血质量管理现在是2页\一共有50页\编辑于星期三免疫血液学血液相容性试验ABO血型鉴定RhD鉴定红细胞意外抗体筛查和鉴定交叉配血试验现在是3页\一共有50页\编辑于星期三AABBRequirementsforPretransfusionTestingPositiveidentificationofrecipientandrecipientsampleABOgroupandRhtypingofrecipientanddonorblood.Redcellantibodydetectiontestsforclinicallysignificantantibodiesusingrecipientsserumorplasma.Comparisonofcurrentfindingsofrecipientssamplewithrecordofpreviouspatientresults.SelectionofcomponentsofABOgroupandRhtypeappropriatefortherecipient.Performanceofaserologicorcomputercrossmatch.Labelingofproductswiththerecipientsidentifyinginformation.现在是4页\一共有50页\编辑于星期三血型鉴定试验ABO血型鉴定（试管法）原理红细胞膜上只有B抗原只有A抗原A、B抗原均有A、B抗原均无A型B型AB型O型有A抗体有B抗体无A、B抗体有A、B抗体血清中现在是5页\一共有50页\编辑于星期三ABO血型鉴定正定型：被检者红细胞与ABO标准血清反定型：被检者血清或血浆与ABO试剂红细胞现在是6页\一共有50页\编辑于星期三正定型试验方法（试管法）（1）取试管2支分别标上A、B字样（2）向A管滴加抗A标准血清1滴，向B管滴加抗B标准血清1滴（3）向A、B管各滴加5％的待检红细胞悬液各1滴。（4)摇匀，后以1000rpm离心1min，或按说明书要求操作。（5）将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，以肉眼观察有无凝集现象。现在是7页\一共有50页\编辑于星期三ABO血型鉴定卡式法现在是8页\一共有50页\编辑于星期三反定型试验方法（试管法）（1）取试管3支分别标上A、B、O字样（2）向A、B、O三管各滴加待检血清（浆）1滴（3）向A管滴加A型试剂红细胞1滴，向B管滴加B型试剂红细胞1滴,向O管滴加O型试剂红细胞1滴。（4）摇匀，后以1000rpm离心1min，或按说明书要求操作。（5）将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象。现在是9页\一共有50页\编辑于星期三结果判定正定型现在是10页\一共有50页\编辑于星期三结果判定

反定型现在是11页\一共有50页\编辑于星期三ABO血型鉴定的临床意义（1）输血血型鉴定是实施输血治疗的首要步骤，应该在受血者与供血者血型相同，交叉配血完全相合的情况下才能输血。正反定型一致，保证输血安全，例如类B。（2）器官移植受者与供者最好选择ABO血型相同进行移植，血型不符易引起排斥反应导致移植失败（3）新生儿溶血母子ABO血型不合可引起新生儿溶血病，主要是依据血型血清学检查来诊断（4）其他ABO血型检查还可用于亲子鉴定，法医学鉴定以及某些疾病相关的调查等现在是12页\一共有50页\编辑于星期三RhD血型鉴定（试管法）原理

从理论上讲人类红细胞上的Rh抗原主要有C、c、D、d、E、e六种抗原，但目前尚未发现抗d，因此也未肯定d抗原，故Rh抗原主要有五种。其中RhD抗原性最强，因此，临床意义最大。一般情况，患者常规进行RhD血型鉴定。现在是13页\一共有50页\编辑于星期三RhD遗传现在是14页\一共有50页\编辑于星期三RhD血型鉴定（试管法）操作方法1.取试管3支，分别标记检测管、阳性对照管、阴性对照管2.各管均加入抗D血清1滴3.检测管加入受检者红细胞悬液1滴4.对照管分别加入RhD阳性红细胞和RhD阴性红细胞各1滴5.摇匀，以1000rpm离心1分钟或按说明书操作，取出试管，判定结果现在是15页\一共有50页\编辑于星期三结果判定

如阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，受检管凝集，为RhD阳性；阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，受检管不凝集，则为RhD阴性现在是16页\一共有50页\编辑于星期三

RhD血型鉴定的临床意义

（1）输血前检查为了保证安全输血，输血前应做RhD血型鉴定。避免Rh阴性个体误输RhD阳性血液，防止发生同种免疫。（2）新生儿溶血病诊断由于IgG类的RhD抗体易通过胎盘，与相应抗原反应从而破坏胎儿红细胞，引起严重的新生儿溶血病现在是17页\一共有50页\编辑于星期三Coomb’sTestUsehemagglutinationtodetect:1)Antibody–coatedRBC’s(“Direct”)2)Anti-RBCantibodyinserum(“Indirect”)现在是18页\一共有50页\编辑于星期三Directvs.IndirectCoomb’sTestagglutinationagglutination现在是19页\一共有50页\编辑于星期三TwoModesofAutoimmuneRBCDestruction*现在是20页\一共有50页\编辑于星期三交叉配血试验盐水介质配血法原理ABO、MN、P等血型系统产生的抗体为IgM抗体，可在盐水介质中与红细胞表面的相应抗原发生反应，产生肉眼可见的凝集现象。IgG抗A、抗B的浓度足够大时，在盐水介质里中与红细胞也能发生凝集现象现在是21页\一共有50页\编辑于星期三试验方法1.取小试管两支分别标注主、次管2.主侧管内加入受血者血清和供血者红细胞悬液各1滴；次侧管内加入供血者血清和受血者红细胞悬液各1滴3.混匀，1000rpm离心1min4.轻轻摇匀后镜检现在是22页\一共有50页\编辑于星期三结果判定

主、次管均不凝集且无溶血为配血相合，有凝集或/和溶血为不合。现在是23页\一共有50页\编辑于星期三凝聚胺配血法原理凝聚胺是一种多价阳离子聚合物，在溶液中有多个阳离子基团，能中和红细胞表面的负电荷，缩短了红细胞之间的距离，红细胞之间排斥力的减弱，导致红细胞非特异性聚凝，这种凝聚是可逆的。当红细胞与血清在低离子介质中孵育，IgG抗体与红细胞上相应抗原结合后，在凝聚胺的作用下发生凝集。凝聚和凝集外观上是不能区分的，再加入枸橼酸钠重悬液，枸橼酸根的负电荷与凝聚胺上的正电荷中和，凝聚现象消失，而抗原抗体反应产生的凝集不会消失。现在是24页\一共有50页\编辑于星期三试验方法1.取3支洁净小试管，分别标记主、次侧管及对照管2.主侧管：加入受血者血清（浆）2滴，供血者5%红细胞悬液1滴，再加入低离子介质溶液0.5ml，室温静置1min3.次侧管：加入供血者血清（浆）2滴，受血者5%红细胞悬液1滴，再加入低离子介质溶液0.5ml，室温静置1min4.各加入2滴凝聚胺试剂，轻轻混匀，室温静置15s5.1000rpm，离心1min，取出试管，检查上清液有无溶血反应，若无溶血反应，将上清液轻轻倒出，使管底保留大约0.1ml液体6.目测红细胞是否形成凝块，若无凝块出现必须重做。有凝块再轻摇试管，使红细胞凝块浮起7.各加入重悬液试剂2滴，并轻轻混匀。8.肉眼观察无凝集后，必须使用显微镜观察结果现在是25页\一共有50页\编辑于星期三结果判定1.若为凝聚胺引起的非免疫性凝聚应在1min内散开，表示两血相容，可以使用2.若是抗原抗体引起的凝集则不会散开，表示两血不相容，不宜使用现在是26页\一共有50页\编辑于星期三抗人球蛋白配血法试验原理在适合的温度、时间等条件下，IgG型血型抗体与红细胞膜上相应抗原结合，使红细胞致敏，但不能在盐水介质中直接凝集带有相应抗原的红细胞。由于抗人球蛋白试剂是马或兔抗人球蛋白抗体，加入此类试剂后，在离心力的作用下，这种抗体（二抗）与致敏在红细胞膜上的IgG型血型抗体（一抗）发生抗原抗体结合反应，经抗人球蛋白抗体的“搭桥”作用，使原来已经致敏的红细胞发生凝集。因此，为了检测出此类抗体，需要使用抗人球蛋白介质进行交叉配血试验。现在是27页\一共有50页\编辑于星期三试验方法取2支试管，分别标明主侧和次侧。主侧管加入受血者血清2滴和献血者红细胞悬液1滴，次侧管加入献血者血清2滴和受血者红细胞1滴。各试管经轻轻混匀后，置37℃水浴30min，分别取出后用生理盐水洗涤红细胞3次，倾去上清液。各试管内加最适稀释度抗人球蛋白血清1滴，120g/rpm离心1min或1300g/rpm离心15S后，观察结果。现在是28页\一共有50页\编辑于星期三结果判定主、次管均不凝集且无溶血为配血相合，有凝集或/和溶血为不合。现在是29页\一共有50页\编辑于星期三意外抗体筛选的意义和方法意外抗体是指除ABO血型系统抗体以外的其他抗体，如抗－D、抗－E等。主要经输血或妊娠等免疫刺激产生，人群检出率为0.3％～2.0％，是引起迟发性免疫反应的主要原因。临床有意义抗体：引起新生儿溶血病、溶血性输血反应，或者使输入的红细胞存活期减少的、在37℃反应的同种异型抗体。现在是30页\一共有50页\编辑于星期三试剂红细胞抗原表达的要求：D,C,E,c,e,M,N,S,s,PI,Le,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka,Jkb.现在是31页\一共有50页\编辑于星期三实验方法盐水直接凝集试验：是最简单的血型血清学方法，在室温下立即离心。可检出室温或低于室温反应的临床意义不大的抗体如抗－M、抗－N、抗－P、抗－Lea等。抗球蛋白试验：可检出绝大部分临床有意义的不完全抗体，抗球蛋白试剂要有多特异性抗球蛋白抗体，其中含有抗－IgG和抗－C3d。含抗补体的球蛋白也能够检出结合补体的无临床意义的冷抗体，如抗－I、抗－HI等现在是32页\一共有50页\编辑于星期三抗体筛选的意义发现临床有意义的抗体减少溶血性输血反应的发生有利于免疫溶血性疾病的诊断有利于提前选择和准备相合的血液确保临床输血安全、及时、有效现在是33页\一共有50页\编辑于星期三输血不良反应分类

即发反应迟发反应

免疫性反应发热反应

溶血反应

过敏反应TA-GVHD

溶血反应

输血后紫癜

输血相关的急性肺损伤血细胞或血浆蛋白同种免疫非免疫性反应细菌污染反应

含铁血黄素沉着症循环超负荷血栓性静脉炎

空气栓塞

经输血传播的传染病

出血倾向

枸橼酸中毒

非免疫性溶血反应

电解质紊乱现在是34页\一共有50页\编辑于星期三现在是35页\一共有50页\编辑于星期三成分输血意义提高输血疗效减少和预防输血不良反应和并发症有利于血液各种成分的保存节约血液资源现在是36页\一共有50页\编辑于星期三自身输血定义

自身输血（亦称自体输血）是指采集某一个体的血液或/和血液成分并予以保存，或当其处于出血状态收集其所出血液并作相应处理，需要时将其本人的血液或/和血液成分实施自我回输的一种输血治疗方法。现在是37页\一共有50页\编辑于星期三自身输血分类预存式自身输血稀释式自身输血回收式自身输血现在是38页\一共有50页\编辑于星期三自体输血的优点1.杜绝输血传播疾病的危险如：病毒性肝炎、艾滋病、巨细胞病毒等。

2.避免红细胞、白细胞、血小板以及蛋白质等抗原、抗体产生的同种异体免疫反应。3.节省政府开支及患者费用，节约同种血源。解决特殊血型供血。

4.无输血反应及输血意外。

5.血液新鲜，细胞活力好，功能强。

6.避免了输血导致的免疫功能抑制，术后感染大幅减少。

7.大出血抢救成功率高，血液供应及时。

8.解决宗教信仰人员的用血问题。现在是39页\一共有50页\编辑于星期三预存式自身输血

指在某一个体计划或可能需要施行输血治疗前，有计划地采集其全血或/和血液成分并作相应保存，在