临床微生物检查课件 第29章-人类免疫缺陷病毒-11检本VIP

人类免疫缺陷病毒

(humanimunodeficiencyvirus,HIV)人类免疫缺陷病毒是获得性免疫缺陷综合症(AcquiredImmunodeficiencysyndrome,AIDS，艾滋病)的病原体，艾滋病具有高度致死性与惊人的蔓延速度，可以称之为“超级癌症”，“世纪杀手”属逆转录病毒科，慢病毒属1一、分类与命名因带有以RNA为模板合成DNA的逆转录酶而得名，共有7个属。HIV分为两型：HIV-1型引起全球爱滋病流行；分为M、N和O3个组，13个亚型；HIV-2主要局限于西部非洲分为A~F六个亚型。我国流行的主要是B和C亚型。2二、生物学性状(一)形态与结构HIV为RNA病毒，呈球形，直径约100～120nm，病毒内部有一致密的圆锥状核心.核衣壳：两条单股正链RNA，逆转录酶，整合酶，蛋白酶包膜：gp120(刺突)，gp41(跨膜蛋白)3电镜下的HIV形态4HIV模型图脂双层膜gp120gp41包膜糖蛋白p24衣壳蛋白p14内膜蛋白p7核衣壳蛋白逆转录酶蛋白酶整合酶567(二)基因组及其编码产物三个结构基因分别为：gag、pol和env基因其基因编码的重要产物有：P24：衣壳蛋白，特异性最高，与多数其他逆转录病毒无交叉反应。HIV-1或HIV-2的p24有轻度交叉反应8gp120：包膜上的糖蛋白，构成刺突，是病毒体与宿主细胞表面的CD4受体结合的部位。gp120能鉴别HIV-1与HIV-2gp41：具有介导病毒包膜与宿主细胞膜融合的作用9HIV包膜上的gp120吸附CD4＋细胞HIV的包膜与细胞膜融合RNA进入细胞内逆转录酶DNA整合酶整合至宿主细胞的染色体上转录RNA拼接成子代RNA一部分一部分拼接成mRNA转译结构蛋白调节蛋白核衣壳出芽的方式释放获得包膜子代HIV(三)病毒的复制101112(四)病毒的变异HIV是一种高度变异的病毒，各基因的变异程度不一，较多集中在env基因和nef基因。HIV的核心抗原和各种酶蛋白比较恒定HIV的抗原变异是病毒逃逸宿主免疫反应的主要机制。13(五)病毒受体和细胞亲嗜性主要受体细胞表面的CD4分子辅助受体T细胞表面的CXCR4巨噬细胞表面的CCR5靶细胞：主要是CD4＋T淋巴细胞和单核-巨噬细胞141516(六)培养特性实验室中常用新鲜分离的正常人T细胞或用病人自身分离的T细胞培养亦可在某些T细胞株(H9、CEM)中增殖感染后细胞出现不同程度的病变，培养液中可测到逆转录酶活性，培养细胞中可查到病毒的抗原恒河猴及黑猩猩可作为HIV感染的动物模型，但其感染过程与产生的症状与人类不同17(七)理化性状与抵抗力对理化因素的抵抗力较弱56℃30min可灭活，但在室温(20～22℃)可保持活力达7天对包括肥皂在内的各种去垢剂非常敏感0.2%次氯酸纳、0.1%漂白粉、70%乙醇、50%乙醚、0.3%H2O2或0.5%来苏处理5min，对病毒均有灭活作用18二、临床意义HIV能引起AIDS,其是以侵犯CD4+T细胞为主,造成细胞免疫缺陷，并继发体液免疫功能缺陷为基本特征的传染病。传染源：HIV无症状携带者和艾滋病患者传播途径性接触传播：最常见血液传播：污染HIV的血液、血制品或针头、手术器械等母婴传播19临床表现从HIV感染到发展为典型的AIDS分为3个期：1)急性感染期：HIV初次感染人体后，即开始在CD4+的T细胞和单核-巨噬细胞中大量增殖和扩散。此时感染者血循环中的CD4+T细胞减少，出现HIV抗原。多数感染者此期表现出发热、咽炎、淋巴结肿大等自限性症状。202)无症状感染期：急性感染期后转入较长时间的慢性感染期(6个月至十年)，在此期间感染者可不表现临床症状而处于临床潜伏期，外周血中HIV病毒含量或每ml病毒RNA拷贝数很低，常需用敏感的方法才能检测出在潜伏期体内淋巴样组织中的HIV仍处于活跃增殖的状态21

3)艾滋病(又称艾滋病完全型，AIDS)：

：实验室检查：IgG明显增高、CD4+T淋巴细胞记数低于200个/ul、CD4/CD8＜1、HIV抗体阳性.此期出现中枢神经系统等多器官多系统损害，合并多种感染(如条件致病菌、寄生虫、病毒等)或并发肿瘤。5年死亡率约为90%。22致病机制目前尚不清楚，主要的观点有：HIV直接或间接损伤CD4+T淋巴细胞HIV抑制抗原递呈细胞的功能HIV诱发自身免疫性疾病及诱导细胞凋亡HIV导致CD8+T细胞丧失抗病毒能力23机体对HIV感染的免疫应答：HIV感染也刺激机体产生体液免疫(Gp120抗体)和细胞免疫应答，但不能彻底清除体内潜伏感染的细胞24四、微生物检验HIV感染的标志分为：病毒标志、免疫标志和相关标志。标本采集：血液：测定抗体、测定病毒及其组分体液：CSF、唾液、泪液、乳汁、尿、生殖器分泌液感染组织的活检标本25(一)标本直接检查1.抗原检查P24：间接ELISA，急性感染期(＋)潜伏期常为(－)，用于早期诊断。262.核酸检测(1)原位杂交：检测不同细胞和组织内的HIV核酸，以确定细胞中HIV潜伏感染的情况(2)PCR：PCR-DNAPCR-RNA(3)定量PCR检测病毒载量监测HIV慢性感染者病情的发展，以及作为评价抗HIV药物治疗效果的指标27(二)病毒分离培养：正常人淋巴细胞或脐血淋巴细胞测逆转录酶活性测p24抗原测HIV抗原28(三)抗体检测检查血清中HIV抗体时应注意以下情况：血清中如出现HLA、抗核抗体、自身抗体、疟原虫抗体或56℃加热，常出现假阳性。晚期病人或极度衰竭的病人抗体常呈阴性.少数感染者病毒抗原阳性而抗体阴性。291.初筛试验：酶免疫测定法(EIA)免疫荧光法(IFA)凝集试验2.确证试验：免疫印迹试验(WB)放射免疫沉淀试验30一般用ELISA进行血清HIV抗体的初筛，(＋)者，要进行第2、3次测定，如仍(＋)必须用免疫印迹试验检测针对HIV不同结构蛋白的抗体作确证试验目前认为，至少有对两种HIV抗原同时测定其抗体，方可肯定诊断。如血清中同时检出p24及gp120抗体(+)