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文档简介

人类外周血淋巴细胞染色体制备及染色技术广州医科大学金域检验学院陈帆、武彬彬江帅、江秋霞11楼1110实验室11楼1110实验室主讲老师陈帆武彬彬实验演示老师江秋霞江帅4月21日6-9节01班：29人2014112001-2014112029,201414301902班：14人2014112030-201411204302班：15人2014112044-201411205803班：29人2014112059-2014112086，2014114080实验课安排，校本部10号楼，11楼1110实验室。细胞收获流程演示实验操作显微镜病例观察核型分析实践步骤总述：接种→培养→收获→滴片→烤片→消化→染色1.用吸管将培养瓶中的细胞吹打均匀，移入离心管中。2.离心管以2000～2200r/min，离心5分钟。3.弃上清液，加入已在37℃预热的0.075mol/L的KCL溶液8ml，充分混匀。在37℃水浴箱中低渗23分钟～30分钟人类染色体G显带玻片制备与染色（一）4.低渗23分钟～30分钟时，配制固定液。甲醇与冰乙酸按3：1混匀。5.预固定，低渗完之后，加固定液2ml混匀，以2000～2200r/min，离心10分钟。6.弃上清液，每管加8ml固定液混匀静置20分钟人类染色体G显带玻片制备与染色（二）7.以2000～2200r/min，离心8分钟。8.弃上清液，每管加8ml固定液混匀后即可离心，此步骤做2次。9.细胞沉淀制作细胞悬液，准备滴片。10.吸管吸取细胞悬液约0.3ml在20cm～25cm的高度滴于玻片上，玻片的头体尾各一滴，玻片酒精灯过火。人类染色体G显带玻片制备与染色（三）11.取染缸，调配染液姬姆萨染液：取10ml～15ml姬姆萨母液，加入70ml的PBS缓冲液，充分混匀。置于37℃水浴箱预热20分钟后使用。12.姬姆萨染色约2分钟。自来水冲洗风干人类染色体G显带玻片制备与染色（四）核型分析做最优秀的第三方

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