干细胞技术与临床应用合一康

干细胞技术与临床应用合一康第1页/共90页第2页/共90页1

干细胞概述提纲2

干细胞国内外前沿进展3干细胞技术临床应用第3页/共90页一、干细胞概述第4页/共90页干细胞定义干细胞（StemCell）：“干”译自英文“stem”，意为“树干”和“起源”。即为起源细胞，是一种具有多向分化潜能和自我复制能力的原始细胞。干细胞广泛存在于早期胚胎、胎盘及其附属物、骨髓、外周血和成年人组织中，医学界称其为“万用细胞”。自我复制多向分化第5页/共90页干细胞按来源分类干细胞胚胎干细胞成体干细胞iPS干细胞全能干细胞多能干细胞单能干细胞按分化潜能分类干细胞分类第6页/共90页脐带脐带血自体外周血其它自体骨髓自体脂肪成体干细胞用于临床的主要干细胞种类第7页/共90页MSCs为来源于发育早期的中胚层，广泛分布于骨髓、脐带、脐带血、胎盘、脐静脉内皮下层、脂肪、外周血及肌肉等各种组织中。间充质干细胞具有可塑性，如骨髓间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、神经细胞等多种组织细胞，在连续传代后仍具有多向分化潜能。间充质干细胞（MSCs）第8页/共90页脐带间充质干细胞UMSC140001-12d-10XUMSC140005-P0-15d-10X第9页/共90页1、MSC体外原代培养即可获取大量细胞，加之细胞增殖能力强、扩增迅速，可长期传代、使短时间内获取大量细胞成为可能；2、无免疫原性；3、没有伦理问题；4、来源充足；分离成功率高，几乎可达100%；5、脐带MSC具有更强的增殖能力，比骨髓MSC快两倍，具有更长的端粒有关；6、能够表达CD73、CD90、CD105等公认的MSCs标志物，但不表达CD34、CD45等造血干细胞标志物。脐带MSCSH2、CD106和HLA-1表达低，OCTmRNA表达阳性，这说明脐带MSC是一种更原始的MSC群；7、它们表达的细胞因子稍有不同，如脐带MSC可以分泌GM-CSF和G-CSF，而骨髓MSC却不分泌；8、由于有胎盘的屏障作用，疾病传染的几率下降。间充质干细胞的优点第10页/共90页取血时对于母体和婴儿均无痛苦脐带血来源丰富易于获得脐血干细胞取样时对于母体和婴儿均无痛苦取材方便来源广泛易于收集脐带干细胞取材困难，供者难以接受，来源受到限制骨髓来源的MSCs含量最为丰富骨髓干细胞第11页/共90页低抗原性趋化性可塑性迁移性分化性归巢性干细胞干细胞的生物学特性第12页/共90页二、国内外前沿进展第13页/共90页《细胞》及《科学》在11月20日同时刊出来自美国威斯康辛大学麦迪逊分校及日本京都大学两个研究团队的报告，利用病毒将四个基因送入皮肤细胞，促使普通的皮肤细胞产生变化，最后成为带有胚胎干细胞性质的细胞，称为诱导式多能性干细胞(iPS)。2006年iPS发现第14页/共90页Review-the2012NobelPrizeinPhysiologyorMedicine

日本科学家山中伸弥（ShinyaYamanaka）获奖，获奖理由为“发现成熟细胞可被重编程变为多能性”。iPS诱导多功能干细胞第15页/共90页2014年9月：iPS正式应用于临床治疗一位罹患老年性黄斑变性的日本患者将成为接受诱导多能干（iPS）细胞治疗的第一人。日本卫生部已经审查了研究人员的安全测试，并准许了该研究小组着手展开试验程序。第16页/共90页www.beike.cc国际干细胞临床应用最新动态英国批准ReNeuron公司人胚胎来源的神经干细胞立体定向局部注射治疗缺血性中风的临床实验2009年元月16日美国Geron公司成为全世界第一个获FDA批准，将胚胎干细胞来源的神经少突胶质祖细胞应用于临床实验，治疗T3-T10脊髓损伤7-14天的病人第17页/共90页2009年2月12日美国FDA批准路易斯维尔大学利用心脏干细胞治疗缺血性心脏疾病进入第一期临床实验，手术中直接从心脏取组织，从中分离干细胞，体外培养、扩增后，通过心导管手术注入心梗区域。第18页/共90页澳大利亚Mesoblast公司利用异体间充质前体细胞，局部注射治疗膝关节外伤患者，防止膝关节炎和软骨细胞丢失英国ReNeuron公司获英国卫生部批准，利用胎儿组织干细胞治疗角膜肓的第一期临床实验第19页/共90页国外已批准上市的干细胞产品第20页/共90页国外已批准上市的干细胞产品-日本第21页/共90页2015年初，干细胞治疗产品Holoclar获欧盟批准Holoclar由意大利凯西制药（ChiesiFarmaceutici）研发，是获批的首个含干细胞的先进治疗产品，也是首个用于治疗角膜缘干细胞缺乏症（LSCD）的产品。Holoclar不仅能够作为角膜移植的替代疗法，也可以在大范围眼部损伤的情况下增加角膜移植成功的概率。在临床试验中，Holoclar能够修复眼部角膜损伤，并改善或解决疼痛、畏光等症状，同时可改善患者的视敏度(visualacuity)。第22页/共90页国外已批准上市的干细胞相关产品第23页/共90页国外处于临床研究后期的主要干细胞产品第24页/共90页在研的主要干细胞产品第25页/共90页三、干细胞技术临床应用第26页/共90页2、替代和修复死亡或损伤的细胞1、干细胞通过血液循环植入，或直接植入受损的组织3、激发自身体内干细胞来修复干细胞治疗ISSCR关于干细胞技术定义第27页/共90页干细胞技术治疗疾病原理干细胞移植治疗疾病的原理替代和修复死亡或受损的细胞旁分泌作用（分泌神经营养因子、抗凋亡因子等）促进细胞间电能力、电传导的恢复激活休眠和处于抑制状态的细胞免疫调控机制第28页/共90页干细胞技术优势干细胞技术优势低免疫原性无免疫排斥，是最好的免疫治疗和基因治疗载体安全有效无明显毒副作用来源充足细胞易于分离、培养、扩增和纯化治疗范围广具有分化成多种细胞的能力，一次介入，永久治疗第29页/共90页干细胞技术应用广泛第30页/共90页干细胞治疗适应症神经系统疾病脊髓损伤、脑瘫、帕金森、脑卒中，脑外伤、老年痴呆、多发性硬化、共济失调、运动神经元病等岁内分泌系统糖尿病等免疫系统疾病系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征、、系统性硬化症移植物抗宿主病等血液系统疾病白血病、地中海贫血、再生障碍性贫血等呼吸系统疾病肺气肿等其他股骨头坏死、糖尿病足、骨关节炎、视神经萎缩、急慢性皮肤损伤等等消化系统疾病肝硬化、克隆氏病、自身免疫性肝病、重症胰腺炎等心血管疾病心肌梗死、心肌缺血等泌尿系统疾病肾病、阳痿等第31页/共90页干细胞技术禁忌症高度过敏体质或有严重过敏史休克，全身衰竭，生命体征不稳或不能配合检查恶性肿瘤全身感染或局部严重感染需抗感染治疗凝血功能障碍（如血友病，使用抗凝药物，出凝血功能检查异常）艾滋病、活动性结核病人做过脑室分流手术（非腰穿治疗不属于禁忌）孕妇或哺乳期妇女精神异常患者诊断尚未明确者第32页/共90页干细胞移植途径腰穿途径静脉途径局部种植CT引导脊髓穿刺移植头部立体定向移植脊髓损伤、脑损伤后遗症、脑血管病、股骨头坏死，有手术指征者，手术同时可做局部原位种植糖尿病足、下肢动脉闭塞性病变，进行性肌营养不良病变肢体局部注射介入途径股骨头缺血性坏死，经旋股内动脉、旋股外动脉及闭孔动脉移植急性心肌梗塞，经冠脉移植失代偿期肝硬化肝动脉、门静脉介入第33页/共90页干细胞临床应用方案干细胞基本治疗方案:一个疗程治疗4次，每次间隔4-7天脐带MSC每次用量：2*10e7-5*10e7脐带血干细胞：5*10e7-1*10e8第34页/共90页临床有效性研究概述从05年到2015年我们共治疗来自60多个国家的近万例病人，主要以治疗神经系统疾病为主，包含病种80余种。治疗的有效率较高。对于很多没有其他治疗方法的疑难病（比如视神经发育不全，遗传性共济失调、肌萎缩侧索硬化等）都得到很好的疗效。第35页/共90页第36页/共90页干细胞治疗伴随反应其他腰腿痛呕吐头痛发热0%0.5%1%1.5%2%0.36%0.23%0.4%1.6%0.8%干细胞移植病人总的伴随反应发生率为2.47%，伴随反应发生在干细胞治疗1-3天内.对症处理后症状均消失，没有观察到后遗症。第37页/共90页干细胞的临床应用小儿时期较常见的严重致残性疾病以运动障碍和姿势障碍为主要表现的综合征，常并发有癫痫、智力低下、语言障碍等表现发病率大约为1.5‰-5‰，小儿神经门诊人数的首位中国目前脑瘫患儿超过500万脑瘫

干细胞临床应用第38页/共90页干细胞的临床应用脑瘫干细胞移植：干细胞能辅助神经组织的修复，促进受损组织的再生，建立新的血管结构，可向受损及缺氧组织增加氧和营养物质的运输。有效率在90%以上常规治疗：无特殊治疗方法。以康复锻炼为主，但由于脑细胞受损后不能再生，大部分功能不能恢复，其康复效果有限干细胞临床应用第39页/共90页干细胞移植治疗脑瘫临床初步研究第40页/共90页干细胞移植治疗脑瘫临床初步研究第41页/共90页患者，加拿大，男，8个月，因“出生时缺血性脑损伤”入院治疗前：双臂僵硬紧靠身体，两手挛缩，安静不好动经5次干细胞治疗和康复训练后，患儿身体、脖子、手臂紧张度降低，手臂可伸展过肩，可伸手抓东西，手部灵活性增加，可自己翻身并到处移动，性格变活泼。。。干细胞临床应用

患者妈妈：他的改善对我们来说是惊喜万分。干细胞给了我们获得幸福的希望。。。。脑瘫第42页/共90页Timea，匈牙利4.5月重度脑积水女婴，脑室腹腔分流术后，大脑仍有2/5积水，专业智力及运动发育测评3.5周龄，左手始终握紧拳头，眼睛不能追视，不能四点支撑。仅作干细胞治疗6次及每天1次康复训练后，反应及四肢活动灵活，追视活跃，易笑，进食、睡眠正常，运动发育及智力测评综合达12周龄。脑瘫干细胞临床应用第43页/共90页Timea回国后引起轰动。后又来中国治疗了几个疗程，疗效显著。干细胞临床应用第44页/共90页病毒性脑炎后遗症

患者，男，11岁，因“不能言语，思维及四肢活动障碍11个月”入院入院后经过6次干细胞移植，配合康复训练，出院时双手能持物、翻书，情绪明显安静，伸舌、咀嚼等不自主运动消失。出院20日后采访可见双上肢运动功能基本恢复，四肢病理征消失。出院40余日后开始逐渐可以言语，广州儿童医院心理测评：“总体智力发育边缘水平（IQ=72分），智力结构平衡；社会生活能力正常。”

到随访时，罗坤运动功能完全恢复，言语清晰，与正常人无异。

干细胞临床应用第45页/共90页46干细胞的临床应用视神经发育不全

是最常见的先天性视盘异常性疾病，是由于胚胎发育到13-17mm时因某种尚不清楚的原因，使视网膜神经节细胞层分化障碍所致。为儿童低视力的重要原因之一。

2007年7月，北科干细胞技术使患有先天性视神经发育不全的美国盲童Rylea重见光明，成为世界上第一例采用干细胞技术实现部分复明的盲友。6岁的Rylea第一次看到妈妈的脸时说“妈妈，你真漂亮！”Rylea的成功治疗，在美国当地引起巨大反响，吸引了多家媒体及美国电视台多次报道。干细胞临床应用第46页/共90页视神经发育不全RyleashadBarlett,女,5岁,美国.主诉：（代诉）发现失明和身材矮小5年入院情况：患儿在出生后不久其父母发现患儿失明，体格发育迟缓，身材较同龄儿矮小。在美国当地医院检查提示双眼无光感，生长激素缺乏。入院检查：视力为零，眼球震颤。身材较同龄儿矮小。诊断:

先天性视神经发育不全合并生长激素缺乏症

治疗经过：共经过5次干细胞移植术(3次腰穿2次静脉)和康复治疗。

出院时情况：偶尔能看到极近距离的物体，对阳光的刺激有光感、瞳孔缩小。身高无明显变化。干细胞临床应用第47页/共90页美国医院检查报告证明：美国学步儿童接受北科干细胞技术治疗取得了显著的改善/News/index.cfm?articleid=467563&categoryid=15干细胞临床应用第48页/共90页干细胞的临床应用由遗传因素引起的肌肉变性疾病，男性发病，女性携带进行性的肌肉萎缩无力为主要临床表现，随着年龄增长肌肉逐渐萎缩直至完全丧失自理能力多数病人在25～30岁以前死于呼吸道感染﹑心力衰竭进行性肌营养不良常规治疗：尚无特殊有效的针对性治疗手段及药物干细胞治疗：干细胞能够促进肌肉再生,为肌营养不良的受损肌肉提供其缺乏的肌营养不良蛋白。有效率90%以上干细胞临床应用第49页/共90页干细胞临床应用

中国患者，孪生兄弟，10岁治疗前平卧时不能抬头，坐起费力，不能站立及行走，四肢肌力3级，体重分别为17、19公斤经4次干细胞治疗后，头可抬离床面，坐起明显灵活，可独立站立，并可步行20米远左右，四肢肌力达4级，食欲增强，体重分别增长3公斤第50页/共90页干细胞的临床应用糖尿病足干细胞治疗：干细胞移植技术可明显促进缺血部位新生血管形成，改善局部供血，有效缓解症状，溃疡得到迅速愈合，降低截肢及致残率。常规治疗：以控制血糖是基础，没有一种方法可完全治愈，截肢率高。但由于患者大多数年岁已高，手术创伤面大，伤口很难愈合，很容易感染和复发，而且截肢后，两年内死亡率为51%，内对侧肢体截肢率大于50%，5年内死亡率大于80%，因此常规治疗风险很高。干细胞临床应用第51页/共90页干细胞临床应用

中国患者，男性，68岁，糖尿病18年，左足拇趾溃烂、发黑3个月入院时左足红肿，大趾溃烂、发黑，局部有脓性渗透出液，经清创后第一趾、跖骨外露，创面深达足底，向后深达4-5厘米，伴有高血压、脑梗塞、慢性支气管炎、糖尿病肾病等进行干细胞移植术及大趾切除、缝合术，2月后完全愈合ABC第52页/共90页术前术后干细胞移植前后血管造影干细胞临床应用第53页/共90页干细胞的临床应用小脑萎缩

海口晚报网报道：57岁的袁某是北京市文物研究所的考古学家，从2004年1月开始，就发现自己走路出现不平衡的症状，2005年底，已经不能独自提重物上楼了。“走路脚就找不着准地，脚足挪着走的，当时光皮鞋就磕坏了好几双。”他说。“当时我们是抱着试一试的想法来的。”太太孙女士说。在该院接受6次干细胞移植治疗后，奇迹发生了。袁某进行性加重的小脑萎缩病情得到控制，并实现逆转性恢复。记者在采访袁某时发现，他已经能够流利的和别人交谈，能独立走路，写字，上下楼梯都不用别人搀扶。干细胞临床应用第54页/共90页小脑萎缩AndreyJones，女，75岁，英国治疗前步行不稳，夸张的“企鹅式”走路，双脚分离很开，脚趾向外，身体不能平衡，不借助外力，无法上楼梯，感觉极度疲劳，出行借助轮椅4次干细胞治疗后，行走和协调能力得到改善，正常步态，行走时双脚间距变近，脚趾指向前方，疲劳减轻，每次可步行30分钟左右干细胞临床应用第55页/共90页干细胞的临床应用股骨头坏死

股骨头坏死是由于多种原因导致的股骨头局部血运不良，从而引起骨细胞进一步缺血、坏死、骨小梁断裂、股骨头塌陷的一种病变。干细胞临床应用第56页/共90页干细胞临床应用帕金森干细胞移植治疗帕金森病的研究进展

王晶，梁维邦干细胞临床应用第57页/共90页干细胞临床应用干细胞移植的脊髓损伤患者420例，其中完全性脊髓损伤组42例，不完全性脊髓损伤组378例。首先通过手术或立体定向的方法把干细胞直接移植在脊髓损伤部，然后再根据患者病情经腰穿途径或静脉途径移植，每次移植间隔为1周，干细胞移植量为(2~3)×102/kg。脊髓损伤第58页/共90页干细胞临床应用脊髓损伤第59页/共90页脊髓损伤动物模型干细胞治疗效果正常大鼠脊髓损伤大鼠一周后四周后干细胞临床应用第60页/共90页患者术前不能独立坐起患者干细胞移植术后15天余借助外力可坐起患者术后20余天在外力下可站立，感觉平面明显下移患者干细胞治疗1个月稍借助外力可站立脊髓损伤干细胞临床应用第61页/共90页患者吴某：男性，32岁，4年前因外伤致胸12压缩性骨折，脊髓损伤截瘫。双下肢完全瘫痪，肌力0级，排便排尿功能障碍。伤后3年开始接受干细胞治疗4次。移植后1个月感觉平面降至L1水平，大小便逐渐可控，可自行站立。脊髓损伤干细胞临床应用第62页/共90页干细胞临床应用重型颅脑损伤患者48例。其中男30例，女18例;年龄16～59岁，平均41.8岁。排除标准:(1)合并其他重要脏器损伤的病例;(2)年龄≥60岁;(3)高度过敏体质或者有严重过敏史者;(4)合并心、肝、肾或其他脏器严重功能障碍;(5)凝血功能障碍;(7)不同意MSCs移植治疗者。随机分为两组：移植组22例，对照组26例。

颅脑损伤第63页/共90页干细胞合治疗遗传性共济失调30例干细胞临床应用第64页/共90页干细胞临床应用系统性硬化症是一种自身免疫性疾病，主要特点是免疫系统激活、内皮细胞功能失调导致的血管损坏、皮肤和各种脏器胶原沉积，常规免疫抑制治疗效果不显著。女性患者，41岁，2002年患系统性硬化，指尖和指关节共有6个疼痛性溃疡，经甲氨蝶呤、类固醇、硫唑嘌呤和PUVA治疗无效。2006年9月进行干细胞治疗，静脉回输MSC6×107个，同时回输泼尼松龙7.5mg和咪唑硫嘌呤100mg。治疗后患者自觉双手冷感有所缓解，3个月后溃疡的疼痛减轻，6个月后溃疡痊愈，血管超声显示手及手指血液循环明显改善。系统性硬化第65页/共90页干细胞临床应用骨关节炎是一种退行性关节疾病，又称增生性关节炎、退行性关节炎或骨关节病，是一种中老年人群的常见病、多发病，随年龄增长而患病率明显增加。增龄、肥胖、劳损、创伤等诸多因素引起的关节软骨退化损伤、关节边缘和软骨下骨反应性增生。60岁以上人群的患病率为50%，最终致残率高达53%，已经严重影响了我国中老年人的生活质量和身体健康。

骨关节炎第66页/共90页干细胞临床应用干细胞可迁移至病灶部位；修复受损的关节软骨；促进骨或软骨细胞的再生；同时还可起到营养、抗炎及抗免疫的作用；可使临床症状得到明显改善；延缓或阻止疾病的进展。

干细胞治疗骨关节炎第67页/共90页干细胞临床应用干细胞治疗关节软骨缺损第68页/共90页干细胞临床应用干细胞治疗烧伤第69页/共90页干细胞治疗肌萎缩侧索硬化症干细胞临床应用第70页/共90页综合治疗结合干细胞移植治疗182例股骨头坏死的临床疗效观察干细胞临床应用第71页/共90页干细胞治疗失代偿期肝硬化干细胞临床应用第72页/共90页干细胞治疗失代偿期肝硬化干细胞临床应用第73页/共90页干细胞治疗失代偿期肝硬化干细胞临床应用第74页/共90页75干细胞治疗自闭症干细胞临床应用第75页/共90页1．干细胞移植治疗自闭症安全、耐受、可行；2.临床疗效：A.CARS、ABC、SI评分：混合组（脐带间充质+脐血+基础治疗组）疗效最优，脐血组（脐血+基础治疗组）次之，基础治疗组第三位；B．干细胞移植组CARS改善方面：活动水平、非语言交流、语言交流、近处感觉反应、视觉反应、与非生命物体的关系、躯体运用能力与模仿；C．干细胞移植组ABC评分改善的因子：刻板行为、兴奋性与不恰当语言；D．干细胞组临床症状改善时间早于基础治疗；一般在移植后2-4个月时与基线比较有明显改善，且持续到半年的观察期末；而对照组中仅在6个月时出现。研究结论干细胞临床应用第76页/共90页脐带间充质干细胞移植治疗难治性SLE干细胞临床应用第77页/共90页脐带间充质干细胞移植治疗难治性SLE干细胞临床应用第78页/共90页脐带间充质干细胞移植治疗难治性SLE干细胞临床应用第79页/共90页康复科85例脐带MSC移植的回顾性研究脑梗死23例，骨质疏松15例，骨性关节炎8例，脑出血5例，脊髓损伤、类风湿性关节炎和骨折各4例，股骨头坏死3例，脑外伤和外伤性半月板损伤各2例，脑栓塞、椎基底动脉供血不足、脑性瘫痪、帕金森病、多系统萎缩、遗传性共济失调、强直性脊柱炎、痛风性关节炎、骶髂关节炎、滑膜炎、肩周炎、动脉硬化闭塞症、血栓闭塞性脉管炎、糖尿病足、慢性阻塞性肺病各1例例数>2的病种按总有效率排序：骨质疏松（100%）、骨折（100%）、骨性关节炎（87.5%）、脊髓损伤（75%）、类风湿性关节炎（75%）、股骨头坏死（66.67%）、脑梗死（60.87%）、脑出血（20%）干细胞临床应用第80页/共90页康复科85例脐带MSC移植的回顾性研究骨质疏松和骨折患者治疗后NRS疼痛评分均比治疗前显著降低（P<0.01，P<0.05）。骨性关节炎患者治疗后Lequesne指数和WOMAC评分均比治疗前显著降低（P<0.01）。脑梗死患者治疗后NIHSS评分和Barthel评分均比治疗前显著降低（P<0.01，P<0.05）所有病例均未发现移植不良反应结论：脐带间充质干细胞移植在康复医学领域具有良好的临床应用前景干细胞临床应用第81页/共90页影响干细胞治疗效果的因素干细胞移植数量、活力、存活率干细胞移植的时机和频率个体差异（年龄、损伤程度、性别等）病种差异－外源性效果好干细胞移植的途径干细胞移植是否配合其它治疗……干细胞临床应用第82页/共90页干细胞治疗的几个关键问题第83页/共90页1、病例的选择

目前医学上用传统治疗方法无法解决的难治性疾病适应症和禁忌症的选择

高过敏体质及既