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血清碱性磷酸酶活性测定磷酸本二钠法酶活力测定与酶法分析酶活力测定酶活力：即是酶活性，是表示催化某一特定反应的能力。可以用在一定条件下所催化的某一特定化学速度表示。酶催化反应速度越快，酶活性，反之则愈低。底物减少量或生成物增加量酶促反应速度=单位时间影响酶促反应速度的因素包括底物浓度、酶浓度、ph值、温度、激活剂、抑制剂等。酶活力单位指：在特定条件下1分钟能将1微摩尔底物转化为底物所需酶量，或转化底物中1微摩尔的有关基团的酶数。酶的比活力：单位质量酶蛋白或单位体积酶制剂所含有酶活力单位数。方法：1.终止测定法（定时法或终点法）2.动力学分析法（连续监测法或速率法）3.物质含量的测定方法酶活力测定和酶法分析在医学上的应用实验目的1.熟悉酶活性测定方法的一般原理2.掌握血清ALP测定原理与临床意义3.熟悉终止法和动力学测定法实验原理在PH10环境中，ALP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，苯酚与4-氨基安替比林反应生成色素原，该色素原经铁氰化钾氧化生成红色醌亚衍生物。测定红色物质的吸光度就可以计算酶活性的大小。反应式如下：

磷酸苯二钠+H2O——苯酚+磷酸氢二钠苯酚+4-氨基安替比林——红色醌亚胺衍生物实验操作取试管4支，按下表操作：立即混匀。用510nm波长比色，以蒸馏水调零点，读取各管吸光度。计算

ALP活性=（A测定—A对照）/（A标准—A空白）*0.05*100(金氏单位）注意事项1．底物溶液中不应含有游离酚，如有酚则空白管显红色，说明磷酸苯二钠已经开始分解，应弃去不用。2．铁氰化钾溶液中加入硼酸有稳定显色作用。该液应避光保存，如出现蓝绿色即应废弃。3．加入铁氰化钾溶液后必须立即混匀，否则显色不完全。4．黄疸血清及溶血血清应分别作对照管，一般血清标本可以共用对照管标准曲线法制备如下：取试管6支，分别加酚标准液(1ml=0．1mg)，0、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4ml，各管依次加复合基质液3.1、3.05、3.0、2.9、2.8、2.7ml。混匀后37℃水浴保温5分钟，各管加入1.0ml碱性溶液，再加0.5％铁氰化钾2.0ml，立即混匀。静置10分钟，510nm波长下比色。将以上各管

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