高效液相色谱习题解答

高效液相色谱法习题一、思虑题1．从分别原理、仪器结构及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。2．液相色谱中影响色谱峰展宽的要素有哪些?与气相色谱对比较,有哪些主要不一样之处?3．在液相色谱中,提升柱效的门路有哪些?此中最有效的门路是什么?4．液相色谱有几种种类?5．液-液分派色谱的保存机理是什么？这类种类的色谱在剖析应用中，最适合分其余物质是什么？6．液-固分派色谱的保存机理是什么？这类种类的色谱在剖析应用中，最适合分其余物质是什么？7．化学键合色谱的保存机理是什么？这类种类的色谱在剖析应用中，最适合分其余物质是什么？8．离子互换色谱的保存机理是什么？这类种类的色谱在剖析应用中，最适合分其余物质是什么？9．离子对色谱的保存机理是什么?这类种类的色谱在剖析应用中,最适合分其余物质是什么?10．空间排阻色谱的保存机理是什么？这类种类的色谱在剖析应用中，最适合分其余物质是什么？11．在液-液分派色谱中，为何可分为正相色谱及反相色谱？12．何谓化学键合固定相？它有什么突出的长处？13．何谓化学克制型离子色谱及非克制型离子色谱？试述它们的基来源理14．何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？15．高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不一样之处？16．以液相色谱进行制备有什么长处？17．在毛细管中实现电泳分别有什么长处？18．试述CZE的基来源理19．试述CGE的基来源理20．试述MECC的基来源理二、选择题1．液相色谱适合的剖析对象是（）。A低沸点小分子有机化合物B高沸点大分子有机化合物C所有有机化合物D所有化合物2．HPLC与GC的比较，可忽视纵向扩散项，这主假如因为（）。A柱前压力高B流速比GC的快C流动相钻度较小D柱温低3．组分在固定相中的质量为MA(g)，在流动相中的质量为MB（g），而该组分在固定相中的浓度为CA（g·mL－1），在流动相中浓度为CB（g·mL－1），则此组分的分派系数是()。AmA/mBBmB/mACCB/CADCA/CB。4．液相色谱定量剖析时，不要求混淆物中每一个组分都出峰的是＿。A外标标准曲线法B内标法C面积归一化法D外标法5．在液相色谱中，为了改良分其余选择性，以下举措（）是有效的？A改变流动相种类B改变固定相种类C增添流速D改变填料的粒度6．在分派色谱法与化学键合相色谱法中，选择不一样类其余溶剂（分子间作使劲不一样），以改良分别度，主假如（）。A提升分派系数比B容量因子增大C保存时间增添D色谱柱柱效提升7．分别结构异构体，在下述四种方法中最适合的选择是（）。A吸附色谱B反离子对色谱C亲和色谱D空间排阻色谱8．分别糖类化合物，选以下的柱子（）最适合。AODS柱B硅胶柱C氨基键合相柱D氰基键合相柱9．在液相色谱中，梯度洗脱合用于分别（）。A异构体B沸点邻近，官能团相同的化合物沸点相差大的试样D极性变化范围宽的试样10．在高效液相色谱中，采纳254nm紫外控制器，下述溶剂的使用极限为（A甲醇210nmB乙酸乙醋260nmC丙酮330nm

）。11吸附作用在下边哪一种色谱方法中起主要作用（

）。液一液色谱法B液一固色谱法C键合相色谱法D离子互换法12．当用硅胶为基质的填料作固定相时，流动相的pH范围应为（）。AC1

在中性地区一14

B5D2

一8一813．在液相色谱中，提升色谱柱柱效的最有效门路是（A减小填料粒度B适合高升柱温

）。降低流动相的流速D增大流动相的流速14．在正相色谱中，若适合增大流动相极性则（）。A样品的k降低，tR降低B样品的k增添，tR增添C相邻组分的增添D对基本无影响15．用ODS柱剖析一有机弱酸混淆物样品，以某一比率甲醇一水为流动相时，样品容量因子较小，若想使容量因子适合增添，较好的方法是（）。A增添流动相中甲醇的比率B增添流动相中的水的比率C流动相中加人少许HAcD流动相中加人少许的氨水16．假如样品比较复杂，相邻两峰间距离太近或操作条件不易控制稳固，要正确丈量保存值有必定困难时，可选择以下方法（）定性。A利用相对保存值定性B加人已知物增添峰高的方法定性C利用文件保存值数据定性D与化学方法配合进行定性17．液相色谱中通用型检测器是（）。A紫外汲取检测器B示差折光检测器C热导池检测器D荧光检测器18．离子色谱的主要特色是（）。高压、高效、高速、高分辨率、高敏捷度采纳柱后克制技术和电导检测，特别适合离子剖析采纳了阴离子专用检测器，对阴离子剖析有高敏捷度采纳紫外检测器合柱压衍生装置，对离子剖析有高效19．高压、高效、高速是现代液相色谱的特色，采纳高压主假如因为（）。A可加速流速，缩短剖析时间B高压可使分别效率明显提升C采纳了细粒度固定相所致D采纳了填补毛细管柱20．液相色谱的H一u曲线（）。A与气相色谱的相同，存在着minBH随流动相的流速增添而降落CHHDH受u影响很小随流动相的流速增添而上涨21与气相色谱对比，在液相色谱中（）。分子扩散项很小，可忽视不计，速率方程式由两项构成涡流扩散项很小，可忽视不计，速率方程式由两项构成传质阻力项很小，可忽视不计，速率方程式由两项构成速率方程式相同由三项构成，二者相同22．在液相色谱中，以下检测器可在获取色谱流出曲线的基础上，同时获取被分别组分的三维彩色图形的是（）。A光电二极管阵列检测器B示差折光检测器C荧光检测器D电化学检测器23．不一样种类的有机物，在极性吸附剂上的保存次序是（）。A饱和烃、烯烃、芳烃、醚B醚、烯烃、芳烃、饱和烃C烯烃、醚、饱和烃、芳烃D醚、芳烃、烯烃、饱和烃24．氧化铝固定相色谱柱不适合选哪一种物质作流动相（）。A甲醇B正己烷C煤油D环烷酸25．液相色谱中不影响色谱峰扩展的要素是（）。A涡流扩散项B分子扩散项C传质扩散项D柱压效应26．在液相色谱中，常用作固定相又可用作键合相基体的物质是（）。A分子筛B硅胶C氧化铝D活性炭27．样品中各组分的出柱次序与流动相的性质没关的色谱是（）。A离子互换色谱B环糊精色谱C亲和色谱D凝胶色谱28．在液相色谱中，固体吸附剂合用于分别（）。A异构体B沸点邻近，官能团相同的颗粒沸点相差大的试样D极性变换范围29．为测定邻氨基苯酸中微量杂质苯胺，选择下边哪一种条件（）。A硅胶固定相，异丙醚一己烷流动相B硅胶固定相，水一甲醇流动相；CODS键合相，水一甲醇流动相DODS键合相，异丙醚一己烷流动相。30．在以硅胶为固定相的吸附柱色谱中，错误的说法是（）。A组分的极性越强，被固定相吸附的作用越强B物质的相对分子质量越大，越有益于吸附C流动相的极性越强，组分越简单被固定相所吸附D吸附剂的活度系数越小，对组分的吸附力越大31．键合相的键合基团的碳链长度增添后（）。A极性减小B极性增大载样量增大D载样量减小32．在反相色谱法中，若以甲醇一水为流动相，增添甲醇的比率时，组分的容量因子化为（）。Ak与tR增大Bk与tR减小Ck与tR不变Dk增大，tR减小

k与保存时间

tR的变33水在下述色谱中，洗脱能力最弱（作为底剂）的是（A正相色谱法B反相色谱法C吸附色谱法D空间排挤色谱法

）。34．在以下方法中，组分的纵向扩散可忽视不计的是（A毛细管气相色谱法B高效液相色谱法C气相色谱法D超临界色谱法

）。三、填空题1．高效液相色谱仪一般可分为梯度淋洗系统、高压输液泵、流量控制系统、进样系统和分别柱及检测器等部分。2．常用的高效液相色谱检测器主假如紫外、示差折光、荧光、电导和电化学检测器等。3．高效液相色谱中的梯度洗脱技术近似于气相色谱中的程序升温，可是前者连续改变的是流动相的构成与极性，而不是温度。4．高效液相色谱柱按内径大小大概可分为三种种类：内径小于2mm的称为细管或微管径柱；内径在2-5mm范围内的是惯例高效液相色谱柱；内径大于5mm的一般成为半制备柱或制备柱。5．高效液相色谱固定相的性质和结构的差异，使分别机理不一样而构成各样色谱种类，主要有液-固吸附色谱、液-液分派色谱、排阻色谱、亲和色谱和离子互换色谱等。6．在液－液分派色谱中，关于亲水固定液采纳流动相，即流动相的极性_______________固定相的极性称为正相分派色谱。7．正相分派色谱合用于分别化合物、极性的先流出、极性的后流出。8．流动相常用的脱气方法有、、和。9．高压输液泵是高效液相色谱仪的重点零件之一，按其工作原理分为和两大类。10．离子对色谱分派容量（k）与萃取均衡常数（KRP）关系：正相离子对色谱；反相离子对色谱。11．离子对色谱法是把加人流动相中，被剖析样品离子与生成中性离子对，从而增添了样品离子在非极性固定相中的，使增添，从而改良分别成效。12．无克制离子色谱法的固定相采纳离子互换树脂，流动相是溶液，采纳检测器。13．在液相色谱中，溶质分子与极性吸附中心的互相作用，会随溶质分子上官能团极性的__________或官能团数量的而增添，这会使溶质在固定相上的保存值______。14．色谱操作时，假如超载，即进样量超出柱容量，则柱效快速_______，峰变________。15．、、是现代液相色谱的明显特色，其固定相多采用。16．高效液相色谱的发展趋向是减小和以提升柱效。17．在液相色谱中，为改良分别度并调整出峰时间，可经过改变流动相和______的方法达到。18．在液相色谱中，速率理论方程中的项很小，可忽视不计，vanDeemter方程式可写成。19．经过化学反响，将键合到表面，此固定相当为化学键合固定相。20．与液一液分派色谱对比，键合相色谱的主要长处是化学键合固定相稳固，在使用过程中；合用于；适合于k范围宽的样品剖析。21．液相色谱流动相应使用黏度溶剂，可减小溶质的，有益于提升柱效。22．在液相色谱中，色谱特别适合于分别异构体，洗脱方式合用于分别极性变化范围宽的试样。23．以ODS键合固定相，甲醇一为流动相时，该色谱条件为色谱。24．用凝胶为固定相，利用凝胶的与被分别组分分子间的相对大小关系，而分别、剖析的色谱法，称为空间排阻（凝胶）色谱法。凝胶色谱的选择性只好经过选择适合的来实现。25．在正相色谱中，极性的组分先出峰，极性的组分后出峰。四、正误判断1．液一液色谱流动相与被分别物质互相作用，流动相极性的细小变化，都会使组分的保存值出现较大的改变。（）2．利用离子互换剂作固定相的色谱法称为离子互换色谱法。（）3．紫外汲取检测器是离子互换色谱法通用型检测器。（）4．检测器性能利害将对组分分别产生直接影响。（）5．色谱归一化法只好合用于检测器对所有组分均有响应的状况。（）6．高效液相色谱合用于大分子，热不稳固及生物试样的剖析。（）7．高效液相色谱中往常采纳调理分别温度和流动相流速来改良分别成效。（）8．离子互换键合固定相拥有机械性能稳固，可使用小粒度固定相和高柱压来实现快速分别。（）9．离子色谱中，在剖析柱和检测器之间增添了一个“克制柱”，以增添洗脱液本底电导。（）10．在液相色谱中为防止固定相的流失，流动相与固定相的极性差异越大越好。（）11．正相分派色谱的流动相极性大于固定相极性。（）12．反相分派色谱适于非极性化合物的分别。（）13．高效液相色谱法采纳梯度洗脱，是为了改变被测组分的保存值，提升分别度。（）14．液相色谱柱一般采纳不锈钢柱、玻璃填补柱。（）15．液相色谱固定相往常为粒度5～10m。（）16．示差折光检测器是属于通用型检测器，适于梯度淋洗色谱。（）17．离子互换色谱主要采纳有机物作流动相。（）18．体积排阻色谱所用的溶剂应与凝胶相像，主假如防备溶剂吸附。（）19．在液一液色谱中，为改良分别成效，可采纳梯度洗脱。（）20．化学键合固定相拥有优秀的热稳固性，不易吸水，不易流失，可用梯度洗脱。（）21．液相色谱的流动相又称为淋洗液，改变淋洗液的构成、极性可明显改变组分分别成效。（）22．液相色谱指的是流动相是液体，固定相也是液体的色谱。（）23．高效液相色谱柱柱效高，凡是能用液相色谱剖析的样品不用气相色谱法剖析。（）24．在液相色谱中，流动相的流速变化对柱效影响不大。（）25．液相色谱的H一u曲线与气相色谱的H一u相同，流速都存在一个最低点。（）26．液相色谱的中引转机谱扩展的主要原由是分子扩散项。（）27．正相键合色谱的固定相为非（弱）极性固定相，反相色谱的固定相为极性固定相。（）28．某人用凝胶色谱分别易高聚物样品，分别状况很差，他改变流动相的构成后，分别状况大为改良，这种说法对吗？（）29．在离子互换色谱中使用的固定相也属于一种键合固定相。（）30．离子对色谱也可分为正相离子和反相离子对色谱，反相离子对色谱，往常采纳极性固定相。高效液项色谱法习题解答一、思虑题1．从分别原理、仪器结构及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。答：二者都是依据样品组分与流动相和固定相互相作使劲的差异进行分其余。从仪器结构上看，液相色谱需要增添高压泵以提升流动相的流动速度，战胜阻力。同时液相色谱所采纳的固定相种类要比气相色谱丰富的多，分别方式也比许多样。气相色谱的检测器主要采纳热导检测器、氢焰检测器和火焰光度检测器等。而液相色谱则多使用紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等。可是二者均可与MS等联用。二者均具分别能力高、敏捷度高、剖析速度快，操作方便等长处，但沸点太高的物质或热稳固性差的物质难以用气相色谱进行剖析。而只需试样能够制成溶液，既可用于HPLC剖析，而不受沸点高、热稳固性差、相对分子量大的限制。2．液相色谱中影响色谱峰展宽的要素有哪些?与气相色谱对比较,有哪些主要不一样之处?答：液相色谱中引转机谱峰扩展的主要要素为涡流扩散、流动的流动相传质、滞留的流动相传质以及柱外效应。在气相色谱中径向扩散常常比较明显，而液相色谱中径向扩散的影响较弱，常常能够忽视。此外，在液相色谱中还存在比较明显的滞留流动相传质及柱外效应。3．在液相色谱中,提升柱效的门路有哪些?此中最有效的门路是什么?答：液相色谱中提升柱效的门路主要有：1）提升柱内填料装填的平均性；2）改良固定相：3）粒度;选择薄壳形担体;采纳低粘度的流动相;4）适合提升柱温此中，减小粒度是最有效的门路。.4．液相色谱有几种种类?答：液相色谱有以下几种种类：液-液分派色谱；液-固吸附色谱；化学键合色谱；离子互换色谱；离子对色谱；空间排阻色谱等。5．液-液分派色谱的保存机理是什么？这类种类的色谱在剖析应用中，最适合分其余物质是什么？答：液－液分派色谱的保存机理是经过组分在固定相和流动相间的多次分派进行分其余。能够分别各样无机、有机化合物。6．液-固分派色谱的保存机理是什么？这类种类的色谱在剖析应用中，最适合分其余物质是什么？答：液-固吸附色谱是经过组分在两相间的多次吸附与解吸均衡实现分其余。最适合分其余物质为中等相对分子质量的油溶性试样，凡是能够用薄层色谱分其余物质均可用此法分别。7．化学键合色谱的保存机理是什么？这类种类的色谱在剖析应用中，最适合分其余物质是什么？答：化学键合色谱中因为键合基团不可以所有覆盖拥有吸附能力的载体，因此同时按照吸附和分派的机理，最适合分其余物质为与液-液色谱相同。8．离子互换色谱的保存机理是什么？这类种类的色谱在剖析应用中，最适合分其余物质是什么？答：离子互换色谱和离子色谱是经过组分与固定相间亲协力差异而实现分其余。各样离子及在溶液中能够离解的物质均可实现分别，包含无机化合物、有机物及生物分子，如氨基酸、核酸及蛋白质等。9．离子对色谱的保存机理是什么?这类种类的色谱在剖析应用中,最适合分其余物质是什么?答：在离子对色谱色谱中，样品组分进入色谱柱后，组分的离子与对离子互相作用生成中性化合物，从而被固定相分派或吸附从而实现分其余。各样有机酸碱特别是核酸、核苷、生物碱等的分别是离子对色谱的特色。10．空间排阻色谱的保存机理是什么？这类种类的色谱在剖析应用中，最适合分其余物质是什么？答：空间排阻色谱是利用凝胶固定相的孔径与被分别组分分子间的相对大小关系，而分别、剖析的方法。最适合分其余物质是：此外，另有手性色谱、胶束色谱、环糊精色谱及亲合色谱等机理。11．在液-液分派色谱中，为何可分为正相色谱及反相色谱？答：采纳正相及反相色谱是为了降低固定液在流动相中的溶解度从而防止固定液的流失。12．何谓化学键合固定相？它有什么突出的长处？答：利用化学反响将固定液的官能团键合在载体表面形成的固定相当为化学键合固定相。长处：固定相表面没有液坑,比一般液体固定相传质快的多；无固定相流失，增添了色谱柱的稳固性及寿命；能够键合不一样的官能团，能灵巧地改变选择性，可应用与多种色谱种类及样品的剖析；有益于梯度洗提，也有益于配用敏捷的检测器和馏分的采集。13．何谓化学克制型离子色谱及非克制型离子色谱？试述它们的基来源理答：在离子色谱中检测器为电导检测器，以电解质溶液作为流动相，为了除去强电解质背景对电导检测器RHNaOHRNaH2ORHNaXRNaHX的扰乱，往常除了剖析柱外，还增添一根克制柱，这类双柱型离子色谱法称为化学克制型离子色谱法。比如，为了分别阴离子，常使用NaOH溶液为流动相，钠离子的扰乱特别严重，这时可在剖析柱后加一根克制柱，此中装填高容量H+型阳离子互换树脂，经过离子互换，使NaOH转变为电导值很小的H2O，从而除去了背景电导的影响。可是假如采纳低电导的流动相（如１×10-４~5×10-4M的苯甲酸盐或邻苯二甲酸盐），则因为背景电导较低，不扰乱样品的检测，这时候不用加克制柱，只使用剖析柱，称为非克制型离子色谱法。14．何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？答：在一个剖析周期内，按必定程序不停改变流动相的构成或浓度配比，称为梯度洗提，是改良液相色谱分其余重要手段。CGE的分别原梯度洗提与气相色谱中的程序升温近似，可是前者连续改变的是流动相的极性、者改变的温度。程序升温也是改良气相色谱分其余重要手段。15．高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不一样之处？

pH或离子强度，尔后答：在液相色谱中为了承受高压，经常采纳停流进样与高压定量进样阀进样的方式．16．以液相色谱进行制备有什么长处？答：以液相色谱进行制备时，分别条件平和，分别检测中不会致使试样被损坏，切易于回收原物．17．在毛细管中实现电泳分别有什么长处？答：毛细管因为散热效率很高，能够减少因焦耳热效应造成的区带展宽，因此能够采纳较高的电压，战胜了传统电泳技术的限制，极大地提升分别效率，并且分别时间缩短，试样剖析范围宽，检测限低。关于大分子的分别常常比色谱方法拥有更高的柱效。18．试述CZE的基来源理答：毛细管区带电泳（CZE）是在指外加电场的作用下，溶质在毛细管内的背景电解质溶液中以必定速度迁徙而形成一个一个独立的溶质带的电泳模式，其分别基础是淌度的差异。因为中性物质的淌度差为零，因此不可以分别中性物质。带电粒子的迁徙速度为电泳速度与电渗流的矢量和。在缓冲溶液中带正电的粒子因为迁徙方向与电渗流相同，流动速度最快，最初流出，负电荷粒子的运动方向与电渗流相反，最后流出，中性粒子的电泳速度与电渗流相同，因此迁徙速度介于二者之间。这样各样粒子因差速迁徙而达到区带分别，这就是CZE的分别原理。19．试述CGE的基来源理答：毛细管凝胶电泳（CGE）是毛细管内填补凝胶或其余筛分介质，如交联或非交联的聚丙烯酰胺。荷质比相等，但分子的大小