MDCK细胞流感疫苗的安全性

（优选）MDCK细胞流感疫苗的安全性APresentationtotheCSMonCilansetron当前1页，总共40页。目录Solvay公司的背景和流感疫苗Solvay公司开发MDCK流感疫苗的计划MDCK细胞疫苗的安全性结论2当前2页，总共40页。SolvayPharmaceuticals简介Solvay药业是SolvayGroup的一部分名列全球前40家的大药厂有12,800员工2004年销售额为:28亿美元研究和开发的主要地点Marietta,GA法国:DijonandParis德国:Hanover荷兰:Weesp,3当前3页，总共40页。SolvayPharmaceuticals和Influenza疫苗鸡胚流感疫苗本公司是欧洲第一家生产流感疫苗的厂家(1950)55年来生产从位间断总生产量>2.5亿剂量全球第四大流感疫苗供应厂家;超过50个国家4当前4页，总共40页。SolvayPharmaceuticals和Influenza疫苗Solvay公司生产的鸡胚疫苗供应国家分布在全球荷兰Weesp流感疫苗生产设施美国总部

Marietta,GA5当前5页，总共40页。Whyacell-basedvaccineproject?鸡胚疫苗是开放性生产系统,易于污染由于会发生禽病,鸡胚可能不会保证供应

6当前6页，总共40页。为何使用MDCK细胞?对流感病毒的敏感谱广;在流感的研究和检测中有扎实的经验病毒产量高在经济上合算病毒纯度高

7当前7页，总共40页。SolvayPharmaceuticals公司的MDCK

细胞流感疫苗计划已经有10年以上的经验

微载体,无血清进行了临床前和临床开发计划获得荷兰的许可商业性生产规模设施将获得商业性生产许可,接着是全球许可,包括美国8当前8页，总共40页。SolvayPharmaceuticals公司生产

MDCK疫苗的设施荷兰SolvayPharmaceuticals公司(Weesp城)9当前9页，总共40页。细胞系的潜在性风险进行了定性和定量的检定在下游生产过程中(DSP)量化减少了这些风险保留在接种者疫苗成份中MDCK细胞的残留物的潜在风险进行了定量CBER’sDefined-RisksApproachLewisAMJr,KrauseP,PedenK.DevBiol.2001,vol106,pp513-535MDCK细胞的安全性评估10当前10页，总共40页。细胞系的检定生产的下有过程终产品的安全性MDCK细胞安全性评估11当前11页，总共40页。MDCK细胞安全性评估细胞系的特征传代历史可能的外来因子,包括病原体致癌性12当前12页，总共40页。1a.细胞系的特征–历史未污染牛海绵状(组织)脑病样的病原(BovineSpongiformEncephalopathy-likeagents)1958:从狗肾分离1964:存放在美国ATCC1991:在ATCC制备日常储备1992:制备主细胞库和工作细胞库13当前13页，总共40页。1a.细胞系特征-传代历史传代用于疫苗生产

0:从狗肾分离49:储存在美国ATCC52:制备成ATCC工作日常储备库存97:制备延长的细胞库56:制备成主细胞系库57:制备成工作细胞库传代用于安全性评估14当前14页，总共40页。1b.细胞系特征–外源因子Adventitiousagents支原体无细菌和真菌在试管内在检测细胞系中共培养在机体水平检测不同的种类电镜检查反转录病毒检测在Solvay公司的MDCK细胞中未发现有外源性微生物15当前15页，总共40页。特异性检测自然感染的狗病毒特异性检测对MDCK细胞敏感的病毒1b.细胞系特征–外源因子在Solvay公司的MDCK细胞中未发现有外来的病毒感染16当前16页，总共40页。1c.细胞系特征

–致癌性表型特征在动物模型上肿瘤形成

疫苗成品检测完整细胞

细胞成份残余细胞DNA

在疫苗接种者中似无同种异体移植物排斥17当前17页，总共40页。完整细胞潜在的致瘤性

在成熟免疫缺损的4周裸鼠中研究6个月细胞溶离液的潜在的致瘤性

在成熟和新生的裸小鼠,新生的大鼠和新生的地鼠中观察6个月DNA潜在的致癌性在成熟和新生的裸小鼠,新生的大鼠和新生的地鼠中观察6个月1c.细胞系特征–致瘤性18当前18页，总共40页。完整细胞:在4周裸鼠研究6个月

完全消退---0/26101MDCK,p98sacsac10925/26阳性对照(107HeLa)230223/26107MDCK,p56(ATCC)4272830/30107MDCK,p9856218/26105MDCK,p98---0/26103MDCK,p98---0/26阴性对照6mos40days瘤状物大小(mm2)发病率1c.细胞系特征

–致瘤性19当前19页，总共40页。完整细胞:在4周裸鼠6个月的研究

注射部位瘤状物在注射部位肿瘤(MDCK腺癌)脾脏肿瘤(hystiocytictumor)肺部肿瘤(腺瘤)阴性对照0/26---101MDCK,p980/26-1*-103MDCK,p980/26---105MDCK,p9818/266--107MDCK,p9830/3016-1107MDCK,p56(ATCC)23/26--11c.细胞系特征

–致瘤性*Non-MDCK20当前20页，总共40页。107

个细胞溶离液:6个月致癌性研究试验组数量在注射部位瘤状物其它组织肿瘤4w+0-4d裸鼠细胞溶离液6800阴性对照50000-7d地鼠细胞溶离液9800阴性对照54000-7d大鼠细胞溶离液9100阴性对照58001c.细胞系特征

–致瘤性21当前21页，总共40页。0.1mgMDCK-DNA:6个月致癌性研究结果实验组数量在注射部位的瘤状物其它组织肿瘤4w+0-4d裸鼠0.1mgDNA4802阴性对照48000-7d地鼠0.1mgDNA6400阴性对照48000-7d大白鼠0.1mgDNA6900阴性对照39001c.细胞系特征

–致瘤性22当前22页，总共40页。DNA研究肿瘤的特征组织病理1只鼠:肝脏的组织细胞瘤1只鼠:胸腔淋巴瘤在免疫缺损裸鼠没有未意料到的自发性肿瘤1c.细胞系特征

–致瘤性23当前23页，总共40页。追踪研究MDCK细胞DNA在裸鼠较大量的研究大白鼠胚胎和新生的安全性研究1c.细胞系特征

–致瘤性24当前24页，总共40页。剂量在≥105时在免疫缺损动物有中等程度的致瘤性大部分的瘤状体部分消退,剂量在105时有5/25,107

时有4/28完全消退传代数增加和/或适应于无血清培养生长时致瘤性增加在98代时符合MDCK细胞的文献记载1c.细胞系特征

–致瘤性–总结

25当前25页，总共40页。在免疫功能正常的动物未观察到有致瘤性107MDCK细胞溶离液无致瘤性0.1mgMDCK-DNA不认为是有致癌性;证实试验已经启动进行1c.细胞系特征

–致瘤性–总结26当前26页，总共40页。MDCK细胞安全性评价1. 细胞系特征下游工程(DSP)消除完整细胞消除细胞DNA27当前27页，总共40页。MDCK疫苗生产流程28当前28页，总共40页。2a.DSP–消除完整细胞29当前29页，总共40页。

2a.DSP–消除完整细胞完整细胞10log清除系数中试规模

生产规模均质化-正在确认离心3.6去污剂处理≥3.6超离≥3.60.22μ

过滤x3≥3.6总计≥21.430当前30页，总共40页。

2b.DSP–消除DNABenzonaseBenzonase31当前31页，总共40页。

2b.DSP–消除DNA

规格:<10纳克/剂量DNA含量content清除系数中试规模生产规模DNA消化151证实试验正在进行(包括含量和大小)DNA消化288去污剂处理/

超离168全部清除760,00032当前32页，总共40页。2.DSP–总结足够的纯化和试验,保证疫苗的安全性根据最近的科学知识和管理手册,Solvay公司正在进行申报33当前33页，总共40页。MDCK细胞安全性评价细胞系特征生产下游过程终产品的安全性临床前经验临床经验34当前34页，总共40页。MDCK细胞疫苗–临床前研究

动物途径剂量(gHA)局部耐受性大白鼠,家兔s.c./i.m./i.v.45系统毒性大白鼠,家兔s.c.45,75,450热原家兔i.v.45潜在的致突变小鼠s.c.45主动和被动休克豚鼠s.c.诱导i.v.攻击4535当前35页，总共40页。MDCK细胞疫苗–临床前研究局部耐受无局部刺激

系统毒性无副反应热原体温无明显增加致突变小核数量不增加过敏无活性过敏被动过敏优于鸡胚疫苗36当前36页，总共40页。MDCK细胞疫苗–临床研究14随机双盲研究

1,023例接种MDCK亚单位疫苗人群:18-60,>60,对流感合并症的高危人群,遗传过敏者和对鸡胚过敏者主要目标:比现有的鸡胚同类疫苗的免疫原性和安全性相当.37当前37页，总共40页。MDCK细胞疫苗–临床研究局部和系统的抗原反应性与鸡胚疫苗相当副反应较小和小于注射的活疫苗未发现意外的安全性问题免疫原性不降低

MDCK细胞疫苗的免疫原性和安全性与鸡胚疫苗相当38当前38页，总共40页。结论Solvay公司的MDCK细胞是生产流感灭活疫苗的安全细胞采用MDCK细胞疫苗可以改进流感疫苗的供应,增加流感大流行的储备

Solvay公司将获得全球专利,包括美国39当前39页，总共40页。参加者IrisdeBruijn,Ph.D.GlobalClinicalDirector,InfluenzaVaccinesEdGeuns,Pharm.D.Director,RegulatoryAffairsMichaelHare,B.S.Manager,RegulatoryAffairsAlexKersten,D.V.M.SeniorScientist,

Pre-ClinicalD