HIV筛查实验室质量管理与控制

质量保证第一页，共35页。一、人员培训人员要求3名以上技术人员至少1人具有中级职称、2年以上血清学检验工作经验上岗要求上岗前必须接受技术培训并获得合格证书每年接受复训一次培训内容HIV检测相关基础知识、检测技术及管理要求、实验操作、质量管理与控制、生物安全。第二页，共35页。使用新方法前对人员进行培训获得资格开展相应工作检验人员检测人复核人签发人不能一人同时承担多个角色！第三页，共35页。二、环境条件HIV筛查实验室实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。配备开展HIV抗体检测所需的设备：生物安全柜、酶标仪、洗板机、恒温孵育箱、离心机、加样器、冰箱等。第四页，共35页。HIV检测点须有HIV抗体检测区域或专用实验台，能开展简便、快速的检测。须配备快速试验所必须的物品，包括冰箱、消毒与污染物处理设备、一次性耗材、安全防护用品等。第五页，共35页。三、样品的采集和保存尽量避免溶血细菌污染抗凝不完全假阳性内源性HRP红细胞破裂释放活性物纤维蛋白原干扰注：血清置4℃冰箱5天内完成检测第六页，共35页。四、检测方法和试剂选择试剂国家食品药品监督管理局注册批准、批检合格、在有效期内，经临床质量评估敏感性和特异性高。更换试剂批号时应进行平行实验。检测方法使用可靠的检测方法，常用：ELISA和快速检测。第七页，共35页。五、设备维护与校准酶标仪/洗板机加样器温度计高压锅国家法定部门定期校准（每年至少1次）精密仪器生产厂家校准（每年至少1次）均须做好日常维护及使用记录蛋白印迹仪流式细胞仪病载仪第八页，共35页。六、文件和文件管理1.标准操作程序（SOP）至少建立以下SOP样品的接收、登记、处理和保存检测方法和步骤试剂使用和保存仪器的使用、维护和校准质量控制要求及程序结果解释与报告保密程序实验室数据、相关文件记录与保存不确定样品追踪和处理实验室安全防护、清理及消毒第九页，共35页。SOP应包括的内容标题和编号编写和修订日期编写和修订人员姓名方法、目的和应用范围检测设备试剂及有效期安全防护相关步骤结果的解释和报告附录每年修订一次第十页，共35页。2.实验原始记录原始记录表试剂厂家测定方法试剂批号试剂效期操作人员姓名复核人员姓名检测日期第十一页，共35页。3.结果报告试剂盒质控品外部质控品满足要求不满足要求分析结果重新检测复核人签字签发人签字第十二页，共35页。4.HIV标本的保存记录标本保存记录标本类型贮存量贮存温度贮存起始时间标本保管人标本复核人第十三页，共35页。5.样品登记和保存收样建立唯一编码登记相关信息保存姓名、性别、年龄、检测日期第十四页，共35页。6.文件存档

实验原始记录、打印数据、WB试验的反应条带或照片、样品登记表、样品保存记录表等应妥善存档保存10年以上。第十五页，共35页。质量控制第十六页，共35页。一、实验室质量控制的定义

为达到质量要求所采取的作业技术和活动。定义第十七页，共35页。二、酶免或发光法抗体检测的室内质量控制

1、室内质量控制的质控品试剂盒内部对照判断试验有效性，但不能作为室内质控品。室内质控品监控检测的重复性。可只设弱阳性质控，以试剂盒临界值的2~3倍为宜。第十八页，共35页。3、室内质控血清的制备收集阳性血清（无溶血、黄疸、脂肪）56℃、30min灭活3000r/min离心15min正常人血清或10%小牛血清PBS溶液稀释测量值分装，-20℃冻存第十九页，共35页。4、质量控制方法Levey-Jennings质控图

使用累积和技术或趋势分析技术的图形提供系统偏移和漂移的状况。第二十页，共35页。质控图参数在不同的批次检测取得的至少20个数据至少做5个批次的检测，每个批次中不少于4个质控品检测结果平均值标准差变异系数控制限样本量足够样本量较少第二十一页，共35页。质控的规定和使用

目前很多质控规则已被采用，最常用的是12S和13S规则。第二十二页，共35页。告警（12S）：当外部对照的S/CO值超过±2S范围时，系统处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要进一步观察。若将12S做失控标准，有较高的假失控概率，所以一般不采用。警告:12S规则违背第二十三页，共35页。失控（13S）：当外部对照的S/CO值超过±3S范围时，系统处于失控状态，本次结果不能被接受。失控:13S规则违背第二十四页，共35页。位移：连续几次（3-5次）外部质控都落在均值的一侧。提示试验条件发生了较大改变。发生位移第二十五页，共35页。出现以下情况也应该应该暂停实验，找出原因。连续两次同一方向超出2S第二十六页，共35页。连续四次同一方向超出1S第二十七页，共35页。失控原因的处理和分析处理出现数据违背控制规则填写失控报告单上交实验室主管是否发出检验报告决定第二十八页，共35页。失控原因的分析立即重新测定同一质控品用新的质控品重测失控项目检查仪器状态检查试剂联系仪器厂家排除人为或偶然误差排除质控品变质或污染失控失控失控失控第二十九页，共35页。“即刻法”质控

样本量较少，无法绘制“L-J”质控图时，前20个数据可采用“即刻法”。该方法只需3个测定值即可开始进行质控。第三十页，共35页。先将测定值从小到大排列，X1最小，Xn最大；计算X和S；计算SI上限值和SI下限值。SI上限=（X最大-X）/S，SI下限=（X-X最小）/S；对照SI值表，检查是否失控。———第三十一页，共35页。SI值表nn3sn2snn3sn2s31.161.15122.552.2941.491.46132.612.3351.751.67142.662.3761.941.82152.712.4172.101.94162.752.4482.222.03172.792.4792.322.11182.822.50102.412.18192.852.53112.482.23202.882.56第三十二页，共35页。当SI上限和SI下限<n2s时表示处于控制范围内，可以继续测定。当SI上限和SI下限有一值处于n2s~n3s值之间时说明该值在2s~3s范围，处于“告警”状态。当SI上限和SI下限有一值>n3s时说明该值已在3s范围之外，属“失控”。注：“即刻法”只能在前20次内使用，超出即可采用L-J质控图法。第三十三页，共35页。三、快速法抗体检测质控1、试剂内对照

在质控窗口内出现质控带，该质控带是试剂自带的内部过程质控，说明实验室操作全部完成并且实验所用材料处于工作状态。清洁的检测区背景是内部阴性过程质控。如实验完成后未出现红色质控带，说明试剂盒内质控无效，该试验结果无效，样品须重检。

第三十四页，共35页。2、室内质控