WB01总糖的测定方法精

铁氰化钾滴定法准确称取经105℃烘干并冷却之后的样品500ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。取出此液加盐酸5ml摇匀，置 65口701水浴上加温30%氢氧化钠溶液中和，加水至刻度，摇匀，倒入滴定管中。□□□□□□□□□□□□□ 5ml于

5.000团用少量水溶解］］入50ml于100ml容量瓶中，30min,取出，迅速冷却至室温。用150ml三角瓶中，加入 2.5ml10%氢氧化1min。然后加入次甲基蓝指示剂1min。然后加入次甲基蓝指示剂1滴，立即以样品液滴定至蓝色消失为止，记录用量。钠溶液、12.5ml□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□,□□□□□□□,□□□□□□□□ 0.5ml□□□□,□□ 1min,□□□□□□□示剂1滴，再用样品液滴定至无色。按下述公式计算铁氰化钾的浓度：Iwxv1000X0.95TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"式中C：相当于5ml□□□□□□□□□□□□□ （g）；V：滴定时消耗样品液的体积 （ml）；W：称取的样品重量 （g）；0.95：换算系数11g□□□□□□ 0.95g转化糖）称取样品 5110gU含糖量多少而增减） ，用200ml□□□□□□ 250ml容量瓶内（样品中如含有较多的蛋白质、色素、胶体等可逐渐加入 20%醋酸铅溶液10115ml,至沉淀完全为止。并加入 10115ml10%磷酸二氢钠溶液，至不再产生沉淀为止） 。加水至刻度，摇匀过滤。吸取滤液50ml于100ml□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□和及滴定（以样液代替糖液，其余操作相同）按下述公式计算总糖含量：总糖（以转化糖计，%）=(W/250)X(50/100)XV总糖（以转化糖计，%）=(W/250)X(50/100)XVX100式中A：相当于5ml□□□□□□□□□□□□□式中A：相当于5ml□□□□□□□□□□□□□(g)；V：滴定试样液消耗体积 （ml）。蒽酮比色法测总糖实验五总糖的测定——蒽酮比色法实验五总糖的测定——蒽酮比色法目的：.掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。.学习植物可溶性糖的一种提取方法。原理：糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后， 与蒽酮(C14H10O)□□□□,□□□□□□□□,□□□□□□□□□ 620nm处有最大吸收，在150Rg/ml□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□ 30Rg□□□□□□□□,□□□□□微量测糖之用。一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。仪器、试剂和材料.仪器：电热恒温水浴锅，分光光度计，电子天平，容量瓶，刻度吸管等.试剂：(1)葡萄糖标准液： l00Rg/ml(2)浓硫酸(3)蒽酮试剂：0.2g蒽酮溶于100ml浓H2sO4中□□□□□□□□.材料：甜糜秸秆操作步骤.葡萄糖标准曲线的制作取7支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：口号1234567□□□□□□□ ml)00.10.20.30.40.60.8蒸馏水( ml)10.90.80.70.60.40.2□□□□□□ Rg)0102030406080在每支试管中立即加入蒽酮试剂 4.0m1,迅速浸于冰水浴中冷却，口管加完后一起浸于沸水浴中， 管口加盖， 以防蒸发。 自水浴重新煮沸起， 准确煮沸 l0min取出，用冰浴冷却至室温，在 620nm波长下以第一管为空白，迅速测其余各管(Rg)为横坐标， 以吸光值为纵坐标，吸光值。以标准葡萄糖含量作出标准曲线。2.植物样品中可溶性糖的提取：将样品剪碎至2mm以下，1~5g,置于50ml三角瓶中,加沸水25ml,加盖，超声提取10min,冷却后过滤（抽滤），残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤（抽滤）滤液收集在50ml容量瓶中，定容至刻度,得提取液。3.稀释：吸取提取液23.稀释：吸取提取液2ml,置于另一50准曲线上查出葡萄糖的含量（Ng)。准曲线上查出葡萄糖的含量（Ng)。A620平均值在标摇匀。4.测定吸取1ml□□□□□□□□□□□,□□白管以等量蒸馏水取代提取液。以下操作同标准曲线制作。根据五、结果处理样品含糖量（其中：C——在标准曲线上查出的糖含量（□100106Ng),ml),V总——提取液总体积（ml),ml),V测——测定时取用体积（ml),D——稀释倍数，W——样品重量（g),106——样品重量单位由g换算成Ng的倍数六、注意事项该法的特点是几乎可测定所有的碳水化合物,不但可测定戊糖与已糖,且可测所有寡糖类和多糖类,包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可把多糖水解成单糖而发生反应）所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量,实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下,用蒽酮法可以一次测出总量,省去许多麻烦,因此,有特殊的应用价值,但在测定水溶性碳水化合物时,则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中,否则会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等