流式细胞术的设门方法_第1页
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文档简介

unljv让宁擁II流式细胞术数据分析目的就是需要确定所要研究的目的细胞器,这就涉及到 设门。 设门就是划定某一区域的细胞群体,对其单独加以分析或分选。门的形状 可任意,方法 有几种:(1)阈值设门。FSC(前向散射光)是最常用的阈值参数。 FSC和细胞的 大小正相关。用 FSC设阈值,可以使低于该阈值的细胞碎片等 其他杂质的信号不被处 理。(2)散射光设门。以FSC和 SSC(侧向散射光) 联合设门较常用。其最大优点 是可以排除碎片或噪声的干扰。可以根据 FSCvsSSC散点图上不同细胞分布不同来设门目的细胞群。 另外还有荧光设门、反向设门和组合设门。流式细胞术的数据分析过程实际 上就是 选门和设门的过程。应该注意到设门是一个主,是的定, 不同的设门大,是流式细胞术最的术。 ,对设 门有 2点需要把:,设门可其,应该到设门需要主。主观来的, 最分选一细胞用来一确门的和确。流式细胞术的设门的注意:过流式细胞术分析细胞,加确的分析,应用最优的设 门常要。要的:排除细胞碎片 应用合的荧光对照排除细胞.合,使用一种物(CD45细胞或等的-细胞群 )设需的荧光分析点图 除细胞碎片:流式细胞上数据,一个前向散射(FSC)VS.侧 向散射(SSC)点图,过个光以确定所有要分析的细胞 群点图的可。要,需要过设和节 FSC阈值,大部分的细胞碎片、和光噪的干扰排除分析区域外(应该设FSC-low的区域)。来,CsC点图的细胞群的区域(), 这个区域可以被“R-FSCvsSSC'。(裂解后的FSCvsSSC的典型设)应用合的荧光对:细胞,议您细胞分两个试,其 一个 一个应同型unvIIme(ID细FSC1CsCn2Viable”i03nEn.sdcud

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