第七章杂环类药物的分析

第一节吡啶类药物的分析异烟肼（isoniazid）吡啶（pyridine）当前1页，总共141页。尼可刹米（nikethamide）当前2页，总共141页。异烟腙（ftivazide）当前3页，总共141页。丙硫异烟胺（protionamide）当前4页，总共141页。一、结构与性质

1.吡啶环

弱碱性pKb～8.8，非水碱量法含量测定或沉淀反应鉴别

吡啶环可发生开环反应，可用于吡啶类药物的鉴别

当前5页，总共141页。2.取代基：（1）异烟肼

位上酰肼基

弱酸性非水酸量法

还原性鉴别或氧化还原滴定法含量测定可与某些羰基试剂发生缩合反应鉴别或比色法含量测定

酰胺键易水解引入特殊杂质游离肼

当前6页，总共141页。（2）尼可刹米

位上酰胺基

易水解，遇碱水解后，释放出具有碱性的二乙胺，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色，故可以此进行鉴别。当前7页，总共141页。（3）丙硫异烟胺

位上硫代甲酰胺基

易水解，加酸水解后，释放出硫化氢，能使湿润的醋酸铅试纸显黑色，故可以此进行鉴别。3.UV和IR

当前8页，总共141页。二、鉴别试验

（一）吡啶环的反应

1.沉淀反应

（1）与氯化汞的反应

当前9页，总共141页。

（2）与铜盐的反应尼可刹米ChP（2005）【鉴别】（3）取本品2滴，加水1ml，摇匀，加硫酸铜试液2滴与硫氰酸胺试液3滴，即生成草绿色沉淀。当前10页，总共141页。2.吡啶环的开环反应

适用于吡啶、′未取代，以及、为烷基或羧基的衍生物（1）戊烯二醛反应（Köning反应）当前11页，总共141页。尼可刹米ChP（2005）

【鉴别】（2）取本品1滴，加水50ml，摇匀，分取2ml，加溴化氰试液2ml与2.5%苯胺溶液3ml，摇匀，溶液渐显黄色。当前12页，总共141页。当前13页，总共141页。当前14页，总共141页。异烟肼：

当前15页，总共141页。（2）二硝基氯苯反应

异烟腙ChP（2005）

【鉴别】取异烟腙约50mg，加2,4－二硝基氯苯50mg与乙醇3m1，置水浴中煮沸2～3min，加10％氢氧化钠溶液2滴，静置后，即显鲜明的红色。当前16页，总共141页。当前17页，总共141页。当前18页，总共141页。异烟肼不经处理的反应：当前19页，总共141页。（二）酰肼基团的反应

1.还原反应当前20页，总共141页。异烟肼ChP（2005）【鉴别】（2）取异烟肼约10mg，置试管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸银试液1m1，即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。当前21页，总共141页。2.缩合反应

当前22页，总共141页。异烟肼ChP（2005）

【鉴别】（1）取本品约0.1g，加水5ml溶解后，加10％香草醛的乙醇溶液1m1，摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，在105℃干燥后，测定熔点，其熔点为228～231℃，熔融时同时分解。当前23页，总共141页。（三）分解产物的反应

1.尼可刹米ChP（2005）

【鉴别】（1）取本品10滴，加氢氧化钠试液3ml，加热，即发生二乙胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色。当前24页，总共141页。2.丙硫异烟胺ChP（2005）

【鉴别】（1）取本品约50mg，加盐酸溶液（9→100）3ml，缓缓加热，发生的气体可使湿润的醋酸铅试纸显黑色。当前25页，总共141页。（四）紫外吸收光谱特征

丙硫异烟胺ChP（2005）

【鉴别】（1）取本品，加乙醇制成每1ml中含20g的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在291nm的波长处有最大吸收，吸收度约为0.78。当前26页，总共141页。（五）IR尼可刹米ChP（2005）

【鉴别】（4）本品的红外吸收图谱应与对照的图谱（光谱集135图）一致。当前27页，总共141页。三、杂质检查

杂质来源原料引入、降解产生

（一）异烟肼中游离肼的检查

1.薄层色谱法（TLC）（1）ChP（2005）杂质对照品法当前28页，总共141页。取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加水制成每1ml中含0.20mg（相当于游离肼50µg）的溶液，作为对照溶液。吸取供试品溶液10µl与对照溶液2µl分别点于同一硅胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）上，以异丙醇－丙酮（3∶2）为展开剂，展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15min后检视，在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。当前29页，总共141页。（2）BP（1998）游离肼杂质对照品法有关物质高低浓度对比法当前30页，总共141页。2.比浊法JP（13）检查方法灵敏度法

反应原理游离肼+水杨醛→水杨醛腙↓

优点：不用对照品，价廉、简单易行缺点：准确度差当前31页，总共141页。3.差示分光光度法游离肼+对二甲氨基苯甲醛→黄色缩合物于456nm波长处有最大吸收异烟肼+对二甲氨基苯甲醛→缩合物于456nm波长处无吸收游离肼+3%丙酮→无色的二甲基甲酮连氮当前32页，总共141页。参比：异烟肼+游离肼+对二甲氨基苯甲醛+3%丙酮样品：异烟肼+游离肼+对二甲氨基苯甲醛

测定，对照法定量

当前33页，总共141页。（二）尼可刹米中有关物质的检查

ChP（2005）TLC高低浓度对比法配制两种不同浓度的对照溶液当前34页，总共141页。四、含量测定

（一）异烟肼的含量测定

1.氧化还原滴定法（1）溴酸钾法

ChP（2005）原料及制剂当前35页，总共141页。反应摩尔比3∶2

当前36页，总共141页。取本品约0.2g，精密称定，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25m1，加水50m1、盐酸20ml与甲基橙指示剂1滴，用溴酸钾滴定液（0.01667mo1/L）缓缓滴定（温度保持在18～25℃）至粉红色消失。每1ml的溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）相当于3.429mg的C6H7N3O。当前37页，总共141页。（2）溴量法反应摩尔比1∶4当前38页，总共141页。（3）剩余碘量法反应摩尔比1∶4当前39页，总共141页。2.非水溶液滴定法（1）非水酸量法（2）非水碱量法当前40页，总共141页。（二）尼可刹米的含量测定

1.非水溶液滴定法ChP（2005）原料2.紫外分光光度法ChP（2005）注射液内容量移液管当前41页，总共141页。用内容量移液管精密量取本品1m1，置100ml量瓶中，用0.5％硫酸溶液分次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加0.5％硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取适量，加0.5％硫酸溶液稀释成每1ml中约含尼可刹米20µg的溶液，在263nm的波长处测定吸收度，按C10H14N2O的吸收系数（）为292计算，即得。当前42页，总共141页。（三）异烟腙的含量测定

非水溶液滴定法电位法指示终点ChP（2005）原料及片剂当前43页，总共141页。（四）丙硫异烟胺的含量测定

1.非水溶液滴定法ChP（2005）原料2.银量法ChP（2005）片剂当前44页，总共141页。取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙硫异烟胺0.3g）置具塞锥形瓶中，加丙酮20ml使丙硫异烟胺溶解，精密加入硝酸银滴定液（0.1mo1/L）50m1，摇匀，放置15min，加水50m1、硝酸3m1、硝基苯5ml与硫酸铁铵指示液2m1，用硫氰酸铵滴定液（0.1mo1/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的硝酸银滴定液（0.1mo1/L）相当于9.014mg的C9H12N2S。当前45页，总共141页。例题.下列药物中，哪一个药物加氨制硝酸银能产生银镜反应A.地西泮B.阿司匹林C.异烟肼D.苯佐卡因E.苯巴比妥

当前46页，总共141页。例题．用于吡啶类药物鉴别的开环反应有A.茚三酮反应B．戊烯二醛反应C．坂口反应D.硫色素反应E．二硝基氯苯反应

当前47页，总共141页。例题.ChP（2005）异烟肼的测定方法为A.溴酸钾滴定法B.溴量法C.TCLD.NaNO2E.比色法

当前48页，总共141页。例题.能和2,4一二硝基氯苯发生呈色反应的药物是A.异烟腙B.硫酸奎宁C.阿莫西林D.四环素E.炔孕酮

当前49页，总共141页。例题.能和硫酸铜及硫氰酸铵反应，生成草绿色沉淀的药物为A.对乙酰氨基酚B.异烟肼C.尼可刹米D.地西泮E.维生素E

当前50页，总共141页。例题.经高锰酸钾或溴水氧化后，可发生开环形成戊烯二醛反应的药物为A.葡萄糖B.皮质酮C.维生素CD.土酶素E.异烟肼

当前51页，总共141页。例题.溴酸钾法测定异烟肼含量的方法是A.属于氧化还原滴定法B.lmol溴酸钾相当于3/2mol的异烟肼C.采用永停滴定法指示终点D.在HCl酸性条件下进行滴定E.还可以用于异烟肼制剂的含量测定

当前52页，总共141页。例题.异烟肼可由原料反应不完全或贮藏中的降解反应而引入哪种杂质A.间氨基酚B.水杨酸C.对氨基苯甲酸D.游离肼E.其他甾体

当前53页，总共141页。例题.可用于异烟肼鉴别的反应有A.与氨制硝酸银的反应B.戊烯二醛反应C.坂口反应D.硫色素反应E.二硝基氯苯反应

当前54页，总共141页。第二节吩噻嗪类药物的分析

吩噻嗪类药物的基本结构

当前55页，总共141页。当前56页，总共141页。当前57页，总共141页。奋乃静当前58页，总共141页。癸氟奋乃静当前59页，总共141页。盐酸氟奋乃静当前60页，总共141页。盐酸三氟拉嗪当前61页，总共141页。盐酸二氧丙嗪当前62页，总共141页。一、结构与性质（一）结构分析

1.硫氮杂蒽母核（1）含S、N的三环共轭的大体系，S、N与苯环形成p-共轭——具有紫外吸收光谱特征

当前63页，总共141页。（2）硫氮杂蒽环上硫原子为-2价，具有还原性，易氧化呈色（3）硫氮杂蒽环上硫原子有两对孤对电子，易与金属离子络合呈色

当前64页，总共141页。2.取代基R：脂烃胺基、哌嗪基，具碱性R：卤素

当前65页，总共141页。（二）性质

1.紫外与红外吸收光谱本类药物的紫外特征吸收，主要由母核三环的π系统所产生，一般具有三个峰值。即在204～209nm（205nm附近）、250～265nm（254nm附近）和300～325nm（300nm附近）。最强峰多在250～265nm。当前66页，总共141页。

2位上的取代基（R′）不同，会引起吸收峰发生位移。其结构中-2价的硫，易氧化，氧化产物砜及亚砜有四个吸收峰。吩噻嗪类药物随取代基R和R′的不同，产生不同的红外吸收光谱。当前67页，总共141页。

2.易被氧化呈色3.易与金属离子络合呈色4.碱性当前68页，总共141页。二、鉴别试验

（一）UV和IR奋乃静ChP（2005）[鉴别]（2）取本品，加无水乙醇制成每1ml中含7g的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在258nm的波长处有最大吸收，吸收度约为0.65。

当前69页，总共141页。（3）本品的红外吸收图谱应与对照的图谱（光谱集243图）一致当前70页，总共141页。（二）显色反应1.氧化剂氧化显色氧化剂硫酸、硝酸、过氧化氢奋乃静ChP（2005）[鉴别]（1）取本品5mg，加盐酸与水各1ml，加热至80℃，加入过氧化氢溶液数滴，即显深红色；放置后，红色渐褪去。

当前71页，总共141页。盐酸异丙嗪ChP（2005）[鉴别]（1）取本品约5mg，加硫酸5ml溶解后，溶液显樱桃红色；放置后，色渐变深。（2）取本品约0.1g，加水3ml溶解后，加硝酸1ml，即生成红色沉淀；加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变为橙黄色。当前72页，总共141页。癸氟奋乃静ChP（2005）[鉴别]（2）取本品约5mg，加甲醇2ml溶解后，加0.1%氯化钯溶液3ml，即有沉淀生成，并显红色，再加过量的氯化钯溶液，颜色变深。2.与钯离子络合显色当前73页，总共141页。（三）分解产物的反应癸氟奋乃静ChP（2005）[鉴别]（1）取本品15～20mg，加碳酸钠与碳酸钾各约0.1g，混匀，在600℃炽灼15～20分钟，放冷，加水2ml使溶解，加盐酸溶液（1→2）酸化，滤过，滤液加茜素锆试液0.5ml，应显黄色。当前74页，总共141页。当前75页，总共141页。（四）氯化物的反应盐酸氯丙嗪ChP（2005）[鉴别]（3）本品的水溶液显氯化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。当前76页，总共141页。三、有关物质检查1.癸氟奋乃静及其注射液TLC参比杂质对照品法以盐酸氟奋乃静为对照品2.其他药物TLC高低浓度对比法当前77页，总共141页。四、含量测定

（一）非水溶液滴定法原料药HClO4在冰醋酸溶液中，具强氧化性，可氧化吩噻嗪类药物产生红色的氧化物，干扰指示剂终点的观察。排除方法：（1）改用中性溶剂（2）加抗坏血酸（3）电位法指示终点

当前78页，总共141页。（二）紫外分光光度法1.直接分光光度法盐酸异丙嗪：片剂测定波长为249nm（为910）；注射液为了消除抗氧剂维生素C（max243nm）对测定的干扰，测定波长改为299nm（为108）。当前79页，总共141页。

同理，盐酸氯丙嗪片剂测定波长为254nm（为915）；注射液测定波长改为306nm（为115）。

当前80页，总共141页。2.萃取后分光光度法盐酸氯丙嗪注射液当前81页，总共141页。3.二阶导数分光光度法盐酸氯丙嗪注射液

抗氧剂维生素C的二阶导数光谱近似为接近基线的一条直线，不干扰盐酸氯丙嗪的测定当前82页，总共141页。因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数光谱量取峰266nm～谷254nm距离，标准曲线法定量当前83页，总共141页。4.萃取—双波长分光光度法（1）原理在待测组分（a）的最大吸收波长（测定波长，1）处测定待测组分和干扰组分（b）吸收度的总和；另选一适当波长（参比波长，2）测定吸收度，并使干扰组分在测定波长和参比波长处的吸收度相等，即，而待测组分在这两个波长处吸收度的差值足够大。当前84页，总共141页。（2）定量依据样品在二波长下吸收度差值（A）：

当前85页，总共141页。即，吸收度差值（A）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。

当前86页，总共141页。（3）必要条件①干扰组分在两个波长处吸收度相等②待测组分在两个波长处吸收度相差足够大

当前87页，总共141页。（4）应用①萃取除去抗氧剂的干扰当前88页，总共141页。②双波长分光光度法测定

排除氧化产物的干扰

测定波长254nm参比波长277nm对照法定量当前89页，总共141页。（三）铈量法

自身指示终点或电位法、永停法指示终点当前90页，总共141页。优点：硫酸铈作滴定剂具有高的氧化电位，且为一价还原；不存在对环取代基的副反应，专属性高。本法既可用于原料，亦可用于片剂的测定当前91页，总共141页。（四）比色法1.钯离子比色法反应在pH2±0.1的缓冲液中进行当前92页，总共141页。优点：

钯离子比色法可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪类药物的测定2.铁盐比色法当前93页，总共141页。例题．盐酸氯丙嗪的含量测定方法有A.中和法B.非水滴定法C.紫外法D.旋光法E.铈量法

当前94页，总共141页。例题.中国药典（2005年版）对盐酸异丙嗪注射液的含量测定，选用299nm波长处测定，其原因是A.299nm处是它的最大吸收波长B.为了排除其氧化产物的干扰C.为了排除抗氧剂的干扰D．在299nm处，它的吸收系数最大E.在其他波长处，因其无明显吸收

当前95页，总共141页。例题.有氧化产物存在时，吩噻嗪类药物的鉴别或含量测定方法为A.非水溶液滴定法B.紫外分光光度法C.荧光分光光度法D.钯离子比色法E.pH指示剂吸收度比值法

当前96页，总共141页。例题.检查盐酸氯丙嗪中“有关物质”时，采用的对照溶液为A.杂质的标准溶液B.标准“有关物质”溶液C.供试品溶液D.供试液的稀释溶液E.对照溶液

当前97页，总共141页。例题.某药物于酸性溶液中，加硫酸铈试液则产生红色，继续滴加硫酸铈试液，红色由浅变深，继由深又变浅直至红色消失，该药物应为A.雌二醇B.氯丙嗪C.诺氟沙星D.硫酸镁E.苯巴比妥钠

当前98页，总共141页。例题.吩噻嗪类药物与钯离子反应，需在以下哪种酸性条件下进行A.pH4B.pH3～3.5C.pH2±0.1D.pH1E.pH5

当前99页，总共141页。第三节苯并二氮杂卓

类药物的分析

环庚三烯草卓当前100页，总共141页。当前101页，总共141页。当前102页，总共141页。当前103页，总共141页。硝西泮当前104页，总共141页。氯硝西泮当前105页，总共141页。奥沙西泮当前106页，总共141页。盐酸氟西泮当前107页，总共141页。艾司唑仑当前108页，总共141页。阿普唑仑当前109页，总共141页。一、结构与性质

1.苯并二氮杂卓母核弱碱性，UV2.结构中的环一般比较稳定，但在酸性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮衍生物。

当前110页，总共141页。当前111页，总共141页。3.含卤素当前112页，总共141页。二、鉴别试验

（一）化学反应

1.沉淀反应

当前113页，总共141页。氯氮卓ChP（2005）【鉴别】（2）取本品约10mg，加盐酸溶液（9→1000）10ml溶解后，加碘化铋钾试液1滴，即生成橙红色沉淀。当前114页，总共141页。阿普唑仑ChP（2005）[鉴别]（1）取本品约5mg，加盐酸溶液（9→1000）2ml溶解后，分为两份：一份加硅钨酸试液1滴，即生成白色沉淀；另一份加碘化铋钾试液1滴，即生成橙红色沉淀。当前115页，总共141页。2.水解后重氮化—偶合反应氯氮卓、艾司唑仑、奥沙西泮

氯氮卓ChP（2005）[鉴别]（1）取本品约10mg，加盐酸溶液（1→2）15ml，缓缓煮沸15分钟，放冷，溶液显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）。当前116页，总共141页。

3.水解后呈茚三酮反应地西泮4.硫酸—荧光反应地西泮ChP（2005）[鉴别]（1）取本品约10mg，加硫酸3ml，振摇使溶解，在紫外灯（365nm）下检视，显黄绿色荧光。当前117页，总共141页。氯氮卓——黄色艾司唑仑——亮绿色硝西泮——淡蓝色当前118页，总共141页。5.分解产物的反应

地西泮ChP（2005）[鉴别]（2）取本品20mg，用氧瓶燃烧法（附录ⅦC）进行有机破坏，以5%氢氧化钠溶液5ml为吸收液，燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓煮沸2分钟，溶液显氯化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。当前119页，总共141页。（二）UV和IR（三）TLC当前120页，总共141页。三、特殊杂质的检查

（一）有关物质的检查1.地西泮中有关物质的检查地西泮的原料及片剂TLC高低浓度对比法当前121页，总共141页。2.氯氮卓中有关物质的检查USP（24）TLC氧化物、氨基物杂质对照品法有关物质参比杂质对照品法BP（1998）TLC高低浓度对比法3.氯氮卓中有关物质的反相高效液相色谱法当前122页，总共141页。（二）降解产物的检查地西泮注射液分解产生2-甲氨基-5-氯二苯甲酮HPLC主成分自身对照法当前123页，总共141页。1.峰面积归一化法

取一定量供试品溶液进样，测定各杂质及药物的峰面积，计算各杂质峰面积及其总和占总峰面积的百分率，不能超过限量。注意溶剂峰不应计算在总峰面积内。当前124页，总共141页。优点：不需杂质对照品，简便易行。

缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能有差异，控制杂质峰面积百分率不一定就是杂质限量，准确度差。

当前125页，总共141页。2.主成分自身对照法

杂质峰面积与主成分峰面积相差悬殊时应用。

方法当前126页，总共141页。分别进样，测定供试品溶液中各杂质峰面积及其总和，与对照溶液主成分峰面积比较，控制供试品中杂质的量。

当前127页，总共141页。缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能