低温对酶活性影响_第1页
低温对酶活性影响_第2页
低温对酶活性影响_第3页
低温对酶活性影响_第4页
低温对酶活性影响_第5页
已阅读5页，还剩7页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

低温对酶活性影响第1页/共12页四种酶在37'C下培养的大肠杆菌中的8-半乳糖苷酶在70°C下培养的解糖热纤维菌中的8-葡萄糖苷酶37°C下牛肝中的谷氨酸脱氢酶75°C下的嗜热菌的ANI第2页/共11页第2页/共12页实验过程加入溶入了50%（v/v）DMSO的基质，开始反应。在低于-45'C时，用注射器注入基质并用预冷过的玻棒搅拌混匀；在0'C到-45'C用注射器搅拌。根据温度测量时间不相同。高于0'C测定5-60分钟的值，而在-70'C则只是3-40个月。反应在接近适应温度时用乙醇胺/DMSO/水（3:5:2的体积比）停止。葡萄糖苷酶第3页/共11页第3页/共12页实验过程添加酶，开始反应。在0°C时用不连续方法比较有酶和无酶的活力。在15'C时用不连续方法测量Km。温度低于-70°C时观察要多达一个月。反应在接近适应温度时加60%（v/v）三佛乙酸停止。谷氨酸脱氢酶第4页/共11页第4页/共12页实验结果此图表明了温度对两种葡糖苷酶活力的影响。两种嗜热酶的阿累尼乌斯曲线在整个温度范围内基本是线状的，说明其活力是被抑制的。第5页/共11页第5页/共12页实验结果此图表明了温度对两种GDH的影响。两种嗜常温酶的阿累尼乌斯曲线在整个温度范围内基本是线状的，说明其活力是被抑制的。嗜常温酶在40°C时不稳定的，且在其温度下，阿累尼乌斯曲线不再是线形。第6页/共11页第6页/共12页实验结果斜坡的变化可能是速率从K2到K3变化的结果。在阿累尼乌斯曲线中酶活性于催化常数成正比第7页/共11页第7页/共12页实验结果介电常数、离子强度、酸碱度等均可能受酶系统和温度的影响。Km值同样也受酶系统于温度的影响在低温下基质不是限制因素。第8页/共11页第8页/共12页实验猜想猜想一：RNA核酸酶A在低于反应温度下失活。包围抑制剂与催化转化包含了可能受温度不同影响的不同过程。然而，即使是这样情况，催化所需的灵活性远比抑制剂或基质的包围复杂的多，因此当抑制剂不可能被包围时催化作用不可能发生。猜想二：可能不一定需要改变构型来变得轻微有活力。一个亚基态或者是构象可能会在低温下导致低活力。活力的存在或缺失依赖于酶。但是这个假说意味着一个亚基态会导致基质的包围与催化转化。抑制剂的转变研究结果并不支持这个假说。第9页/共11页第9页/共12页分析讨论这次实验利用极端嗜热菌的酶的稳定性使在比以往尝试的更大的温度范围内测量酶活力成为可能。在整个温度范围内嗜热酶的活化能是恒定的，意味着来自嗜热菌的酶并非特别适应在高温下活动，而不是在这个范围内被认为的更高的耐热性。这与当前的关于酶的稳定性、活性与动力学间互动关系的的一些看法相一致。第10页/共11页第10页/

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论