YY/T 1876-2023组织工程医疗产品动物源性生物材料DNA残留量测定法：荧光染色法

ICS1104030

CCSC.40.

中华人民共和国医药行业标准

YY/T1876—2023

代替YY/T060625—2014

.

组织工程医疗产品动物源性生物材料

DNA残留量测定法荧光染色法

:

Tissueengineeredmedicalproducts—QuantificationofremnantDNAinbiological

materialsutilizinanimaltissuesandtheirderivativesFluorescencemethod

g:

2023-01-13发布2024-01-15实施

国家药品监督管理局发布

YY/T1876—2023

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

试验原理

4…………………2

样品试剂和仪器

5、…………………………2

试验过程

6…………………3

结果计算

7…………………6

结果判定

8…………………7

试验报告

9…………………7

参考文献

………………………8

Ⅰ

YY/T1876—2023

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替组织工程医疗产品第部分动物源性生物材料残留

YY/T0606.25—2014《25:DNA

量测定法荧光染色法与相比除结构调整和编辑性改动外主要技术变化

:》,YY/T0606.25—2014,,

如下

:

更改了范围见第章年版的第章

———(1,20141);

更改了规范性引用文件见第章年版的第章

———(2,20142);

删除了术语基质见版年的增加了术语细胞外基质脱细胞见和

———“”(20143.1),“”“”(3.13.6);

增加了试验原理见第章将年版的有关内容更改后纳入见第章年版的

———“”(4),2014(4,2014

5.1);

增加了对供试品灭菌和病毒灭活的要求增加了其他样品的说明见的列项和

———、[5.1a)、b)、c)

将年版的有关内容更改为注见的注年版的

d)],2014(5.11,20144.1);

更改了蛋白酶消化用试剂的说明见年版的

———K(5.2.1,20144.2.1);

更改了其他试剂见年版的

———(5.2.4,20144.2.4);

更改了条款名称将二级条款编号更改为列项见年版的

———,(5.3,20144.3);

更改了供试品及反应液的准备见年版的

———“”(6.1.1,20145.2.1.1);

删除了回收率样品及反应液的制备见年版的增加了加标回收样品及反应

———“”(20145.2.1.2),“

液的准备见

”(6.1.2);

增加了阴性对照样品及反应液的准备见

———“”(6.1.3);

更改了纯化的操作步骤见年版的

———DNA(6.2,20145.2.2);

增加了纯化的片段分析见将年版的有关内容更改后纳入见年

———“DNA”(6.3),2014(6.3,2014

版的的注

5.2.2.122);

更改了含量测定荧光染色法见年版的

———“DNA()”(6.4,20145.2.3);

更改了结果计算见第章年版的第章

———(7,20146);

更改了结果判定见第章年版的第章

———(8,20147);

增加了试验报告见第章

———“”(9)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由国家药品监督管理局提出

。

本文件由全国外科植入物和矫形器械标准化技术委员会组织工程医疗器械产品分技术委员会

归口

(SAC/TC110/SC3)。

本文件起草单位中国食品药品检定研究院四川大学四川医疗器械生物材料和制品检验中心

:、()、

冠昊生物科技股份有限公司

。

本文件主要起草人邵安良徐丽明李秋梁洁许建霞凌友黄斯坦范行良袁暾

:、、、、、、、、。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为

:

年首次发布为

———2014YY/T0606.25—2014;

本次为第一次修订

———。

Ⅲ

YY/T1876—2023

引言

由哺乳动物细胞外基质构成的生物源性支架材料被用于外科的创伤修复肌腱皮肤心血管胃肠

,、、、

及下尿道组织的重建这些细胞外基质支架材料取材于人和动物的各种组织如猪的皮肤角膜小肠

。,、、、

尿道及膀胱牛的皮肤等由于细胞膜的表位抗原细胞核酸以及由损伤而来的小分子物质可

、。、(DNA)

能会引起人体广泛的免疫反应因此动物源性基质材料的脱细胞过程被认为是非常重要的去除免疫原

,

性工艺尽管细胞外基质材料已经被广泛用于临床但仍然存在由于残留及残留蛋白质等所引

。,DNA

起的炎症和免疫反应隐患因此动物源性生物材料中残留定量检测是控制产品质量的重要措

。,,DNA

施之一

。

目前国际上还没有对该类产品残留的检测方法标准国际标准化组织发布了动物源医疗

,DNA。

器械系列标准我国已转化为动物源医疗器械系列行业标准此系列标准

(ISO22442),“”(YY/T0771)。

包括第部分风险管理应用第部分来源收集与处置的控制第部分病毒和传播性海绵状脑

1“”;2“、”;3“

病因子去除与灭活的确认和第部分传播性海绵状脑病因子的去除和或灭活及其过

(TSE)”4“(TSE)/

程确认分析的原则我国于年出台了动物源性医疗器械产品注册技术审查指导原则年

”。2009“”,2017

发布了修订版该指导原则在对动物源性医疗器械产品注册申报资料的要求中提到注册申报资料在

。,

满足一般性要求的基础上需要增加涉及控制病毒和或传染性病原感染以及免疫原性风险方面有关的

,/

技术内容其中要求提供对清除或降低动物源性材料免疫原性工艺过程的描述质量控制指标与验

。()、

证性实验数据或相关资料对于动物源性材料带来的免疫原性风险的降低一般采用在生产工艺中降

。,

低其免疫原性的方法包括脱细胞去除杂蛋白以及使蛋白质变性等物理的和或化学的处理步骤移

,、,/,

走或覆盖抗原决定簇生产企业需对其降低材料免疫原性的有效性进行验证其中验证手段之一就是

。。

检测残留含量基于生物制剂残留检测方法主要包括探针杂交法荧光染色法及定

DNA。DNADNA、

量方法见中华人民共和国药典年版三部通则外源性残留量测定法其中荧

PCR(《》2020,3407DNA),

光染色法操作简便灵敏度高再现性好得到广泛使用然而动物源性生物材料来源于动物组织

、、,。:a)

主要是基质组织经脱细胞等工艺制备而成大多为固体状态有的为胶体或液体状态不能直接采

(),,(),

用上述方法检测基质组织中含有大量的结构蛋白质影响荧光测定的结果因此生物制剂残留

;b),。,

检测方法不能直接用于动物源性生物材料残留的定量检测

DNADNA。

本文件给出了适用于动物源性生物材料残留的定量检测方法

DNA。

Ⅳ

YY/T1876—2023

组织工程医疗产品动物源性生物材料

DNA残留量测定法荧光染色法

:

1范围

本文件规定了动物源性生物材料中残留量的测定方法

DNA。

本文件适用于动物源性生物材料及其衍生物的终产品或中间产品用于组织工程医疗产品基质或

、

支架的动物源性支架材料也可用于人源脱细胞基质材料

,。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

动物源医疗器械第部分风险管理应用

YY/T0771.11:

动物源医疗器械第部分病毒和传播性海绵状脑病因子去除与灭活的

YY/T0771.33:(TSE)

确认

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

细胞外基质extracellularmatrixECM

;

由细胞产生并分泌到组织内细胞外空间包括均质状