组织学与胚胎学绪论演示文稿

组织学与胚胎学绪论演示文稿当前1页，总共43页。（优选）组织学与胚胎学绪论当前2页，总共43页。

组织学（histology）研究机体微细结构及其相关功能的科学研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子（例：心脏）研究内容发展简史学习方法技术简介组织学组织意义图1-3当前3页，总共43页。

组织（tissue）构成：细胞群和细胞外基质

细胞：机体结构和功能的基本单位，成人约有1015个、200

余种

细胞外基质：由细胞分泌形成类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官；若干功能相关的器官构成系统研究内容发展简史学习方法技术简介组织学组织意义当前4页，总共43页。促进了生理学的进步是病理学的基础促进人类对自身的深入了解研究内容发展简史学习方法技术简介组织学组织意义当前5页，总共43页。简称光镜（lightmicroscope，LM）

16世纪末荷兰人发明→1665年胡克命名“细胞”→马尔比基观察了脾、肺、肾、表皮；列文虎克发现红细胞、精子、肌纤维；格拉夫发现卵泡→1801年比沙提出“组织”概念光学显微镜细胞学说电子显微镜当代组织学研究内容发展简史学习方法技术简介当前6页，总共43页。提出：施万、施莱登（1838、1839）内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生光学显微镜细胞学说电子显微镜当代组织学研究内容发展简史学习方法技术简介当前7页，总共43页。简称电镜（electronmicroscope,EM）发明：1932年卢斯卡、科诺尔，使分辨率提高到0.2nm超薄切片术（50～80nm）超微结构（ultrastructure）：即细胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构光学显微镜电子显微镜当代组织学研究内容发展简史学习方法技术简介细胞学说当前8页，总共43页。新仪器、新技术的发明和应用免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景光学显微镜电子显微镜当代组织学研究内容发展简史学习方法技术简介细胞学说当前9页，总共43页。审视角度组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞细胞水平：主要细胞的分布、结构特点（含重要细胞的超微结构）及功能形态和结构相统一结构是功能的基础，功能是结构的必然表现培养观察能力：重视实习课和图像观察培养空间思维能力：将二维图形还原为三维构像研究内容发展简史学习方法技术简介当前10页，总共43页。石蜡切片术（paraffinsectioning）：取材、固定、脱水、包埋、切片（5～

10µm

厚）、染色苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosinstaining，

HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色

嗜酸性（acidophilia);嗜碱性(basophilia)特殊染色光镜技术电镜技术组织化学图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介图9、10细胞培养组织工程图4-8当前11页，总共43页。透射电镜术（transmissionelectronmicroscopy,TEM）用于观察组织细胞的超微结构戊二醛、锇酸双重固定→树脂包埋→超薄切片（50－80nm厚）→电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅）根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色）光镜技术电镜技术组织化学图像分析细胞培养组织工程研究内容发展简史学习方法技术简介图11-15当前12页，总共43页。扫描电镜术（scanningelectronmicroscopy,SEM）用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无需制备切片光镜技术电镜技术组织化学图像分析细胞培养组织工程图16研究内容发展简史学习方法技术简介当前13页，总共43页。组织化学术（histochemistry）为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术，与组织学技术结合而产生，在组织切片显示某种物质的存在和分布状态分类：一般组织化学术免疫组织化学术原位杂交术光镜技术电镜技术组织化学图像分析细胞培养组织工程研究内容发展简史学习方法技术简介当前14页，总共43页。

一般组织化学术：组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反应、并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到糖类：PAS（过碘酸希夫）反应，显示多糖和糖蛋白，呈紫红色糖多醛品红硫酸复合物（希夫试剂，无色）光镜技术电镜技术组织化学图像分析图17细胞培养组织工程过碘酸紫红色反应产物研究内容发展简史学习方法技术简介当前15页，总共43页。免疫组织化学（immunohistochemistry）根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的肽和蛋白质用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物可于显微镜下观察。标记物有荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体金（多用于电镜观察）图18-21光镜技术电镜技术组织化学图像分析细胞培养组织工程研究内容发展简史学习方法技术简介当前16页，总共43页。原位杂交术（insituhybridization）即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（mRNA）原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量常用标记物有放射性核素和地高辛图22光镜技术电镜技术组织化学图像分析细胞培养组织工程研究内容发展简史学习方法技术简介当前17页，总共43页。图像分析术（imageanalysis）又称形态计量术（morphometry）：应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体的组织细胞内有形成分的数量、体积、表面积等参数，从量的角度显示结构与功能的关系体视学（stereology）：根据连续的组织切片应用计算机进行三维重建，以获得微细结构的立体模型光镜技术电镜技术组织化学图像分析细胞培养组织工程图23研究内容发展简史学习方法技术简介当前18页，总共43页。细胞培养术（cellculture）把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养；培养组织块或器官则称组织培养术或器官培养术用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、形态和功能变化，各种理化因子对活细胞的影响培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压、O2和CO2浓度、温度，控制污染用相差显微镜观察光镜技术电镜技术组织化学细胞培养组织工程图像分析图24、25研究内容发展简史学习方法技术简介当前19页，总共43页。组织工程（tissueengineering）用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角膜等；其中以组织工程皮肤较为成功，已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病光镜技术电镜技术组织化学细胞培养组织工程图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介当前20页，总共43页。研究包括四个方面：①种子细胞，即增殖旺盛的细胞，多为干细胞②细胞外基质，可用生物材料（如牛胶原）和人工合成高分子材料③构建组织或器官，即把细胞置于细胞外基质中进行三维培养、并形成所需要的形状④将构建物移植机体的方法图26光镜技术电镜技术组织化学细胞培养组织工程图像分析研究内容发展简史学习方法技术简介当前21页，总共43页。组织学、组织、嗜酸性、嗜碱性的概念组织学学习方法要点石蜡切片术和超薄切片术的基本原理HE染色法本章重点当前22页，总共43页。图1心脏（左:器官右:组织光镜图）上皮组织结缔组织肌组织当前23页，总共43页。图2心脏（心肌细胞光镜图）当前24页，总共43页。图3心脏上:肌丝结构电镜图下:肌丝蛋白质构成模式图当前25页，总共43页。图4石蜡切片机1含标本的石蜡块2钢刀←1↓2当前26页，总共43页。

图5切片当前27页，总共43页。图6（左）在水浴槽的温水展开切片，捞于载玻片上；（下）在干燥器上烘干切片当前28页，总共43页。图7HE染色（左上）苏木精（左下）伊红（下）染好的切片脱水后加盖玻片

当前29页，总共43页。图8HE染色，垂体远侧部当前30页，总共43页。图9镀银染色，小脑皮质神经元当前31页，总共43页。图10醛复红与偶氮焰红染色，肥大细胞和弹性纤维当前32页，总共43页。图11含标本的树脂块（1）和玻璃刀（2）12↓↓当前33页，总共43页。

图12超薄切片机1树脂块2切片刀←1↑2当前34页，总共43页。图13超薄切片捞在铜网上，电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅）后固定于电镜的标本支持架内↑↓当前35页，总共43页。图14电子显微镜1标本支持架插入部位2观察窗

↓1↑2当前36页，总共43页。图15透射电镜图，浆细胞当前37页，总共43页。图16扫描电镜图，血细胞当前38页，总共43页。图17PAS反应，小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒