专题41 细胞工程(克隆技术)

专题41细胞工程（克隆技术）（2017年江苏卷，11）牛雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是（ ）H-Y单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌应选用原肠胚做雌雄鉴别鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植D•用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体【答案】D【解析】单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌，典错误,做雌雄性别鉴别应选择囊胚期的涕养层细胞，E错误,由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药，则鉴别后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎没有意义，C错误；H-YJA原免疫母牛，使其体内产生1■本酒免疫，产生相应的浆细胞，获得相应抗体，D正确。（2016年江苏卷，9）下列有关细胞工程的叙述，正确的是（ ）PEG是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合用原生质体制备人工种子，要防止细胞破裂骨髓瘤细胞经免疫处理，可直接获得单克隆抗体D•核移植克隆的动物，其线粒体DNA来自供卵母体【答案】D【解析】PEG是促细胞融合剂，但植物细胞不能直接融合，需先去壁形成原生质体才能融合，A错误；制备人工种子应用完整的植物细胞，不需用原生质体，B错误；骨髓瘤细胞不能产生抗体，C错误；核移植克隆的动物，线粒体DNA来自供卵母体，D正确。（2015年江苏卷，3）下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是（）乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行采用胚胎分割技术产生同卵多胚的数量是有限的培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种能源物质【答案】C【解析】乳腺癌细胞的分裂能力比乳腺细胞强，所以乳腺癌细胞比乳腺细胞更容易进行离体培养，A错误；细胞核移植发生在同种或异种生物的细胞之间，B错误；由于胚胎分割形成的多胚中遗传物质少，营养物质少，成功的可能性低，所以胚胎分割技术产生同卵多胚的数量有限，C正确；培养早期胚胎的培养液中的维生素、激素起调节作用，不是能源物质，D错误。学&科（2015年北京卷，5）在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中，不需要的是（ ）用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞用选择培养基筛法导入目的基因的细胞用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生物质融合用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽【答案】C【解析】农杆菌侵染细菌是基因工程中常常用到的把目的基因导入植物细胞的方法，A正确；目的基因是否导入了细胞，需要在选择培养基上进行筛选，E正确，在植物细胞组织培养的过程中，需要调整培养基中生长素和细胞分裂素的比例，来达到是对其脱分化和再分化的控制，D也正确；在农杆菌侵染植物细胞的过程中并没有涉及到原生质体的融合，所以.C错误。(2017年海南卷，31)甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是 。甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到 。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是 (填“具有完整的细胞核“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”)。图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是 。A中的愈伤组织是叶肉细胞经 形成的。(4)若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时， (填“能”或“不能”)采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是 。【答案】(1)绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性，在一定条件下能发育成完整的植株。葡萄糖、果糖具有完整的细胞核细胞分裂素、生长素脱分化不能对杂合体的植株来说，其体细胞的基因型相同，而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同。用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株【解析】（1）植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。（2） 莊糖水解后可得到葡萄糖、果糖。用细胞作为材料进行培养茯得幼苗，细胞必须具有完整细胞核，才具有发肓为个体的一整套完整遗传信息o（3） 戢响植物组织培养的两种主要激素是细胞分裂素和生长素。鉅伤组织是叶肉细胞经脱分化形成的。（4） 由于花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同，组织培养得到花卉基因型不同于原植株，导致不能保留亲本性状。（2016年新课标II卷，40）下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。回答下列问题：（1）图中A表示正常细胞核，染色体数为2n,则其性染色体的组成可为 。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采 的方法。②代表的过程是（2）经过多次传代后，供体细胞中 的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因 。（4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了 。【答案】（1）XX或XY显微操作（去核法） 胚胎移植（2） 遗传物质（3） 卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的形状产生影响（4） 已经分化的动物体细胞核具有全能性。【解析】（1）提供体细胞的供体可能为雌性，也可能为雄性，因此图中A（正常细胞核）的性染色体组成为XX或XY。常采用显微操作去核法来去除卵母细胞的细胞核。②过程表示将早期胚胎移入受体，其过程为胚胎移植。（2） 取供体动物的体细胞培养，一般选用传代10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。超过10代继续培养，则其遗传物质（或核型）的稳定性会降低。学*科（3） 克隆动物的细胞核基因来自供体，因此大部分性状与供体相同，但细胞质基因来源于受体（或提供卵母细胞的个体人即卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的形状产生影响，这就决定了克隆动物的性状与供体不完全相同。（4）克隆动物的培育采用的是核移植技术，核移植技术的原理是：已经分化的动物体细胞核具有全能性。（2015年安徽卷，31）科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。

人凝血因子［X推因胚胎移植R—TOC\o"1-5"\h\z由过程①获得的A为 。胚胎移植R—在核移植前，必须先去掉卵母细胞的核。目的是 ，受体应选用 期卵母细胞。进行胚胎移植时，代孕母羊对置入子宫的重组胚胎基本上不发生 ，这是为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为 。【答案】(1)含目的基因的表达载体保证核遗传物质来自目的基因的成纤维细胞 MII中免疫排斥反应整合含有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养【解析】(1)分析图示可知，过程①表示构建基因表达载体。对卵母细胞去核的目的是保证后代的核遗传物质全部来自目的基因的成纤维细胞。受体应选用减数第二次分裂中期。胚胎移植能成功，原因是代孕母羊对置入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应。转基因体细胞克隆属于无性繁殖，细胞能经过传代培养不断增殖，且遗传物质一般不会发生改变。(2015年重庆卷，7)2014年埃博拉病在非洲蔓延，我国派出医疗队首次在境外组建医院，帮助治疗埃博拉疫情。研究表明，埃博拉病毒侵入机体后，通过靶向感染、破坏吞噬细胞等，使其不能暴露病毒的 ，以致感染信息不能呈递给 ，阻止正常激活细胞免疫和体液免疫应答过程，导致机体对该病毒的 免疫功能下降。因此，病毒在体内快速增殖、致病。对志愿者接种埃博拉试验疫苗后，机体免疫系统能产生相应抗体，还能产生的免疫细胞有 用埃博拉病毒的某种蛋白免疫小鼠，通过 技术获得杂交瘤细胞，用于生产单克隆抗体治疗该病。【答案】(1)特有抗原或抗原肽一MHC T细胞特异性(2)记忆细胞、效应T细胞(3)细胞融合或细胞杂交【解析】〔1)正常情况下，抗恵侵入机体后被吞噬细胞吞噬处理暴露抗原的抗原肽-MHC复合物，继而完成信号传递。而埃博拉病毒能阻止该过程，阻止吞噬细胞将抗原的信号呈递给T细胞，进而影响机体的特异性免疫。U)注射疫苗后，机体能产生一系列的免疫细胞，如记忆细胞、效应T细胞等。(3)制备单克隆抗体时需利用细胞融合或细胞杂交技术先获得杂交瘤细胞，再生产相关药物。【2018年高考考点定位】考纲内容考纲解读1•植物的组织培养、动物的细胞培养与体细胞克隆、细胞融合与单克隆技术(II)。1.理解植物的组织培养的原理及过程，了解动物的细胞培养与体细胞克隆，理解细胞融合技术在细胞方面的应用。【命题预测】纵观近三年高考题，本专题主要考查植物的组织培养、动物的细胞培养与体细胞克隆、细胞融合与单克隆技术等，预测2018年高考仍将主要以非选择题形式考查以上知识点。【要点讲解】一、植物细胞工程植物细胞的全能性概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。植物组织培养技术原理：植物细胞具有全能性。过程植物体细胞杂交技术概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。过程植物细胞A、厂|纤维素酶和果胶酶处理去掉细胞壁原生质体A、B|聚乙二醇处理(或离心、振动、电激等)融合的原生质体再生出细胞壁(融合完成的标志)杂种脱分化愈伤再分化-胚状体发育，杂种细胞组织或丛芽植株植物细胞工程的应用微型繁殖：优点是能够保持亲本的优良性状。作物脱毒：利用茎尖、根尖等无毒组织进行微型繁殖。培育人工种子：可以解决某些植物结实率低、繁殖困难的问题。作物新品种的培育：单倍体育种和突变体的利用。细胞产物的工厂化生产：即利用植物组织培养技术生产蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料和生物碱等。二、动物细胞工程动物细胞培养动物细胞的培养过程取动物组织块剪碎组织

八用胰蛋白酶处理

觀分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养液屮进行原代培养转入培养液屮进行原代培养放入二氧化碳培养箱屮培养贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞.、制成细胞悬液转入培养液中进行传代培养贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞.、制成细胞悬液转入培养液中进行传代培养培养条件无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，添加抗生素，定期更换培养液以清除代谢产物。营养：除正常的有机和无机营养外，需加入血清、血浆等一些天然成分。③适宜的温度和pH：温度为36.5±0.5°C(哺乳动物)，pH为7.2〜7.4。④气体环境：含95%空气加5%CO2的混合气体，其中后者的作用是维持培养液的pH。应用：生物制品的生产、检测有毒物质、医学研究。动物体细胞核移植技术和克隆动物动物体细胞核移植技术的过程豔一细胞培养卵巢卵

母细胞Mil*去核豔一细胞培养卵巢卵

母细胞Mil*去核*供体细胞\注入'誥重组细胞一无核卵/—母细胞輕胚胎代孕母体七盼原理：动物体细胞核具有全能性。结果：产生新个体。应用：①加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；②保护濒危物种；③生产医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植。动物细胞融合原理：细胞膜的流动性。融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，也为制造单克隆抗体开辟了新途径。单克隆抗体制备过程 注射特定的骨髓虻淋巴细胞免疫小鼠饥好車口细胞©杂交细胞——第1次筛选：I 筛选出杂交瘤细胞甲杂交瘤细胞…*…筛选——第2次筛选：(—b 筛选出能产生所需抗体体外培形/弋本内培养的杂交瘤细胞从培养液筐⑥莎二从小鼠腹水屮提取中提取阳单克隆抗体优点：特异性强、灵敏度高，可大量制备。用途：作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。【考点透析】考点1植物细胞工程【典型例题】下图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，下列叙述不正确的是()紫杉1①愈伤②rwi③「高产、「细胞、外植体组织< J细胞细胞群 分泌物该途径依据的原理是植物细胞具有全能性过程①需控制好培养基中植物激素的比例经过程①后细胞的形态和结构发生了变化过程③需使用液体培养基，有利于细胞增殖【答案】A【解析】该过程是为了得到细胞群及细胞产物，依据的原理是植物组织培养，没有体现细胞的全能性，A错误：过程①为脱分化，在培养基中应加入适量的生长素和细胞井裂素，E正确：鉅伤组织是无定形的薄壁细胞，所以■经过程①细胞的形态和结构发生了明显变化，©正确：过程③是细胞犬量増殖的过程，需要酒体培养基，D正确。【名师点睛】植物组织培养中生长素和细胞分裂素的比值与效果生长素/细胞分裂素的比值作用效果比值咼时促进根分化、抑制芽形成比值低时促进芽分化、抑制根形成比值适中促进愈伤组织形成【变式训练】“白菜一甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。如图是“白菜一甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是（白菜细胞乜生质体AG3正在融合的杂种甘蓝细胞原生质体B白菜细胞乜生质体AG3正在融合的杂种甘蓝细胞原生质体B原生质体细胞愈伤“白菜一甘蓝”组织植株除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG和灭活的病毒诱导杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁愈伤组织形成“白菜一甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程【答案】C【解析】除去细胞壁的酶有纤维素酶和果胶酶；诱导植物原生质体融合不能用灭活的病毒；杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁；前伤组织形成“白菜一甘蓝■"植物体属于再分化过程。考点2动物细胞工程【典型例题】某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列叙述正确的是（ ）制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸为了保证细胞培养所需的无毒环境，需大量添加各种抗生素本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙细胞的毒性大小【答案】D【解析】在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误；细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH,B错误；抗生素是用来杀菌的，不是杀病毒的，C错误；本实验应设置对照实验，用添加药物的培养液分别培养甲、乙细胞，根据变异细胞占培养细胞的比例，以检测药物对甲、乙的毒性大小，D正确。学#科【名师点睛】关于动物细胞培养的两组概念辨析（1） 细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。（2） 原代培养与传代培养原代培养：细胞悬液第一次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的细胞培养。原代培养的细胞核型正常。传代培养：原代培养的细胞由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭，影响细胞的生长，因此需要重新用胰蛋白酶等处理，进行分瓶扩大培养，即传代培养。一般情况下，细胞传至10〜50代后，出现核型异常，细胞增殖会明显减缓，甚至完全死亡。【变式训练】下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述，不正确的是（）A•制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养需要用选择培养基筛选杂交瘤细胞需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞利用生物导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞【答案】D【解析】制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养，A正确；在单克隆抗体的制备过程中，需要进行两次筛选，第一次是在选择培养基上筛选杂交瘤细胞，第二次是筛选能产生特异性抗体又能犬量増殖的杂交瘤细胞，B.C正确；利用生物导弾治疗癌症就是利用了单克隆抗体能将药物或放射性物质定向运输到癌细胞，然后杀死癌细胞，清除癌细胞的是吞噬细胞，D错误。【知识络】（2017届江苏省盐城市高三第三次模拟考试生物试题）下列有关动物细胞培养技术的叙述，错误的是（）动物细胞培养是动物细胞工程的技术基础动物细胞培养过程中可能发生癌变而具有无限增殖的特点由多个不同的亲代细胞培养形成的细胞群可称为细胞克隆动物细胞培养需要在无菌条件下进行，必要时可在培养液中添加适量【答案】C【解析】动物细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合、檢移植技术等技术，其中动物细胞培养时动物细胞工程的基础，A正确,动物细胞培养的传代培养，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点,即无限増殖的特点，另正确；一个克隆是指1个细胞经培养形成的细胞群，C错误；动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染，D正确。（江苏省泰安市长城中学2016-2017学年高三上学期月考生物试题）人工种子是人们模仿天然种子结构制造出来的生命有机体，它能像天然种子一样萌发生长。人工种子的核心部分胚状体可以由悬浮培养的芽尖细胞得到，也可以通过试管培养的花粉或胚囊获得，由此人们把胚状体分为“体细胞胚”和“花粉胚”。请据此判断下列说法中不正确的是（ ）人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难、发芽率低等问题培育胚状体利用了植物组织培养技术同一种植物“体细胞胚”和“花粉胚”的染色体的数目比为1：1该项技术的成功应用反映了细胞的全能性【答案】C【解析】人工种子具有很多优点，如解决有些作物品种繁殖能力差、结籽困难、发芽率低等问题，A正确；胚状体的形成是离体的细胞经脱分化和再分化形成的（即植物组织培养技术），B正确；根据题意可知体细胞胚是由植物的体细胞经脱分化和再分化形成的，而花粉胚是由花粉（经减数分裂形成）经脱分化和再分化形成的，因此，同一种植物的体细胞胚和花粉胚的染色体组的数目比是2：1,C错误；植物组织培养的理论依据是细胞的全能性，D正确。学*科（江苏省连云港市、徐州市、宿迁市2017届高三年级第三次模拟考试生物试题）下列关于“克隆羊”“试管羊”“转基因羊”的说法，合理的是（ ）它们的遗传物质都只来自于一个亲本它们在形成过程中一般都有卵细胞的参与它们是通过相同的生殖方式获得亲本的优良性状培育过程都用到核移植技术和胚胎移植技术【答案】B【解析】三种羊的遗传物质都不只来自一个亲本，如克隆羊也有少量遗传物质来自供质的亲本，试管羊是体外受精的产物，细胞核的遗传物质一半来自父方，一半来自母方，A错误,克隆羊的培肓，要把体细胞的细胞核移植到去樓的卵母细胞中,试管羊的培肓需要精子和卵细胞体外受精：转基因羊中，往往把目的基因导入卵细胞，E正确；克隆羊、转基因羊属于无性生殖，试管羊属于有性生殖，C错误,三个成就都用到动物细胞培养技术和胚胎移植技术，但试管羊和转基因羊没有用到核移植技术，D错误。（江苏省南京市2017届高三第三次模拟考试生物试题）科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如下图所示（成纤维细胞可增殖）。下列叙述错误的是（）过程②常用的方法是显微注射法代孕母羊要注射免疫抑制剂防止发生免疫排斥反应使移植胚胎死亡卵母细胞去核的目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养从而获得大量的细胞群

【答案】B【解析】将目的基因转入动物细胞常用显微注射法，A项正确；代孕母羊不会对移植胚胎产生免疫排斥反应，B项错误；卵母细胞去核的目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞，C项正确；整合有目的基因的成纤维细胞可增殖，可进行传代培养从而获得大量的细胞群，D项正确。学&科（吉林省黑龙江八校联合体2016-2017学年高二下学期期中考试生物试题）下图为小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）培养的过程图，下列叙述不正确的是（）胞碎的组蛾 *胡胸握液一细腔堵养一＞MEF细胞严“一不分化胚胎干细胞培养液一I 炳井代可用胶原蛋白酶分散组织块中的细胞MEF细胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化加入培养液中的MEF细胞最好是来自传代培养的细胞细胞培养过程中可能出现细胞贴壁和接触抑制的现象【答案】C【解析】将动物组织细胞分散成单个细胞，可以用胶原蛋白酶或胰蛋白酶，A正确；分析图发现：在胚胎干细胞培养液中加入hlEF细胞后，不分化，但未加的一组，易分化。对比分析可以推导：MEF细胞可能产生某种物质抑制胚胎干细胞的分化，E正确,加入培养液中的蚯F细胞最好是来自恵代培养的细胞，C错误；在动物细胞培养过程中可能出现细胞贴壁和接触抑制的现象，D正确。（江苏省南京市2017届高三第三次模拟考试生物试题）下图是制备抗体的两个途径的模式图，下列叙述正确的是（ ）小鼠瘤£

细胞细胞A②厂匸披休1y细胞细胞崛小鼠瘤£

细胞细胞A②厂匸披休1y细胞细胞崛-mRNA通-W】產因|丄山①结构甲普通质粒图中获得的抗体1和抗体2结构完全相同抗体1和抗体2的制备过程均涉及细胞筛选C•②过程所需的气体CO2的作用维持培养液的pHD.①和④过程的原理分别是细胞增殖和碱基互补配对原则【答案】BC【解析】大肠杆菌没有膜结构细胞器，不能对合成的抗体进行进一步加工，图中获得的抗体1和抗体2结构不完全相同，A项错误；抗体1和抗体2的制备过程均涉及细胞筛选，B项正确；②动物细胞培养所需的气体CO2的作用维持培养液的pH,C项正确；①过程的原理是细胞膜的流动性，D项错误。（江苏省盐城中学2016-2017学年高二第二学期期末考试生物冲刺练习）下列有关植物组织培养的叙述中，错误的是（ ）在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，不可获得染色体加倍的细胞在组织培养中，生长素用于诱导细胞的分裂和根的分化对外植体进行严格的消毒、灭菌后再进行组织培养可获得脱毒植株愈伤组织的诱导往往需要暗培养，再分化一定要有光照【答案】C【解析】植物细胞的最外层是细胞壁，需要去掉细胞壁后才能经过诱导原生质体融合，故典正确,在植物组织培养过程中，需要在培养基中添扣生长素和细胞分裂素，故E正确；在植物组织培养过程中，外植体需要保持活性，因此不能对外植体进行灭菌处理，故C错误；植物组织培养过程中，脱分化不需要光照，再分化时需要光照，故D正确。（江苏省东台市2017届高三5月模拟生物试题）治疗性克隆有望最终解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应。下图表示治疗性克隆的过程，下列有关叙述正确的是（）摘人_ ■健亲细6H ~细腕核一 去核卵轴胞丿 I应用諂疗 ］发育U胚1分离抑伽酌 屜融弼鬲 蹄啊展上述过程利用了动物细胞核移植、动物细胞培养等技术上述过程充分说明动物细胞具有全能性胚胎干细胞具有发育的全能性，可从早期胚胎中分离获取①、②过程都发生DNA复制、转录和翻译【答案】ACD【解析】由图可知，该过程涉及到许多生物技术，如细胞核移植入去卵细胞形成重组细胞技术是细胞核移

植，病人取出健康细胞、胚胎干细胞经过①②等过程涉及到动物细胞培养，重组细胞发育成囊胚属于胚胎培养，A正确；细胞全能性指高度分化的细胞离体后能发育成完整的生物个体的潜能.因此上图不能说明细胞具有全能性，B错误；胚胎干细胞在功能上具有全能性，可从早期胚胎或原始性腺中分离获取，C正确;①②过程中伴有细胞分裂和细胞分化过程.细胞分裂间期发生DNA复制和蛋白质合成，为细胞分裂期做准备；细胞分化的实质是基因选择性表达的结果，包括转录和翻译两过程，D正确。学&科（江苏省南通、扬州、泰州2017届高三第三次模拟考试生物试题）甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如下图。相关叙述正确的是（ ）细胞乙细胞丙细胞丁抗甘草酸的*单克隆抗博细胞乙细胞丙细胞丁抗甘草酸的*单克隆抗博①过程①注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性过程③、④的筛选方法相同，细胞丙、丁遗传物质相同过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖【答案】D【解析】过程①注射相应抗原后应经过一段时间，使小鼠产生浆细胞，再从小鼠腮脏中提取细胞甲，A项错误，过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的流动性，E项错误；过程③筛选杂交瘤细胞，过程④筛选能产生单一抗休的杂交瘤细胞，二者方法不同，C项错误,过程⑤无论在11本内还是体外进行，细胞丁都可犬量増殖，D项正确。（北京市丰台区2017届高三5月综合练习（二模）理综生物试题）埃博拉出血热是一种由埃博拉病毒引起的急性传染病，建立良好特异性的检测方法非常重要。埃博拉病毒核蛋白NP具有很强的抗原性，是诊断研究的重要靶点。（1）鼠源抗NP蛋白的单克隆抗体，由鼠杂交瘤细胞分泌，抗体结构如下图所示，抗体通过可变区与抗原特异性结合。从鼠杂交瘤细胞中提取 ，逆转录合成cDNA，利用 技术扩增鼠源抗体可变区对应的DNA片段。

使用 将 源抗体可变区对应的DNA片段与能表达 源抗体恒定区部分的载体重组，导入人胚肾上皮细胞，从细胞培养液中获取人一鼠嵌合抗体。临床使用人一鼠嵌合抗体的优点是—（2）提取埃博拉病毒的蛋白质进行电泳，并运用抗原一抗体杂交，检测人一鼠嵌合抗体的特异性。实验主要步骤如下图所示，其中一抗能与相应抗原特异性结合，二抗能与相应一抗特异性结合。1ABC二抗杂交 结果分折电泳一抗朵交1ABC二抗杂交 结果分折电泳一抗朵交注：｝*2为电泳泳道，其中1为蛋白质分子童标准，2为提取的埃博拉病垂蛋白质；标记二抗的AP能在显色液中显色…X队C为不同一抗、二抗处理后的三组实验结果。组别一抗来源二抗来源结果①人一鼠嵌合抗体AP标记的抗人抗体I②鼠杂交瘤细胞上清液AP标记的抗鼠抗体II③普通人胚肾上皮细胞培养液AP标记的抗人抗体III实验记录如上表，AP标记的抗人抗体能与嵌合抗体中的人源恒定区结合，AP标记的抗鼠抗体能与鼠源抗体结合。若表中I、II、III依次对应结果分析中的 、 、 （一种方案即可）则表明该人一鼠嵌合抗体能用于埃博拉出血热的应急血清学检测。【答案】（l）RNAPCR限制酶和DNA连接酶（答不全不得分） 鼠人 降低免疫排斥反应（2）方案一：ABC（或方案二：BAC）【解析】（1）基因工程操作中，从鼠杂交瘤细胞中提取相应的RNA,通过逆转录可产生cDNAo利用PCR技术扩增鼠源抗体可变区对应的DNA片段。使用限制酶和DNA连接酶可将鼠源抗体可变区对应的DNA片段与能表达人源抗体恒定区部分的载体重组，导入人胚肾上皮细胞，从细胞培养液中获取人一鼠嵌合抗体。临床使用人一鼠嵌合抗体的优点是降低免疫排斥反应。（2）由实验表格记录可知，AP标记的抗人抗体能与嵌合抗体中的人源恒定区结合，AP标记的抗鼠抗体能与鼠源抗体结合。若表中I、II、III依次对应结果分析中的A、B、C,则表明该人一鼠嵌合抗体能用于埃博拉出血热的应急血清学检测。1.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ）动物细胞培养所需的营养物质与植物细胞培养相同传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞癌细胞在培养瓶中培养不会出现接触抑制现象动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染【答案】A【解析】动物细胞培养所需的营养物质有血清、血浆，植物细胞培养需要匿糖等，A错,传代培养时需要用胰蛋白酶外理贴壁生长的细胞，E正确；癌细胞膜表面的旃蛋白腹少，细胞间信息交流受到限制，在培养瓶中培养不会出现接触抑制现象，C正确；动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染，D正确。2•某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是（ ）利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗采用花粉粒组织培养获得单倍体苗采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养【答案】B【解析】茎段扦插、幼芽嫁接、植物组织培养都是无性繁殖，可以大量快速得到与原有性状相同的个体，A、C、D均可选用；采用花粉粒离体培养可获得单倍体幼苗，但由于花粉粒为雄配子，发育来的单倍体植株会发生性状分离，不能保持亲代的优良性状，B错误。学科3.由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”，下列对此描述不正确的是（ ）“瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成“弹头”是由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成

“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能“生物导弹”是利用细胞工程制出来的【答案】C【解析】试题井析：生物导弾是单克隆抗体与抗癌药物结合形成，其中单克隆抗1■本是『『瞄准装蚤",A正确,抗癌药物是杀伤性“弾头J“弾头■"具有杀伤肿瘤细胞的功能，“生物导弹■"既可以消灭肿瘤细胞,又不会伤害健康细胞，E正确，C错误；“生物导弹■"的制备利用了细胞工程技术，D正确。4•下图为某二倍体植株花药中未成熟花粉形成完整植株的过程。有关叙述正确的是（）过程①②表示脱分化，过程③表示再分化过程①②③需要光照，以便叶绿素的合成过程①②③说明花粉细胞具有全能性过程③获得的完整植株自交后代不会发生性状分离【答案】C【解析】过程①表示脱分化，过程②③表示再分化，A项错误；过程①不需要光照，②③需要光照，以便叶绿素的合成，B项错误；过程①②③说明花粉细胞具有全能性，C项正确；过程③获得的完整植株为单倍体，高度不育，经秋水仙素处理后获得纯合子，自交后代才不会发生性状分离，D项错误。5.“生物导弹”可用于杀死人类某些癌细胞。制备“生物导弹”是单克隆抗体的重要应用之一，其过程如下图所示。下列有关叙述错误的是（ ）抗癌药物免疫厉脾脏中的细胞亍①杂交瘤②单克隆结合骨髓瘤细胞」细胞'免疫厉脾脏中的细胞亍①杂交瘤②单克隆结合骨髓瘤细胞」细胞'抗体•癌细胞①过程所用的“脾脏中的细胞”为经过免疫的B细胞经①形成的杂交瘤细胞都能产生特定抗体与直接使用抗癌药物相比，使用“生物导弹”可以减轻药物副作用抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性【答案】B【解析】抗体是由浆细胞产生的，所以图中免疫的细胞是浆细胞，即淋巴B细胞，A正确；基因是选择性

表达的，经①形成的杂交瘤细胞不一定都能产生抗体，B错误；与直接使用抗癌药物相比，使用“生物导弹”可以减轻药物副作用，C正确；过程③中由于抗体具有高度特异性使其跟踪作用非常准确，D正确。6•下图为白菜一甘蓝的培育流程，相关叙述正确的是（ ）杂空ffiti杂空ffiti①过程常选择胰蛋白酶去壁与②过程有关的细胞器主要是高尔基体过程③④都要进行避光处理过程③④所使用培养基的成分相同【答案】B【解析】①过程为去壁，植物细胞壁成分为纤维素和果胶，应选择纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁，A项错误,②过程为细胞壁的再生，高尔基体与细胞壁的形成有关，E项正确,过程③④分别为脱分化和再分化，过程③要进行避光处理，过程④需要进行光照，以利于细胞壁的形成，C项错误,过程③④所使用的培养基成分如生长素和细胞分裂素含量不同，D项错误o7•下列有关植物细胞工程应用的分析，不正确的是（ ）愈伤组织细胞分裂旺盛，经诱变处理，有利于获得突变个体利用茎尖进行组织培养，可以获得脱毒苗植物体细胞杂交技术培育出的杂种植物一定是高度不育的利用细胞培养工业化生产人参皂甙，提高产量【答