基因毒性杂质全面信息资料

基因毒性杂质

（GenotoxicImpurities）年5月基因毒性杂质全面信息资料第1页主要内容1背景知识介绍3确定毒性阈值步骤4最大程度地控制杂质2杂质与杂质程度基因毒性杂质全面信息资料第2页主要内容1背景知识介绍2杂质与杂质程度3确定毒性阈值步骤4最大程度地控制杂质基因毒性杂质全面信息资料第3页常见基因毒性物质苯并芘、黄曲霉素、亚硝胺许多化疗药品也具基因毒性，它们不良反应是由化疗药品对正常细胞基因毒性所致，如顺铂、卡铂、氟尿嘧啶等。氨基糖甙类抗生素大剂量、长久使用会引发耳毒性有些尤其敏感病人，仅使用一次或短期使用，就出现了听力损失。研究表明，他们一个基因上有一点(mtl555G)与他人不一样，这使他们对氨基糖甙类药品耳毒性易感性大大增加。基因毒性杂质全面信息资料第4页什么是基因毒性杂质是指能直接或间接损伤细胞DNA，产生致突变和致癌作用物质。惯用缩写PGLs（potentiallygenotoxicimpurities有潜在基因毒性杂质）GTLs（genotoxicimpurities基因毒性杂质）可能产生基因毒性杂质步骤：新药合成原料纯化储存运输（与包装物接触）。。。。。。基因毒性杂质全面信息资料第5页相关基因毒性杂质指南EMEA（欧洲药品局）年首先颁布了《基因毒性杂质程度指南》，并自年1月1日起正式实施。该指南为限制新活性物质中基因毒性杂质提供了处理问题框架和详细做法。ICH年，ICH也公布了对应要求详细内容参见ICHQ3A(R2)

IMPURITIESINNEWDRUGSUBSTANCESQ3appendix2reference,Step4version(25.10.06)新药原料药中杂质，Q3A(R2),步骤4（06年10月25日）版基因毒性杂质全面信息资料第6页FDA于年12月正式签发了类似指南：GuidanceforIndustry――GenotoxicandCarcinogenicImpuritiesinDrugSubstancesandProducts：RecommendedApproaches。主要内容包含：指南公布背景原料药和制剂中基因毒性杂质生成预防方法基因毒性杂质分析方法、处理方法和降低方法上市申请和临床研究申请可接收程度草药原料药和制剂中基因毒性杂质评定指南相关基因毒性杂质指南基因毒性杂质全面信息资料第7页主要内容赖祖亮@小木虫2杂质与杂质程度1背景知识介绍3确定毒性阈值步骤4最大程度地控制杂质基因毒性杂质全面信息资料第8页FDA原料杂质程度StandardlimitsforimpuritiesinAPIsAPI中杂质标准程度/cber/gdlns/ichq3a.pdfMaximunDailyDose1每日最大剂量ReportingThreshold2,3汇报程度IdentificationThreshold*判定程度QualificationThreshold*毒性程度≤2g/天0.05%0.10%或者天天摄入量1.0mg（取最小值）0.15%或者天天摄入量1.0mg（取最小值）＞2g/天0.03%0.05%0.05%SFDA质控程度：质量标准中允许程度，制订程度超出该值，应有充分依据。基因毒性杂质全面信息资料第9页SFDA制剂杂质程度汇报程度最大日剂量≤1g＞1g程度0.1%0.05%判定程度最大日剂量＜1mg1mg～10mg＞10mg～2g＞2g程度1.0%或5μg0.5%或20μg0.2%或2mg0.1%质控程度最大日剂量＜10mg10mg～100mg＞100mg～2g＞2g程度1.0%或50μg0.5%或200μg0.2%或3mg0.15%考虑病例数与疗程，同时考虑：遗传毒性研究；常规毒性研究；其它特定毒性终点（酌情而定）。降低到判定程度以下降低到质控程度以下NoNo是否与临床不良反应相关？合格NoYes降低到安全程度决议树基因毒性杂质全面信息资料第10页为何呀？基因毒性杂质全面信息资料第11页毒性阈值假如一个物质体内试验表明对DNA有潜在破坏性，可能造成肿瘤产生，我们是否能够这么下结论：任何摄入水平都含有致癌风险。不存在显著阈值。××基因毒性杂质全面信息资料第12页毒性阈值我们是不是做一个试验：剂量从低到高，对其影响性进行线性推断？生物系统纠错功效使试验不具备可操作性。×引入一个新观点：确定一个可接收其风险摄入量突变机制：细胞水平：基因突变，染色体重排，其它分子水平：切断或共价修饰DNA损伤生物系统纠正办法：修复受损DNA程序性细胞死亡（凋亡）基因毒性杂质全面信息资料第13页TTC概念TTCThresholdofToxicologicalConcern：毒性物质限量，也能够称之为毒理学关注门槛，是一个默认值。一个未知基因毒性数据杂质：TTC=1.5微克/天基因毒性杂质全面信息资料第14页TTC概念天天摄入1.5微克基因毒性杂质，被认为对于大多数药品来说是能够接收风险。使得人一生致癌风险小于十万分之一。现实生活中，人一生得癌症概率是四分之一。必须要强调是TTC是一个风险管理工具，它采取是概率方法。意思为：假如有一个基因毒性杂质，而且我们对它毒性大小不太了解，假如它每日摄入量低于TTC值，那么它致癌风险将不会高于10－5概率。所以TTC不能被了解为绝对无风险保障。基因毒性杂质全面信息资料第15页主要内容3确定毒性阈值步骤1背景知识介绍2杂质与杂质程度4最大程度地控制杂质基因毒性杂质全面信息资料第16页确定毒性阈值步骤依据化学结构，将杂质分为五类；Step1:Step2:Step3:按照分类，确定验证策略(参见决议路线图)；按照日剂量，确定原料药中杂质程度(参见表1：短期用药推荐允许日摄入量)。基因毒性杂质全面信息资料第17页分类Class1:GenotoxicCarcinogens第1类：已知、含有基因毒性（突变性）和致癌性杂质Step1:Class2:GenotoxicCarcunknow第2类：已知、含有基因毒性（突变性），但致癌性未知杂质Class3:Alert-Unrelatedtoparent第3类：含有警示结构、与API无关、基因毒性（突变性）未知杂质Class4:Alert-Relatedtoparent第4类：含有警示结构、与API相关、基因毒性（突变性）未知杂质Class5:NoAlerts第5类：没有警示结构，没有基因毒性（突变性）杂质基因毒性杂质全面信息资料第18页致癌警示结构基因毒性杂质全面信息资料第19页决议路线图Step2:杂质分类、验证和风险评定Class1:GenotoxicCarcinogensNoClass2:GenotoxicCarcunknow(Staged)TTC(seeTable1)NoorunknowYesPDE(e.g.ICHQ3appendix2referenceYesNottestedClass3:Alert-UnrelatedtoparentClass4:Alert-RelatedtoparentControlasanordinaryimpurityEliminateImpurity?RiskAssessment3?ThresholdMechanism?ImpurityGenotoxic?1APIGenotoxic2Class5:NoAlertsNoNo去除杂质风险评定用阈值控制该杂质是否有基因毒性？该原料是否有基因毒性？基因毒性杂质全面信息资料第20页疑似基因毒素日摄入量用药期限＜14天14天-1月1-3月3-6月6-12月>12月允许日摄入量(μg/日)12060201051.5Step3:FDAhttp:/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatorylnformation/Guidances/ucm079235.pdfTTC值短期用药允许摄入量TTC=1.5微克/天表1：短期用药推荐允许日摄入量基因毒性杂质全面信息资料第21页最大日摄入量与浓度转化表≥0.5%≥0.5%≤100ppm≤100ppmIncreasedduration=DecreasedADIofImpurity

IncreasingDoseofAPI可参考使用范围可参考使用范围RegulatorToxicologyandPharmacology.,44:198-211EMEA基因毒性杂质全面信息资料第22页怎样确定PDE？PDENOELF1F2F3F4F5允许日暴露量（mg/天）观察不到影响限值物种之间外推法因子（F1=12，从小鼠到人类）个体差异因子毒性研究周期因子严重毒性因子假如只有LOEL（可观察到效果最低限值）时因子ICHQ3CGuidelineforResidualSolvents残留溶剂指南：/Regulatorylnformation/Guidances/ucm128223.htm/downloads/Drugs/GuidanceComplianceRegulatorylnformatio6n/Guidances/ucm073394.pdfNOEL×重量调整因子PDE=F1×F2×F3×F4×F5基因毒性杂质全面信息资料第23页常见PDE值溶剂名称PDE值（mg/天）程度（%）第一类溶剂（应防止使用）苯0.020.0002四氯化碳0.040.00041,2-二氯乙烷0.050.00051,1-二氯乙烯0.080.00081,1,1-三氯乙烷15.00.15第二类溶剂（应限制使用）乙腈4.10.041氯苯3.60.036氯仿0.60.006环己烷38.80.3881,2-二氯乙烯18.70.187溶剂名称PDE值（mg/天）程度（%）第三类溶剂（GMP或其它质量要求限制使用）乙酸50.00.5丙酮50.00.5甲氧基苯50.00.5正丁醇50.00.5仲丁醇50.00.5乙酸丁酯50.00.5叔丁基甲基醚50.00.5异丙基苯50.00.5二甲亚砜50.00.5乙醇50.00.5乙酸乙酯50.00.5药品中常见残留溶剂及其程度（节选）基因毒性杂质全面信息资料第24页Goldcarcinogenicitydatabase()里面有1574种致癌物质列表，结构式，CAS号，作用部位，TTC值等等一系列信息。近30年关于基因毒性方面研究出版物（PDF版）用不一样分类方法统计致癌物质列表。不用注册，能够直接点击查看、下载全文。基因毒性物质列表基因毒性杂质全面信息资料第25页目标在于检测试验物质是否直接或间接引发基因损伤，并测知其对基因损伤程度。测试潜在基因毒性杂质次序：计算机筛选（软件模拟计算）微生物试验（比如：诱变可能性试验）动物试验（通常是小鼠和大鼠）基因毒性试验

（genotoxicitystudy）能够用于预测基因毒性软件MultiCASE,Oncologic,DEREK,TOPKAT;’RTECS’(RegistryofToxicEffectsofChemicalSubstances,subscription);LeadScope;FDAdatabaseswww.emea.europa.eu/pdfs/human/swp/43199407en.pdf/fdmspublic/component/main?main=DocumentDetail&o=09000064807ddb80ToxTreesoftwarefordegradation:Railard,S.P.;Bercu,J.;Baertschi,S.W.;Riley,C.M.Org.ProcessRes.Dev.,14,1015.值得注意是：在活体动物试验中，有时候，没有表达出致突变性，是因为保护机制在起作用。比如：测试丙烯酸，丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯体外测试（小鼠淋巴瘤细胞）：发觉DNA损伤活体测试：无诱变作用证据基因毒性杂质全面信息资料第26页结构不一样单个杂质程度应该小于1.5微克/天。有相同作用机制、结构相同杂质，其含量总和程度应该参考1.5微克/天限量进行评定。怎样评定多个基因毒性杂质基因毒性杂质全面信息资料第27页主要内容4最大程度地控制杂质1背景知识介绍2杂质与杂质程度3确定毒性阈值步骤基因毒性杂质全面信息资料第28页药学评价应该依据现有处方工艺，提供杂质程度合理性。应该列明全部包括到含有基因毒性或致癌性化学物质，如全部试剂、中间体、副产品等。即使这些基因毒性反应物或者有基因毒性结果物质没有在API上表达，也都应该被考虑。原料药合成基因毒性杂质全面信息资料第29页药学评价假如在合成路线、起始物料方面没有更加好选择，则需要提供一个正当理由。即：“物质中能引发基因毒性和致癌性结构部分在化学合成中是不可防止”假如基因毒性杂质被认为是不可防止，那么应该采取技术伎俩尽可能降低基因毒性杂质在产品中含量，使其符合安全需要或使其降低到一个合理水平。对于活性中间体、反应物、以及其它化合物化学稳定性都应该进行评定。应该有合理分析方法去检测和量化这些杂质残留量。原料药合成基因毒性杂质全面信息资料第30页决议树基因毒性杂质有充分证据用于评价基因毒性阈值由试验数据得到毒性情况。eg.Ames检测阳性/DNA反应活性计算PDE是否为安全摄入量控制在安全程度以下基因毒性杂质不能防止？否是不采取任何办法