口腔微生物学-牙菌斑和生物膜

1.基本概念2.牙菌斑的生物学作用3.牙菌斑的形成过程★4.牙菌斑的分类5.牙菌斑的成分1一、基本概念牙菌斑（plaque）：堆积在牙表面或修复体表面，不能被机械力和中等速度的水冲去的细菌团块。G.V.Black首次2附注：牙菌斑显示剂简介：牙菌斑显示剂安全无毒，含有食用色素。通常有液剂和片剂两种，专业人员一般使用液剂蘸湿后给患者使用，患者使用片剂。用法：放入口中，用双侧牙齿将其充分嚼碎，用舌尖舔食内外侧，吐出口内残余物，充分漱口，照镜观察红染部位。34生物膜(biofilm)：由对氧不同敏感性的细菌（需氧菌、兼性厌氧菌或绝对厌氧菌等）嵌入多糖、蛋白质和矿物质组成的基质中共同构成的膜性结构。是龋病和牙周病的主要病因。生物膜外层：表面膜成层，水道，通气道内层：表面下膜，深入釉质1~3um5生物学特点：菌斑的内外环境保持动态平衡，参与维持口腔正常生理功能。菌斑生存环境发生改变时，菌斑内菌群数量及比例失调。致病菌成为优势菌，菌斑产生异常有害物质，可能引起疾病。6二、生物膜作用★保护牙菌斑菌丛细菌抵制口腔苛刻环境，使细菌在口腔环境中正常生长；——遮风挡雨膜内的多聚物基质起约束和网络作用，控制基质中营养成分的移动；——营养仓库浓缩从环境中来的营养物质和其他元素，滞留从菌体内遗漏出的营养物质；——营养鱼网膜内的蛋白分子中的巯基可综合氧自由基，保护细菌免受氧化作用的损伤。——免受伤害7三、牙菌斑的形成过程（动态的过程）★分六个阶段：牙表面获得性膜的形成传递（布朗运动）初期附着电子远距离弱结合可逆细菌附着短距离特异性化学结合不可逆共聚菌斑成熟81.牙表面获得性膜的形成（必须条件）形成：唾液中的粘蛋白、糖蛋白、血族抗原和免疫球蛋白在牙表面上形成一层结构均匀无细胞的薄膜，厚约1-10µm,龈缘区的膜较厚而牙尖区较薄。作用：该薄膜在促进细菌对牙表面的黏附中起受体的作用，并对细菌的附着有选择性吸附作用。菌斑形成的基础。获得膜是细菌附着的必须条件。92细菌附着起作用的分子为蛋白质、多糖、脂磷壁酸等，具体机制有三：1、蛋白质-蛋白质的相互作用机制：细菌利用本身的表面蛋白与牙表面的获得性膜的唾液蛋白相结合，实现细菌在牙表面的定植。102、多糖可引起多种细菌在牙表面上的聚集：由变链菌胞外葡糖基转移酶合成的两种葡聚糖，合成的葡聚糖两种：含ɑ-1，6糖苷键的水溶性葡聚糖含ɑ-1，3糖苷键的不溶水葡聚糖前者可促进细菌的彼此聚集，诱导细菌合成并分泌ɑ-1，3糖苷键葡聚糖，后者不溶于水，但可促进细菌彼此的黏附。113、脂磷壁酸对G+菌和葡萄糖基转移酶的桥接作用：脂磷壁酸对G+菌和葡萄糖基转移酶均有亲和力，促进了细菌之间的黏附和细菌的糖代谢。4、血链菌为牙表面最早的定植者，属于口腔链球菌群微生物。（先锋菌）123．初期附着(attachedbylong-rangephysico-chemicalforce)

细菌附着于获得膜。借助于细菌表面粒子和获得膜表面粒子间产生的范德瓦尔斯力。属于一种“远距离”的、较弱而可逆的物理-化学性附着。13细菌“远距离”的附着。144．细菌粘附细菌表面粘附素与获得膜表面受体的结合，是一种“近距离”、特异性的化学作用，粘附是不可逆的过程。粘附素与受体之间是特异性结合。

15细菌粘附素获得膜受体链球菌种表面抗原I/II唾液凝集素链球菌种脂磷壁酸(LTA)糖蛋白变形链球菌葡聚糖连接蛋白葡聚糖内氏放线菌I型菌毛富脯蛋白卢氏放线菌凝集素半乳糖牙龈卟啉单胞菌150KDaprotein纤维蛋白原16细菌共聚(co-aggregation)17细菌的粘附与共聚185菌斑成熟1、附着黏附细菌种类和数量的增加，纤毛菌开始定植于牙菌斑并开始生长；2、纤毛菌逐渐替代链球菌的主导地位，形成与牙面垂直排列的栅栏样结构，这是菌斑成熟的标志；（约出现在菌斑成熟的5-6天，并可看到谷穗样的结构）19谷穗样（corn-cob）结构：以纤毛菌为轴心，球菌、短杆菌粘附在其周围，形似谷穗。

2021菌斑基本形成及扩散22阶段机制1．获得膜形成唾液、龈沟液和细菌的分子物质吸附在牙表面，形成获得膜2．细菌传递细菌通过唾液流动传递获得膜上3．细菌初期附着细菌表面和获得膜分子间的范德瓦尔斯力的作用4．细菌粘附粘附素与受体间的化学作用5．细菌共聚细菌与已粘附的细菌聚集6．牙菌斑形成细菌增殖，产生共同生长的生物膜，同时合成细胞外聚合物7．扩散细菌从菌斑脱离进入新部位23243、成熟菌斑的光镜结构：★①基底层：获得性膜：无细胞，HE染色为粉红色。②中间层：主要为细菌，有球菌、杆菌、丝状菌等，丝状菌彼此平行且与牙面垂直呈栅栏状。细菌间隙中有菌斑基质。③表层：为散在的球菌、杆菌、脱落的上皮、食物残渣及衰亡的细胞。25牙菌斑的基本结构（LM）基底层表层中间层2627光滑修复体表面细菌（×5000，1月）光滑修复体表面细菌（×5000，×10000，3月）28非光滑修复体表面细菌（×10000，3月）非光滑修复体表面细菌（×5000，1月）29附注：成熟牙菌斑的细菌分类成熟牙菌斑的细菌比例是：兼性厌氧链球菌27%兼性类白喉杆菌23%厌氧类白喉杆菌18%胨链球菌13%韦永氏菌6%拟杆菌4%梭状菌4%奈瑟氏菌3%弧菌2%30熟牙菌斑中致龋菌为：★变形链球菌放线菌血型链球菌乳杆菌314.牙菌斑的成分a、细胞和非细胞成分：细胞成分主要为各种细菌和蛋白质；非细胞成分为食物残渣和细菌代谢物等。b、水分和固体成分：水分：占80%固体：占20%蛋白质45%糖15%脂肪12%其他（无机物等）30%左右32菌斑基质成分的变化：335、牙菌斑的分类★按照牙菌斑所在的部位分类：a、龈上菌斑：附着在牙表面或修复体冠部的菌斑，以G+菌为主，主要为微需氧菌和需氧菌。光滑牙面菌斑：以链球菌为主（轻链菌、血链菌、变链菌、唾链菌）点隙裂沟菌斑：以G+球菌为主（变链菌、乳杆菌）3435b、龈下菌斑：位于龈缘下的菌斑（龈沟和牙周袋内），以兼性厌氧菌为主。附着性龈下菌斑：附着于牙面上，以G+球菌、轻链菌、血链菌为主。非附着性龈下菌斑：不附着于牙面或牙根上，确与龈沟上皮和结合上皮接触，以G-厌氧菌为，其代谢产物可引起牙周组织炎症。36附着龈下菌斑非附着龈下菌斑37龈下菌斑图片38光滑面菌斑窝沟菌斑邻面菌斑龈下菌斑Ｇ＋球菌轻链球菌血链球菌变形链球菌变链菌群咽峡炎链球菌口腔链球菌血链菌变形链球菌远缘链球菌轻链球菌咽峡炎链球菌Ｇ＋杆菌内氏放线菌内氏放线菌内氏放线菌衣氏放线菌溶牙链球菌麦氏放线菌溶牙链球菌内氏放线菌戈氏放线菌Ｇ－球菌韦荣菌奈瑟菌韦荣氏菌奈瑟氏菌韦荣氏菌Ｇ－杆菌普氏菌梭杆菌专性厌氧菌产黑色素普氏菌变黑普氏菌牙龈卟啉单胞菌梭杆菌39五、菌斑与口腔疾病利于菌斑滞留区域多为龋及牙周病易感区。疾病发生早期及进展期，菌斑内致病菌菌群比例及数量明显增加,成为优势菌。菌斑致病菌产生对牙体及牙周组织有害的毒性物质。消除致病细菌及毒素，疾病得到改善。菌斑引起疾病属于内源性感染。其病原菌多数属于条件致病菌。有多因素、多菌种、多毒性特点。4041牙菌斑的清除方法：1.刷牙如果刷牙得当，就可以使牙齿表面的牙菌斑量大为减少，因此我们必须养成每天早晚刷牙的好习惯，并掌握正确的刷牙方法；2.牙线能有效清除牙齿邻接面的牙菌斑，减少邻面龋的发生；3.牙签在牙龈萎缩、牙与牙之间出现间隙的情况下，可借助横断面呈三角形牙签来清除邻接面的牙菌斑；4.牙间刷牙间刷也适用于牙齿之间出现间隙的情况，能有效的清除牙齿邻接面的牙菌斑；5.