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第第#页共6页得分评卷人得分评卷人三、选择题(2x15=30分)123456789101112131415得分评卷人四、问答题(27分)答案不够写转到反面分子诊断学试卷答案一、名词解释:(3x6=18分)1、质粒:是指在细胞的染色体或核区DNA之外,能够自主复制的DNA分子。2、同工酶:催化的化学反应相同,酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。3、基因:是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列4、基因组:一个单倍体生物所含有的全部DNA。5、端粒:以线性染色体的形式存在于真核基因组DNA末端的特殊结构。6、荧光定量PCR:通过荧光信号对PCR过程中的产物量进行实时监测,精确计算出PCR的初始模板量。二、填空题:(1x25=25分)1、260,280,1.8。2、—变性―,_退火,延伸。3、—目的基因一,PCR。4、—核苷酸―,,3'-5'磷酸二酯键。5、尽量排除其他分子污染,生物。6、闭环,开环,线性。7、电荷,大小,大。8、转化,转导。9、扩增特异性,扩增效率。三、选择题(2x15=30分)12345678910ABABEABDBB1112131415EBBCA四、问答题(27分)1、试述基因工程的基本操作步骤?(参考答案)狭义基因工程的基本五步:切、接、转、增、检。从供体中分离出基因组DNA,用限制性内切酶分别将外源DNA和载体分子切开。接,用DNA连接酶含有外源基因的DNA片段接到载体分子上,构成DNA重组分子转,借助细胞转化手段将DNA重组分子导入受体细胞中。增,短时间培养转化细胞,以扩增DNA重组分子或使其整合到受体细胞的基因组中。e检,筛选和鉴定经转化处理的细胞,获得外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞。2、PCR过程中引物设计的基本原则有哪些?(参考答案)(1)引物的长度一般为15-30bp,常用的是18-27bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74°C,不适于TaqDNA聚合酶进行反应。(2)G+C含量:应在40%-60%之间。(3)碱基分布的随机性:应避免连续出现4个以上的单一碱基。尤其是不应在其3’端出现超过3个的连续G或C。(4引物自身:不能含有自身互补序列,否则会形成发夹样二级结构。(5)引物之间:两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基,不然会形成引物二聚体,尤应避免3’端的互补重叠。引物3’端最好选T,错配的几率与A相比大大的降低了。3、简述核酸分子杂交的基本原理?(参考答案)根据核酸变性和复性的原理,不同来源的DNA变性后,若这些异源DNA之间存在某些相同序列的区域,在退火条件下则可形成DNA-DNA异源双链,或将变性的单链DNA与RNA经复性处理可以形
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