胃癌组织CD44v6、COX-2、MMP-2表达及其与淋巴结转移的关系

胃癌组织CD44v6、COX-2、MMP-2表达及其与淋巴结转移的关系【摘要】

目的

研究胃癌组织中CD44v6、COX-2、MMP-2的叙述及其与胃癌淋巴结转移的关系。办法

用免疫组化办法检测胃癌组织中CD44v6、COX-2、MMP-2的叙述情况，并分析其叙述与胃癌淋巴结转移的关系。结果

60例胃癌组织中，CD44v6、COX-2和MMP-2叙述阳性率分别为61.7%〔37/60〕，55.0%(33/60)和73.3%(44/60)。胃癌组织中CD44v6、COX-2、MMP-2的叙述与淋巴结转移密切相关。结论

胃癌组织中CD44v6、COX-2、MMP-2的叙述与胃癌淋巴结转移密切相关，提示CD44v6、COX-2、MMP-2可作为判断胃癌预后的指标。

【关键词】

胃癌；CD44v6；环氧合酶-2；基质金属蛋白酶；淋巴结转移；免疫组织化学

ExpressionofCD44v6，COX-2，MMP-2ingastriccarcinomasandtheirrelationshiptolymphnodemetastasis

【Abstract】

Objective

TostudytheexpressionofCD44v6，COX-2andMMP-2ingastriccarcinomasandthererelationshiptolymphnodemetastasis.Methods

TheexpressionofCD44v6，COX-2andMMP-2ingastriccarcinomasweredetectedbyimmunohistochemicalmethod，andtheirrelationshipwithlymphnodemetastasiswasanalyzed.Results

ThepositiveratesfortheexpressionofCD44v6，COX-2andMMP-2in60gastriccancertissueswere61.7%〔37/60〕，55.0%(33/60)and73.3%(44/60)，respectively.TheexpressionofCD44v6，COX-2andMMP-2weresignificantlyrelatedwithlymphnodemetastasis.Conclusion

TheexpressionofCD44v6，COX-2andMMP-2weresignificantlyrelatedwithlymphnodemetastasisingastriccarcinomas，showingthattheycanbeusedasindicatorstopredictprognosisofgastriccarcinomas.

【Keywords】

gastriccarcinoma;CD44v6;COX-2;MMP-2;lymphnodemetastasis;immunohistochemistry

淋巴结转移和复发是影响胃癌患者预后的重要因素之一。淋巴结转移是一个复杂的过程，CD44v6可参与癌细胞与基质的黏附作用及淋巴细胞归巢，从而有利于癌细胞的扩散与转移。环氧合酶-2〔COX-2〕的过度叙述可上调基质金属蛋白酶-2〔MMP-2〕的叙述，并增加其活性，从而促进肿瘤浸润和转移。本文采用免疫组化办法对60例胃癌术后淋巴结转移进行检测，并分析胃癌组织中CD44v6、COX-2和MMP-2叙述与胃癌淋巴结转移的关系。

1

对象与办法

1.1

研究对象

选择60例手术切除并经病理证实的胃癌标本，男39例，女21例，年龄32～81岁，平均58岁。其中早期胃癌8例，进展期胃癌52例。所有患者均行根治性胃癌切除，术前未接受放疗和化疗。病理标本均按?中国胃癌诊治标准》和日本胃癌处理标准进行处理。胃癌组织及淋巴结标本均经10%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，切片厚度5μm，进行常规HE染色和免疫组化染色。

1.2

免疫组化检测

采用ABC法免疫组化染色，ABC试剂盒购自美国Vector公司，组织切片经二甲苯脱蜡、酒精水化后，浸入3ml/L的过氧化氢中30min，以阻断内源性过氧化酶的活性，然后将玻片置入0.01mol/L，pH6.0的柠檬酸缓冲液中加热30min，以充沛暴露抗原，分别滴加鼠抗人CD44v6单抗〔北京中山生物技术公司〕、兔抗人COX-2多抗〔北京中山生物技术公司〕和鼠抗人MMP-2单抗〔福州迈新生物技术公司〕，4℃孵育过夜，再滴加第二抗体，室温下反馈20min，过氧化酶反馈15min。随后经二氨基联苯胺四盐酸盐显色5min，再经苏木素复染，脱水、透明、封片。每次染色均以磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.3

办法

每张切片分别取上、下、左、右和中心共5个区域进行细胞计数，每个区计数200个肿瘤细胞，共计数1000个肿瘤细胞，计算染色细胞所占比例。CD44v6定位于胃癌细胞胞膜，COX-2和MMP-2定位于胃癌细胞胞浆，以细胞内出现棕黄色颗粒为阳性细胞，阳性细胞所占比例1.4

统计学办法

所有数据采用χ2检验，P＜0.05为差别有显着性。

[1]

[2]

下一页

2

结果

胃癌组织中CD44v6叙述定位于癌细胞的胞膜，60例胃癌中其叙述阳性率为61.7%〔37/60〕。胃癌中COX-2和MMP-2均定位于癌细胞胞浆，60例中其叙述阳性率分别为55.0%(33/60)和73.3%(44/60)。分析发现，胃癌组织中CD44v6、COX-2、MMP-2的叙述与淋巴结转移密切相关，其叙述阳性者淋巴结转移阳性率显着高于叙述阴性者〔P＜0.05〕，见表1。表1

CD44v6、COX-2、MMP-2叙述与淋巴结转移的关系

例〔%〕

3

讨论

CD44v6是广泛分布于细胞外表的跨膜糖蛋白，作为细胞基质透明质酸受体，参与细胞膜与基质的黏附作用及淋巴细胞归巢，从而促进癌细胞的扩散与转移。研究说明，CD44v6与人类恶性肿瘤的发生、侵袭和转移密切相关［1］。Yamamichi等［2］报道，胃癌浸润胃壁淋巴管及淋巴结阳性者，CD44v6叙述显着高于阴性者。COX-2是花生四烯酸合成前列腺素的限速酶，在正常组织中不叙述。COX-2与肿瘤的关系表现在下列几个方面：〔1〕COX-2的过度叙述可促进肿瘤细胞增殖，抑制其凋亡；〔2〕COX-2的过叙述与肿瘤新生血管形成有关；〔3〕COX-2的过叙述可提高肿瘤发生及转移的潜能。有研究说明，COX-2的叙述与肿瘤淋巴结转移呈正相关［3］。MMP-2是MMP家族的主要成员之一，又称“明胶酶A〞，其主要依赖降解IV型胶原以促进肿瘤细胞突破基底膜屏障发生浸润转移。

本研究用免疫组化办法检测胃癌组织中CD44v6、COX-2、MMP-2的叙述情况，并分析其叙述与胃癌淋巴结转移的关系。结果说明，在肿瘤CD44v6、COX-2和MMP-2叙述阳性的病人中，其胃周淋巴结转移阳性率分别为81.1%、81.8%和77.3%，而叙述阴性者的淋巴结转移阳性率分别为52.2%、55.6%和50.0%，其差别有显着性〔P＜0.05〕〔见表1〕。提示胃癌细胞在异常分化中，获得CD44v6、COX-2和MMP-2叙述的同时，也获得高转移的能力。根底研究显示，CD44v6仅在转移细胞株中叙述，而非转移细胞株中不叙述，将CD44v6转移到非肿瘤细胞中，后者就具有转移能力［4］。亦有临床研究显示，COX-2抑制剂〔非甾体类抗炎药〕可显着降低胃肠道肿瘤的发生率和死亡率，而MMP-2抑制剂BBS2516imastat也已进入临床试验阶段。这些均说明，CD44v6、COX-2、MMP-2蛋白在胃癌的进展中起重要作用，检测这些蛋白叙述对判断胃癌患者淋巴结转移潜能和预后、提供胃癌新的治疗靶点有重要意义。

【参考文献】

1

YamaguchiA，GoiT，YuJ，etal.ExpressionofCD44v6inadvancedgastriccanceranditsrelationshiptohematogenousmetastasisandlong-termprognosis.JSurgOncol，2022，79:230.

2

YamamichiK，UeharaY，KitamuraN，etal.IncreasedexpressionofCD44v6mRNAsignificantlycorrelateswithdistantmetastasisandpoorprognosisingastriccancer.IntJCancer，1998，79:256.

3

KinoshitaT，TakahashiY，SakashitY.Regulationandinductionofepidermalgrowthfactorreceptorbyoverexpressionofcyclooxygenase1and2inhumancoloncarcin