几种重要病毒的简介演示文稿

几种重(Zhong)要病毒的简介演示文稿第一页，共二百七十页。本章重(Zhong)点1.腺病毒复制的特点以及逃避宿主免疫监控的机制2.何为自主型和缺陷型细小病毒3.轮状病毒基因组结构特点、编码蛋白的功能及逃避宿主免疫监控的机制4.流感病毒的变异特点5.SARS的起源流6.艾滋病毒的致病特点7.乙肝病毒复制的特点第二页，共二百七十页。第一节Ⅰ类病(Bing)毒—腺病毒

腺病毒（Adenovirus）最初于1953年从人的增殖腺分离出来，它是一群分布十分广泛的DNA病毒。能引起人类呼吸道、胃肠道、泌尿系统及眼的疾病，少数对动物有致癌作用。腺病毒科（Adenoviridae）病毒分四个属：哺乳动物腺病毒属（Mastadenovirus）禽腺病毒属（Aviadenovirus）富AT腺病毒属（Atadenovirus）唾液酸酶病毒属（Siadenovirus）第三页，共二百七十页。一、生物学(Xue)性状

腺病毒无囊膜，直径80~110nm，呈二十面体对称，线状的双股DNA与核心蛋白形成直径60~65nm的髓芯，被包裹于衣壳内。衣壳由252个直径8~10nm的壳粒组成，壳粒排列在三角形的面上，每边6个，其中240个为六邻体(Hexon)，另12个为五邻体基底(Penton，顶点壳粒)。每个五邻体基底上结合着1根(哺乳动物腺病毒)或2根(禽腺病毒)长9~77.5nm的纤维突起，这些纤维以五邻体蛋白为基底由衣壳面伸出，纤维顶端形成头节区。第四页，共二百七十页。第五页，共二百七十页。第六页，共二百七十页。第七页，共二百七十页。衣壳蛋白解离后，具有三种抗原。其中组成六邻体的衣壳蛋白具有组特异性α抗原；组成五邻体的基底具有同组共有的β抗原；而组成五邻体的纤维是型(Xing)特异性γ抗原所在。自上个世纪50年代发现并成功分离腺病毒以来，已陆续发现了100余个血清型，其中人腺病毒有47种，分为A、B、C、D、E和F六个亚群。

第八页，共二百七十页。腺病毒耐酸，故能通过胃肠道而继续保持活性，这为口服腺病毒载体的研制提供了方便，许多腺病毒就是从人和动物的粪便中获得的。无囊膜，对有机溶剂不敏感，但在丙酮中不稳定。腺病毒在-20℃时可长期存(Cun)活，56℃加热可灭活。适宜pH为5~6，pH值在2以下或10以上均不稳定。第九页，共二百七十页。二、病毒的复(Fu)制1、基因组的结构特点：①反向末端重复序列（invertedterminalrepeat,ITR）：每股核酸末端都有长约100bp的反向末端重复序列，是复制的起始位点。②末端蛋白（TP）：每股DNA的5’端通过脱氧胞苷共价结合一个小蛋白质（55ku）即末端蛋白（TP）。对DNA复制的起始非常重要。③蛋白VII和一种称为mu的小蛋白紧密地环绕在DNA周围，起到类组蛋白样的作用。另一种蛋白V将这种DNA-蛋白复合物连接起来，并通过蛋白VI与病毒衣壳连接在一起。④在左端ITR的3’侧有一段长约300bp的包装信号（ψ）介导腺病毒基因组包装入病毒衣壳。第十页，共二百七十页。ITRITR

ψE1AE1BL1L2L3L4E3L5E2BE2AE4第十一页，共二百七十页。2、病毒(Du)的复制⑴粘附和进入细胞腺病毒感染细胞的过程是从腺病毒纤毛的头节区粘附到细胞表面的特异性受体开始的。因为人腺病毒主要与柯萨奇B病毒共用一种受体，因此这种受体被称为柯萨奇/腺病毒受体即CAR（coxsackie/adenovirusreceptor）。第十二页，共二百七十页。⑵转录与复制腺病毒基因早期产物的主要功能：①E1区基因表达产物（调控宿主细胞，与病毒致癌相关）E1区基因进一步分为E1A和E1B：E1A蛋白的主要功能是调节细胞代谢，将感染细胞带入DNA复制周期，细胞开始储存病毒DNA复制所需的原料。E1A蛋白还可以激活其他早期基因（E1B、E2A、E2B、E3和E4）的启动子，也可以拮抗干扰素的作(Zuo)用。

第十三页，共二百七十页。E1B蛋白的主要功能是防止细胞凋亡，调控晚期基因的表达。19K与细胞Bcl-2基因（抑制细胞凋亡）的表达产物同源，可以通过灭活和清除Bax家族成员来防止细胞发生凋亡或坏死。E1B55K基因产物可以下调p53基因（刺激细胞凋亡）的转录水平，当然这(Zhe)种调节功能不是绝对的，其他一些腺病毒基因（如E4orf6）也参与了这一过程。另外，E1B55K基因产物干扰细胞mRNA从细胞核释放。第十四页，共二百七十页。②E2区基因表达产物（复制相关蛋白）可分为E2A和E2B。其中E2A即单链DNA结合蛋白（ssDBP,single-strandedDNAbindingproteins）；E2B主要产物有两种，分别是末端蛋白前体（pTP,precursorterminalprotein）和病毒DNA聚合酶（pol）。三种蛋白与至少三种细(Xi)胞内的因子相互作用，启动腺病毒DNA复制以及病毒晚期基因的转录和翻译过程。第十五页，共二百七十页。③E3区基因表达产物（逃避免疫攻击）主要功能是破坏宿主的免疫防御机制，而与病毒基因组的复制无关。E3基因的产物之一11.6Kd，由于可以在(Zai)病毒感染的晚期裂解细胞并释放病毒颗粒而被称为腺病毒死亡蛋白（ADP，adenovirusdeathprotein）。gp19K蛋白可以在内质网上与MHC-I类分子的重链结合阻止其转运到细胞表面，并且可以延缓MHC-I的表达。RID（receptorinternalizationanddegradation）α&β以及14.7Kd蛋白可以抑制由TNF（肿瘤坏死因子）诱发的细胞凋亡，促进Fas（凋亡通道中的一种死亡受体）降解，下调TNF受体水平。第十六页，共二百七十页。④E4区基因表达产物E4区的基因产物通常被称为orf1~6/7，主要与病毒信使RNA的代谢有关，还有促进病毒DNA复制以及关闭宿主蛋白合成的功能。研究发现，一些E4产物可以诱导一些蛋白酶活性，降解宿主的某些DNA修饰酶，防止病毒DNA发生串联。E4orf3VARNA是一些由腺病毒转录的非翻(Fan)译RNA，为“诱捕”RNA分子，结合PKR（宿主蛋白激酶），使该蛋白失活，关闭干扰素的产生。第十七页，共二百七十页。

一般而言，DNA的复制是由RNA启动的，而在腺病毒却是所谓的蛋白启动。不存在冈崎片段，其DNA复制可(Ke)以从任何一端开始，甚至两端同时进行。第十八页，共二百七十页。复制过程中形(Xing)成ssDNA的中间形式。5’3’5’3’5’3’3’5’5’3’5’3’3’5’第十九页，共二百七十页。⑶装配与释放病毒基因组复制通常在感染后数小时开始表达。同时早期基因的转录和翻译被关闭，晚期基因开始表达。大部分的晚期基因的转录是以一个共同的主要晚期启动子（MLP,MajorLatePromoter）调控的。实际上MLP的活性与病毒基因组复制密切相关，有研究表明一旦腺病毒基因组开始复制，MLP的活性将明显增强。晚期基因主要编码腺病毒的结构蛋白。病毒结构蛋白在细胞核内聚集形成病毒衣壳，病毒的基因组被包装进去，形成有感染能力的病毒颗粒。

病毒水解细胞骨架蛋白K18，使之不能聚合形成中间丝结构，并最终裂解宿(Su)主细胞被释放出去，完成腺病毒的生活周期。第二十页，共二百七十页。三、对宿主的(De)防卫逃逸从病毒入侵到释放出新病毒需要2天，较慢，容易受到宿主免疫攻击。腺病毒1/4基因用于对付宿主免疫系统。1、防止细胞凋亡：E1B19K与细胞Bcl-2基因（抑制细胞凋亡）的表达产物同源，可以通过灭活和清除Bax家族成员来防止细胞发生凋亡或坏死。E1B55K基因产物可以下调p53基因（刺激细胞凋亡）的转录水平。2、加速病毒释放：E3基因的产物之一11.6Kd，由于可以在病毒感染的晚期裂解细胞并释放病毒颗粒而被称为腺病毒死亡蛋白（ADP，adenovirusdeathprotein）。第二十一页，共二百七十页。3、破坏干扰(Rao)素系统：没有囊膜，不刺激干扰(Rao)素产生；E4orf3VARNA是一些由腺病毒转录的非翻译RNA，为“诱捕”RNA分子，结合PKR（宿主蛋白激酶），使该蛋白失活，关闭干扰素的产生。（病毒利用DNA基因组的双链进行mRNA转录，会出现dsRNA）4、躲避杀伤性T细胞：E3-19K蛋白可以在内质网上与MHC-I类分子的重链结合阻止其转运到细胞表面，并且可以延缓MHC-I的表达。第二十二页，共二百七十页。5、躲避天然杀伤细胞：E3基因编码的RID蛋白结合腺病毒感染细胞的死亡受体（Fas），将其从细胞表面移走，并监督其被破坏。作为弥补，E3-14.7K蛋白可以干扰来自死亡受体的信号—以防RID蛋白出现遗漏。天然杀伤细胞和杀伤性T细胞都有两种方式杀伤细胞：⑴通过其表面的蛋白插入靶细胞表面的死亡受体，诱导细胞凋亡，杀死靶细胞；

⑵将颗(Ke)粒酶注入靶细胞（还没有任何病毒进化出对付颗(Ke)粒酶的方法）6、利用自己的DNA聚合酶，腺病毒可以产生抗原漂变。第二十三页，共二百七十页。四、致病性与免疫性

人腺病毒经呼吸道和粪口途径传播，也可通过呼吸道或污染物品传播。病毒在咽、结膜尤其是小肠上皮细胞内增殖，偶尔(Er)波及其他脏器，隐性感染常见。疾病一般为自限性，感染后可获得长期持续的型特异性免疫力，中和抗体损伤作用重要。第二十四页，共二百七十页。在病毒性疾病中，有些为自限性感染，即感染后病程较短，随体内病毒被迅速清除而痊(Quan)愈。如甲型肝炎、戊型肝炎、流行性感冒、流行性腮腺炎、病毒性胃肠炎等等。有些则为慢性感染，感染后病程长，病毒能在体内较长期存在，病情呈慢性进行性发展，如慢性乙型肝炎，艾滋病等。

病毒性疾病的病症与病毒的侵入途径密切相关；而与病毒有无包膜及病毒结构无明显关系。

由口咽途径侵入的病毒无论属RNA或DNA还是有无包膜，大多为自限性疾病；经体液和血液传播的人类病毒性疾病，易形成持续感染。即使同种病毒由于侵入途径不同，其病毒感染状态也不相同。第二十五页，共二百七十页。五、微生物学检查1、病毒分离自急性期病人咽、直肠、结膜等处采取标本，迅速接种敏感细胞，根据特征性细胞突变及抗原性鉴(Jian)定病毒。2、血清学检查取急性期和恢复期血清进行补体结合试验，抗体升高4倍或以上，可判断为近期感染。六、防治原则因存在许多健康带毒者，隔离病人对防止腺病毒传播几乎无效。疫苗要保证无致癌危险。因此，研制高纯度的亚单位疫苗是今后的主要任务。第二十六页，共二百七十页。第二(Er)节Ⅱ类病毒—细小病毒细小病毒科(Parvoviridae)是迄今所知道的最小的一类动物病毒，只发现其中少数病毒能导致有明显临床症状的传染病，而大多数呈潜伏或持续感染状态。该科含有两个亚科：细小病毒亚科（Parvovirinae）和浓病毒亚科（Densovirinae）。其中浓病毒亚科的寄主仅限于无脊椎动物。第二十七页，共二百七十页。一、生物学性状细小病毒粒子为立体对称的二十面体，有三种衣壳蛋白，无包膜，直径18-25nm。其线状ssDNA约占整个病毒粒子重量的25％～34％，分子量为1.4×106～1.7×106，沉淀系数为23～27s。细小病毒对外界理化因素的抵抗力非常强，在pH3和pH9、56℃处理60min仍保持稳定，却能被甲醛、羟胺和一些氧化剂(Ji)所钝化。细小病毒几乎都有凝集红细胞的特性，血凝和血凝抑制试验是鉴定本病毒和诊断本病的方法。第二十八页，共二百七十页。这类病毒的(De)核酸由于在病毒包装时包装了双链中的(De)一条，因此，不同病毒粒子中的(De)ssDNA极性可能不同。总的来说，自主型的病毒中，其核酸倾向于一种类型，即与mRNA互补的一类；而依赖型的病毒中，两种极性的核酸各占一定的比例。

第二十九页，共二百七十页。二、病毒的复制这类病毒的核酸分(Fen)子小，信息量极少，复制时不得不依赖于细胞或“辅助病毒”的帮助。据此可将细小病毒分(Fen)为两类：自主型（autonomous）缺陷型（defective）第三十页，共二百七十页。自主型：这类病毒只有当寄主细胞处于核酸合成期（S期）才能复(Fu)制，因为此时细胞内存在有许多细胞分裂所需的酶可被病毒利用，病毒本身仅仅提供一个模板核酸。这类病毒独立地侵入寄主细胞，不需要辅助病毒，仅凭寄主细胞的酶即可以复(Fu)制，故称之为自主型。第三十一页，共二百七十页。缺陷型：依赖性病毒属属于此类。这类病毒侵入寄主细胞后，即使寄主细胞处于S期也不能复制，因为它们缺少某种特异的酶，必须依靠另一种病毒，即辅助病毒（如腺病毒）来提供，因而(Er)成为缺陷型。第三十二页，共二百七十页。

现以小鼠细小病毒（Miceminutevirus,MMV）代表自主型，腺联病毒2型（Adeno-associatedvirustype2,AAV2）代表缺陷型分述其复制过程。1、基因组的结构特点MMV核酸为5084bp，AAV2核酸为4679bp，在所有细小病毒ssDNA的3’端或5’端都有多余100bp甚至300bp的核酸回文序列（palindromic），这些片段可以回折，与自身互补序列形成发夹结构。MMV的5’端和3’端序列差异较大，而AAV2的5’端和3’端序列相互反向重复，可形成锅柄样结构。MMV与AAV2都有两个较大的阅(Yue)读框（ORF），每个ORF约占基因组的一半。左侧ORF涉及调节功能，右侧ORF涉及编码结构蛋白。第三十三页，共二百七十页。2、病毒的复制MMV基因组都含有两个大的ORF:第一个从mp6-mp42（基因图谱位置，mapposition,mp），为repORF，编码两个非结构蛋白NS1和NS2。第二个从mp45-mp90，为capORF，编码外壳蛋白。MMV两个ORF各有一个启动子，分别位于mp4和mp38，均含有TATA盒。在末端mp95-mp96位置为聚腺苷酸信号（AATAAA）。mp46-mp48是小(Xiao)的内含子，mp8-mp38为大的内含子。第三十四页，共二百七十页。ITR20406080ITR

repcapNS14.8kbNS23.3kbcap3.0kbP4P38图8-7MMV基因组转录模式细线中的突出部分代表内含(Han)子第三十五页，共二百七十页。

由P4启动子驱动的两个转录体分别编码NS1和NS2，第三个转录体由P38启动编码外壳蛋白。其中NS1和NS2首先合成，它们调控其他基因的表达。这两种蛋白都是磷酸(Suan)化的，NS1作为反式激活蛋白可激活P4和P38，其功能基团位于C端的129为氨基酸残基。有效的DNA复制和mRNA翻译都需要NS2的参与。capORF编码外壳蛋白Vp1和Vp2，蛋白酶降解Vp2产生主要外壳蛋白Vp3。第三十六页，共二百七十页。

AAV2基因组也含有两个大的阅读框，有三个启动子，分别位于mp5、mp19和mp40。转录出3个转录体，进一步剪切，编码4种非结构蛋白和三种外壳蛋白。其中rep78和rep68为位点特异的核酸内切酶，参与病毒基因组的复制及病毒基因组插入寄主细胞基因组的过程。rep52和rep40并(Bing)非病毒基因组复制所必须，它们主要介导病毒颗粒的组装。第三十七页，共二百七十页。

图8-8AAV2基因组转录模式细线中的突出部分代表内(Nei)含子ITR20406080ITRrepcaprep78KD4.2kbrep68KD3.9kbcap3.6kbP5P40P19rep52KD3.3kbrep40KD2.3kb第三十八页，共二百七十页。

AAV2在寄主细胞内复制需要一些不相关的辅助病毒，如腺病毒、疱疹病毒等。以腺病毒为例，发现起辅助作用的腺病毒的早期功能蛋白。腺病毒蛋白E1A对AAV2基因表达起反式活化作用；35KDa的E4协同55KDa的E1B参与调控AAV2转录体的运输，E1B在AAV2DNA复制时也起重要作用；72KDa的E2A是ssDNA结合蛋白，可刺激AAV2启动(Dong)子的转录及转录本向细胞质转运。第三十九页，共二百七十页。

MMV和AAV2均在寄主细胞核内复制，并在细胞核内组装成病毒粒子。两者复制过程基本类似，DNA复制时均不需要RNA引物，也不环化，由于3’端形成的发夹结构，产生了对DNA多聚酶作用必须的引物—OH。由于病毒基因组是单链，复制过程中存在RF。AAV2复制过程如下：其3’端ITR形成发夹结构为DNA的复制提供(Gong)起始引物，复制沿着亲本链一直延伸到5’端，完全复制亲本链需要产生一个新的3’—OH，此时病毒编码的点位点特异的核酸内切酶Rep78和Rep68在箭头所示处，即末端分解位（terminalresolutionsite）切开亲本链，由此处继续延伸，合成复制中间体。此时亲本链的3’端为新合成的链，这样亲本链的ITR与开始不同，但互补。新合成的3’端又可以形成发夹结构引导新一轮的DNA复制，这样可以产生一个新的基因组DNA和一个没有复制完的含双链信息的DNA，再经过位点特异的核酸内切酶作用，可继续复制。第四十页，共二百七十页。

三、AAV的潜伏感染在没有辅助病毒共同侵染的条件下，AAVDNA可以整合到寄主细胞染色体中，建立潜伏感染，以后又可被辅助病毒的侵染所活化，进入复制循环。AAV的潜伏感染相当普遍，在20%的非洲绿猴肾和1%-2%的人胚胎细胞中可检测到。AAV2的ssDNA进入寄主细胞后，必须复制成双链形式才可以整合至染色体。这需要P5启动子启动少量的基因转录，产生rep78和rep68，它们一方面参与基因整合，另一方面也抑制了AAV2三个启动子的转录。尽管整合没有严格的特异性，但70%-100%的整合都发生在人染色体19q13.3-qter，且一般(Ban)是几个病毒基因组首尾相连。第四十一页，共二百七十页。第(Di)三节Ⅲ类病毒—呼肠孤病毒

呼肠孤病毒科，Reoviridae的命名，是由respiratoryentericorphanvirus各取其第一个字母而来。20世纪60年代初，曾从人和动物的呼吸道或肠道中分离出这类病毒，当时对它的致病作用不清楚，所以称它为呼吸道(R)、肠道(E)，孤儿(O)病毒，简称呼肠孤病毒。现在这一命名已失去其本来涵义，因为后来发现有些病毒虽与它有共同的基本特点，但与呼吸道或肠道无关。本科病毒分布极广，包括能感染人、脊椎动物、昆虫、植物、真菌的12个属。其中能使人、畜致病的主要成员有：轮状病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、羊蓝舌病病毒、非洲马瘟病病毒等。第四十二页，共二百七十页。

一、生物学性状本科病毒的病毒粒呈球形，大小在60～80nm之间，根据形态学分析它是一个二十面体的结构，有多层衣壳，如人轮状病毒有三层，都没有囊膜。氯化铯中浮力密度为1.31～1.38g/mL；具(Ju)有线性分节段的双链RNA基因组，可分为10条、11条和12条，因属而异。dsRNA的正链5’端有“帽子”结构，负链5’端为磷酸化结构，其3’均没有polyA结构。病毒中含有依赖于RNA的多聚酶。第四十三页，共二百七十页。

利用血清学方法，轮状病毒被分为7个不同的组A-G（Vp6），A、B、C三组常见于人和动物，引起婴幼儿腹泻的为A组，感染青壮年的为B组，散发病例为C组，其中B组仅在中国引起爆发流行。D、E、F、G目前仅见于动物。每组内又有不同的血清型，针对外壳蛋白Vp7已鉴定出至少14种Vp7血清型。在同一组中，可发生基因重配，不同组之间不可能发生。轮状病毒对理化因子的作用有较强的抵抗力。病毒经乙醚、氯仿、反复冻融、超声、37℃1小时(Shi)或室温（25℃）24小时等处理，仍具有感染性。该病毒耐酸、碱、在pH3.5～10.0之间都具有感染性。95%的乙醇是最有效的病毒灭活剂，56℃加热30分钟也可灭活病毒。第四十四页，共二百七十页。

1、病毒颗粒电镜下可见到三种类型的轮状病毒颗粒结构。第一类为有感染性，具三层衣壳的病毒颗粒，含衣壳蛋白Vp1、Vp2、Vp3、Vp4、Vp6和Vp7；第二类为没有外壳的双层颗粒，直径70nm，无感染性，表面粗糙，不含Vp4和Vp7；第三类仅有内壳，直径50-50.5nm，无感染性，含有Vp1、Vp2和Vp3。完整的病毒颗粒直径约75nm，具有辐条状结构和一个非常清晰的平滑周边，酷似车轮，轮状病毒因此而得名。

Vp7是三聚体，构成毒粒的外衣壳。Vp4是二聚体，形成长20nm、末端为叉状嘴唇形的突起，从中衣壳通过外衣壳的孔洞伸出粒子表面。Vp6三聚体构成中衣壳，又与构成内衣壳的Vp2相(Xiang)互作用。第四十五页，共二百七十页。

核心中含有11条dsRNA，按分子量从大到小进行排列，分别编码12种蛋白质，6种结构蛋白和6种非结构蛋白。去除蛋白质的dsRNA无侵染性，在5’端和3’端都有一段非翻译区，两端都有呼肠孤病毒科病毒特(Te)有的保守序列。第四十六页，共二百七十页。第四十七页，共二百七十页。2、病毒编码蛋白质的特性及(Ji)其功能基因片段蛋白产物分子量KDa颗粒中的位置修饰加工颗粒中的分子数功能1Vp1125内衣壳RNA聚合酶2Vp294-102内衣壳裂解120与RNA结合3Vp388内衣壳鸟苷转移酶4Vp4Vp5Vp8886028外衣壳Vp4裂解120（二聚体）血凝素、中和抗原、细胞附着、毒力、蛋白质分解可强化侵染性、强化穿入细胞5NSP1(NS53)53非结构蛋

白锌指结构、微碱性、结合RNA6Vp641中衣壳780（260壳粒）疏水性、三聚体、组抗原7NSP2(NS34)34非结构蛋白结合RNA、微酸8NSP3(NS35)35非结构蛋白碱性、与RNA结合9Vp738外衣壳有裂解信号序列、高甘露糖、糖基化780（260壳粒）三聚体、插入内质网膜、中和抗原、N端有两个疏水区10NSP4(NS28)28-29非结构蛋白无裂解信号序列、高甘露糖、糖基化插入内质网膜、N端有三个疏水区、病毒颗粒装配中起作用11NSP5(NS26)26非结构蛋白磷酸化O-连接糖基化微碱性、富含丝氨酸和苏氨酸、结合RNA第四十八页，共二百七十页。

Vp4--第四条dsRNA编码，组成外衣壳蛋白，非糖基化。其主要功能有：

①有凝集素活性；

②与寄主细胞受体结合；

③可(Ke)裂解为分子量分别为60KDa的Vp5和28KDa的Vp8，强化病毒的侵染力；

④可诱导体内中和抗体；

⑤在小鼠和小猪体内，Vp4是病毒毒力的决定簇。动物轮状病毒的Vp4有776个氨基酸组成，而人类的为775个。建立了依赖Vp4的病毒血清型（P血清型），其型特异性位点位于第84-180位氨基酸之间。第四十九页，共二百七十页。

Vp6—主要结构蛋白之一，组成中衣壳，占病毒颗粒的51%，由第六条dsRNA编码。可同时与外衣壳的Vp7、Vp4和内衣壳的Vp2相互作用(Yong)，因此，对维持颗粒形态起重要作用(Yong)。Vp6为三聚体，非常稳定，且大多数的轮状病毒株系的Vp6有保守的抗原决定簇，是检测的主要靶抗原。Vp6与病毒内依赖RNA的聚合酶活性相关，但本身并不具备酶活性，除去Vp6则聚合酶失活。Vp6为疏水蛋白，有高度的免疫原性，但并不知道它是否象Vp4那样可诱导体内的保护免疫反应。Vp6含有一个共同的（交叉反应性的）表位，称为组抗原（A-G），定位于第48-75位氨基酸之间。第五十页，共二百七十页。

Vp7—外衣壳的主要构成蛋白，占病毒颗粒的30%，富含N-连接甘露寡糖的糖蛋白，由第九条dsRNA编码。Vp7有326个氨基酸，N端有可裂解的信号序列。正是这个信号序列引(Yin)导Vp7插入细胞内质网膜。裂解点在N端第51位的Gln(谷氨酸)。插入内质网膜靠两个疏水序列，分别位于51-61和61-110的氨基酸。Vp7一旦插入内质网膜，既被保护不受内切酶降解，Vp7(glycoprotein)也是重要的中和作用抗原，并依此决定病毒的血清型（G1-G14血清型）。第五十一页，共二百七十页。

NSP4—成熟的、带寡糖的糖基(Ji)化的NSP4分子量为28KDa，N-连接甘露寡糖，第十条dsRNA编码。在N端有三个疏水功能域，可以穿过内质网膜，N端保留在膜内，而亲水的C端伸到细胞质中，是与亚病毒颗粒（Vp6）结合的受体，从而使亚病毒颗粒在装配过程中能通过芽生进入内质网膜，NSP4的受体结合位点在161-175位氨基酸之间。NSP4蛋白是一个十分保守的蛋白，比较不同来源轮状病毒毒株的NSP4，发现它们的同源性在87.3%-96.6%。第五十二页，共二百七十页。

二、病毒的复制有关轮状病毒复制的研究主要在猴肾传代细胞中进行，病毒的复制过程全部在包浆内进行。病毒通过与细胞表面特异的受体结合（可能存在两种不同的受体），再以胞饮或直接的方式进入细胞，在溶酶体内完成外衣壳(Ke)的降解，形成亚病毒颗粒，具有中层和内层，此时既开始转录。

第五十三页，共二百七十页。在细胞质液体中解开dsRNA很困难，而亚病毒颗粒内并非液体，dsRNA很容易(Yi)解开，转录的mRNA通过双层衣壳上的小孔进入细胞质。第五十四页，共二百七十页。

病毒转录子的合成(Cheng)是在一种病毒携带的依赖RNA的RNA多聚酶催化下进行，转录为非对称，所有的转录子都是从负链脱下的全长正链RNA。该正链RNA一方面作为蛋白翻译的模板，另一方面也是合成子代负链RNA的模板。负链RNA的合成也是在亚病毒颗粒中进行，细胞中没有游离的病毒dsRNA存在。这些亚病毒颗粒在细胞内或无细胞系统中均是双链RNA的合成产所，是由Vp1和Vp2、以及少量的Vp6、大量的非结构蛋白NSP3和较小量的NSP1和NSP2等蛋白质组成的复制酶的复合物。第五十五页，共二百七十页。第五十六页，共二百七十页。

大部(Bu)分的轮状病毒蛋白是在游离的核糖体上合成，而Vp7

和Vp4是在内质网上的核糖体合成，合成后嵌入内质网膜。轮状病毒形态发生过程中最显著的特征是在细胞浆病毒质中装配的亚病毒颗粒（含两层衣壳）向内质网膜芽生，在成熟过程中，病毒颗粒获得一过性的包膜。当病毒向内质网内部移动时，轮状病毒失去这种一过性获得的包膜，取而代之的是一层薄的蛋白层，这层蛋白层最后组装成病毒颗粒的外衣壳，含Vp7

和Vp4。第五十七页，共二百七十页。三、对宿主防卫的逃逸1、这种“躲在衣壳中复制”的方法帮组轮状病毒逃避宿主细胞的干扰素防疫系统，为病毒的繁殖和传播赢得时间。2、轮状病毒复制快，“打了就跑”，在获得性免疫系统发挥作用前，大量病毒已通过粪便排除。3、轮状病毒感染后(Hou)通常不会对后(Hou)续感染产生完全的免疫力，免疫系统仅仅对轮状病毒“扫了一眼”。即便有记忆力，轮状病毒可通过无症状患者粪便排除，扩大感染。第五十八页，共二百七十页。四、致病性与免(Mian)疫性人类轮状病毒感染常见于6个月～2岁的婴幼儿，主要在冬季流行，一般通过粪-口途径传播。病毒侵犯小肠细胞的绒毛，潜伏期2～4天。病毒在胞浆内增殖，受损细胞可脱落至肠腔而释放大量病毒，并随粪便排出。病人最主要的症状是腹泻，其原因可能是病毒增殖影响了细胞的搬运功能，妨碍钠和葡萄糖的吸收，也可以是刺激了小肠内的肠道神经系统受体。严重时可导致脱水和电解质平衡紊乱，如不及时治疗，可能危及生命。感染后血液中很快出现特异性lgM、lgG抗体，肠道局部出现分泌型lgA，可中和病毒，对同型病毒感染有作用。一般病例病程3～5天，可完全恢复。隐性感染产生特异性抗体。第五十九页，共二百七十页。

五、微生物学诊断传统的方法是(Shi)对腹泻粪便液直接作电镜或免疫电镜检查，但耗时较长，且由于设备上的限制，较难普遍应用。世界卫生组织已将ELISA双抗体夹心法（检测病毒抗）列为诊断轮状病毒感染的标准方法，目前国内外均有相应试剂盒出售。此外核酸电泳和核酸杂交已渐成常规技术，在诊断、鉴别诊断及分子流行病学研究中发挥重要作用。第六十页，共二百七十页。

六、防治原则重视饮用水卫生，并注意防止医源性传播，医院内应(Ying)严格做好婴儿病区及产房的婴儿室消毒工作。目前尚无特异有效治疗药物，主要是补液，维持机体电解质平衡。国外曾有报道轮状病毒活疫苗可使儿童获得保护，国内活疫苗正在研制之中。第六十一页，共二百七十页。第四节Ⅳ类病毒(Du)—冠状病毒

冠状病毒科（Coronaviridae）包括：冠状病毒属（Coronavirus）和环形病毒属（Torovirus）。冠状病毒属依据其基因组和抗原性的特点，分为三组：第1组和第2组为哺乳动物的病毒，第3组为鸟的病毒。冠状病毒科成员具有囊膜，大多数病毒的宿主范围较窄，只能感染一种或几种亲缘关系较近的动物细胞，冠状病毒的宿主范围与病毒特异的细胞受体有关。第六十二页，共二百七十页。

SARS（SevereAcuteRespiratorySyndrome，SARS）又称严重急性呼吸综合症，是一种新的威胁人类健康的呼吸系统烈性传染病，2002年11月在中国广东发现首例SARS病人，此后疫情蔓延30多个国家和地区，有8000多人感染，800多人死亡，引起全球关注(Zhu)。世界卫生组织(WHO)确认引起该病的是严重急性呼吸综合征冠状病毒(severeacuterespiratorysyndromecoronavirus，SARSCoV，SCoV)，冠状病毒属的一个新成员，是第一个可以引起人类严重疾病的冠状病毒。第六十三页，共二百七十页。一、生物学(Xue)性状

成熟的冠状病毒颗粒直径60-220nm不等，其形态学上最显著的特征是病毒被膜处有明显的棒状膜外粒子，酷似中世纪欧洲帝王的王冠。病毒粒子中不包含RNA聚合酶，但存在少量蛋白激酶，这种蛋白激酶究竟是由病毒还是宿主编码，目前尚不清楚。第六十四页，共二百七十页。

病毒有囊膜，膜上有三种结构糖蛋白：刺突蛋白S（spikeglycoprotein）；膜蛋白M（membraneglyprotein）；小分子外膜蛋白E（smallenvelopeglycoprotein）。在(Zai)部分病毒囊膜上还能找到血凝素酯酶HE（hemagglutininacetylesteraseglycoprotein）。

第六十五页，共二百七十页。

核酸为无节段（+）ssRNA，长约27～31kb，在所有的RNA病毒中，冠状病毒的基因组最大。为多顺反(Fan)子结构，其基因组5’端有帽子结构，3’端有poly(A)尾，可以作为翻译模板，具传染性。紧接帽子结构之后是60-80个碱基的先导RNA序列和200-500个碱基的非编码区。病毒基因组包含6-12个ORFs，在各个ORF之间有基因重叠区或基因间隔序列(intergenicsequence)。

冠状病毒的复制酶（依赖RNA的RNA聚合酶，解旋酶，蛋白酶）由基因组5’端的占2/3-3/4的两个大阅读框（ORF1a和1b）（即基因1）编码。通过核糖体翻译移框的机制，产生两个多肽前体：pp1ab和pp1a。其它结构蛋白主要位于基因组3’端。第六十六页，共二百七十页。

在所有冠状病毒基因组中，聚合酶基因和3种结构蛋白基因的(De)排列次序均相同，即5’-Pol-S-M-N-3’，其他非结构蛋白的排列次序依不同的冠状病毒种类而有明显的差异。第六十七页，共二百七十页。

冠状病毒转录的亚基因组mRNA间具有套式（nested）的结构特征和一段共同的3’端列。除最小的亚基因组mRNA外，其余mRNA均含有两部分内容，即自身基因和3’下游其它蛋白基因，但仅翻译自身蛋白基因。这些亚基因组mRNA的5’端均带有一段来自于基因组5’最前端的保守引导序列，该引导序列对病毒基因的表达有很强的顺式作用。在SARS-CoV中，每个基因之间均有一段转录调控序列（TRS）：5’-UCUAAAC-3’。通过该段序列与转录酶和细胞因子的相互作用，将(Jiang)一段72nt的基因组5’最前端的保守引导序列与每个ORF相连。第六十八页，共二百七十页。第六十九页，共二百七十页。

结构蛋白中，S蛋白为伸出被膜外的棒球形糖蛋白，在病毒表面以三聚体形式存在。其主(Zhu)要功能为：

①结合细胞受体；

②触发病毒被膜与细胞质膜或内吞体膜融合；

③可诱导细胞间的融合；

④诱发机体产生中和抗体。

第七十页，共二百七十页。M蛋(Dan)白主要负责病毒颗粒的组装，功能为：

①决定病毒的形态发生；

②病毒装配时选择S蛋白；

③结合N（核衣壳磷蛋白）蛋白；

④病毒装配时专一地选择病毒基因组RNA。第七十一页，共二百七十页。

E蛋白也是病毒表面的一种糖蛋白，数量相对较少，它与M蛋白相互作用，决定病毒粒子的出芽位点。

HE仅存在与少数冠状病毒表面，以二硫键连接的同源二聚体形式存在，可能与病毒引起的病理相关。

N蛋白（核衣壳磷蛋白）位于囊膜(Mo)内，与RNA结合形成核衣壳，其功能为：

①包裹基因组RNA形成螺旋对称的核衣壳；

②在装配过程中结合M蛋白；

③病毒mRNA翻译的增强子。第七十二页，共二百七十页。

三种非结构蛋(Dan)白为病毒复制所必需：1、依赖RNA的RNA聚合酶（RDRP）功能为：

①转录病毒负链基因组RNA；②转录结构蛋白mRNA；③复制病毒基因组RNA。2、解旋酶打开RNA的双螺旋。3、3CLpro蛋白酶负责上述两种酶的加工成熟。第七十三页，共二百七十页。

SARS冠状病毒基因组全长29.7kb，有14个开放阅读框架，缺乏HE蛋白。其基因组的2/3区域编码病毒复制相关酶(Mei)（5’端），1/3区域依次编码S蛋白、E蛋白、M蛋白和N蛋白等4个病毒结构蛋白（3’端），及包含5-9个在已有蛋白数据序列库中找不到任何同源序列的未知蛋白的ORF。第七十四页，共二百七十页。

SARS-CoV比其他冠状病毒更稳定。在室温下，可在粪便和尿液中稳定存在1-2天，在腹泻病人的大便中（pH较高）可存活4天以上。然而，56℃加热90min或75℃加热30min就能灭活SARS-CoV，应用含氯消毒剂和过氧乙酸，按卫生部推荐的浓度，在几分钟内完全(Quan)可以杀灭粪便和尿液中的SARS-CoV，紫外线也可以杀灭SARS-CoV。第七十五页，共二百七十页。二、病毒的复制

冠状病毒的整个复制周期在寄主细胞质中进行。①入侵：首先病毒表面的S蛋白与寄主细胞表面专一的受体结合，然后通过两种途径进入细胞，一种是受体介导的内吞(Tun)，另一种为病毒与寄主细胞的质膜融合。SARSCoV的受体有两种，ACE2蛋白与血管紧张肽转化酶（angiotensin-convertingenzyme，ACE）同源，为SARS冠状病毒的受体。氨基肽酶N(aminopeptidaseN,APN)也是SARSCoV的受体之一。第七十六页，共二百七十页。②冠状病毒成(Cheng)熟的颗粒中并不存在RNA病毒复制所必须的RNA聚合酶，因此，它进入寄主细胞以后，首先以病毒基因组RNA为模板，利用寄主细胞的蛋白质翻译系统，表达病毒RNA聚合酶。然后利用该酶，完成负链基因组RNA的转录合成、各级结构蛋白mRNA的合成、以及病毒基因组RNA的复制。

③冠状病毒各个结构蛋白的成熟mRNA的合成，不存在转录后的修饰剪切过程，而是直接通过RNA聚合酶和一些转录因子，以一种“不连续转录”（discontinuoustranscription）的机制，通过识别特定的转录调控序列（transcriptionregulatingsequences,TRS），有选择性的从负义链RNA上，一次性转录得到构成一个成熟mRNA的全部组成部分。第七十七页，共二百七十页。

④冠状(Zhuang)病毒的颗粒组装发生在内质网和高尔基体的区域。组装时，N蛋白包裹基因组RNA形成螺旋型的核衣壳，然后M蛋白通过与N蛋白的结合并识别基因组上的包装信号序列启动病毒囊膜的组装，E蛋白和S蛋白则通过与M蛋白的相互作用整合入病毒颗粒。在高尔基体内加工形成包内体样结构，以胞吐方式释放到细胞外，感染新的寄主。第七十八页，共二百七十页。

冠状病毒(Du)的复制和成熟第七十九页，共二百七十页。三、SARS-CoV致病性与免疫性

SARS-CoV可感染多个组织器官，包括：肺、脾、肠道、气管、淋巴结、肾等，特别是肺部，并造成损伤。引发肺部损伤机制为过强的自身免疫反应，大规模免疫细胞的激活，会破坏正常的细胞和组织。SARS患者出现发烧(Shao)、咳嗽及快速进展的呼吸系统衰竭，同时伴随寒颤、肌肉疼痛、淋巴细胞减少等症状，严重时，患者死亡。同时，患者体内产生SARS-CoV专一性的抗体，一般7天后出现IgM，10天达到高峰，15天左右下降；IgG在10天后产生，20天左右达到高峰。SARS-CoV的潜伏期平均为6.4天。SARS-CoV主要以近距离飞沫传播为主，同时可通过手接触呼吸道分泌物经口、鼻、眼传播。也可能存在粪—口传播等其它传播途径的可能性。该病毒对温度很敏感，在33℃时生长良好，但35℃就使之受到抑制。由于这个特性，冬季和早春是该病毒疾病的流行季节。第八十页，共二百七十页。四、微生物学诊断

目前SARS-CoV的诊断方法主要有4类：临床表现及排除性诊断、影像学诊断、血清学抗体诊断和病毒学诊断。ELISA诊断中，主要应用针对SARS-CoV结构蛋白的特异性多抗或单抗，特别是针对S蛋白的特异性抗体，在发病早期进行诊断。通过电镜观察和RT-PCR技术也(Ye)能对病毒进行鉴定。第八十一页，共二百七十页。五、防治原则病毒对热敏感，紫外线、来苏水及0.1%过氧乙酸等都可在短时间内将病毒杀死。目前，冠状病毒的血清型和抗原变异性还不明确。冠状病毒可以发生重复感染，表明其存在有多种血清型（至少有4种已知）并有抗原的变异，其免疫(Yi)较困难，目前尚无特异的预防和治疗药物。可以通过非特异性预防措施（即预防春季呼吸道传染疾病的措施，如保暖、洗手、通风、勿过度疲劳及勿接触病人，少去人多的公共场所，及时隔离病人等）进行预防。第八十二页，共二百七十页。

六、细胞培养及动物模型病毒分离是诊断病毒感染的重要方法。可以通过细胞培养对来自SARS病例样(Yang)本(如呼吸道分泌物、血液或粪便)中的病毒进行分离。与其它冠状病毒相比，SARS-CoV的分离相对容易。目前发现，SARS-CoV可在非洲绿猴肾传代细胞(VeroE6)、人宫颈癌传代细胞(Hela)、狗肾传代细胞(MDCK)、肿瘤横纹肌传代细胞(RD)、人胚肺传代细胞(2BS)、人胚肾传代细胞(HEK293)等多种组织细胞中增殖并引起细胞病变，但以VeroE6细胞最为敏感。细胞培养阳性结果是人体内存在SARS-CoV的可靠证据，说明患者现在或最近受到SARS-CoV的感染。第八十三页，共二百七十页。

目前SARS的研究主要集中在致病机制、抗SARS疫苗和药物的制备方面，这些研究的基础有赖于SARS动物模型的发展，SARS动物模型应该符合以下标准：被SARS-CoV感染的动物表现出类似SARS患者的症状和体征;从实验感染的动物体内可分离到病毒；动物体内存在针对病毒感染的特(Te)异的免疫反应；活检和尸检显示出动物具有SARS患者一样的病理特征。至今，SARS动物模型包括非人灵长类、雪貂、猫、鼠等，然而这些动物很少能够模拟出可靠的SARS患者的呼吸症状。他们大多数只符合上述一部分条件。第八十四页，共二百七十页。七、SARS-CoV的疫苗(Miao)研制1、正在研制的疫苗：⑴治疗性疫苗（抗体）⑵灭活病毒疫苗⑶病毒样颗粒（VLP）疫苗⑷核酸疫苗（基于S蛋白和N蛋白）⑸多表位疫苗2、存在问题：⑴RNA病毒多变对疫苗研发的挑战⑵动物模型问题第八十五页，共二百七十页。⑶抗体依赖性感染增强（antibody-dependentenhancement,ADE）的问题一般来说，机体产生的病毒抗体或者对病毒有中和或抵抗作用，或者是一些无中和作用的抗体，但近年来相继在人免疫缺陷病毒（HIV）、流感病毒（IV）、猫感染性腹膜炎病毒（FIPV）、登革病毒（DV）等病毒中发现了(Liao)一种现象，这些病毒的抗体滴度在低水平或高水平时对病毒存在中和作用，而在中度水平或亚中和滴度水平时（称为感染增强抗体）与病毒形成病毒-抗体复合物，能明显增强Fc受体（FcR）或补体受体（CR）阳性细胞对该种病毒感染，从而引起疾病，这种现象称为抗体依赖的病毒感染增强作用（ADE）。其中猫感染性腹膜炎病毒（FIPV）为猫冠状病毒，推测SARS-CoV疫苗可能存在ADE现象，所以在未阐明SARS致病机制特别是SARS-CoV是否存在ADE作用的情况下，研究者应重视ADE现象。第八十六页，共二百七十页。八、SARS-CoV的来源

1、SARS-CoV的进(Jin)化地位第八十七页，共二百七十页。可以看出，SARS病毒明显不同于同其他(Ta)三个冠状病毒群，可能归属于新的冠状病毒群。和其他(Ta)人类及动物冠状病毒相比，核酸序列相似性分数是，氨基酸序列的相似性分数是。但是，根据最新的国际病毒分类委员会（ICTV）第8次报告，SARS病毒仍归属于以牛冠状病毒为代表的第二组。第八十八页，共二百七十页。

2、SARS-CoV的自然宿主

SARS病原是一个新型冠状病毒，即SARS冠状病毒(SARS-CoV)，来源于野生动物，经进化和变异实现跨种传播，导致人类SARS的暴发和流行。因此，是一新型人兽共患病毒。是继亨德拉病毒、尼帕病毒之后(Hou)十年内人类出现的第三种以前从未认识的全新病毒。1994年，澳大利亚的赛马发生亨德拉病毒感染，推测是由于马采食了带毒蝙蝠污染的牧草或是采食了蝙蝠吃剩的果实而感染发病。1998年马来西亚爆发尼帕病毒，也估计是由于猪吃食了带毒蝙蝠污染的果实，并通过猪传染给人类。第八十九页，共二百七十页。

多个研究小组分别从基因检测、血清学和核酸序列的系统进化分析等不同方(Fang)面证实不同地域、不同的蝙蝠群落广泛携带有SARS样冠状病毒。证实人源、果子狸源和蝙蝠源SARS-CoV共同属于SARS族冠状病毒，虽然尚未从蝙蝠分离获得病毒并进行感染实验证明其致病性，但是现有研究均表明蝙蝠极有可能是SARS冠状病毒的自然宿主。第九十页，共二百七十页。

3、关于SARS-CoV传播的中间宿主SARS起源的“市场传播来源”假设，推测果子狸可能是在市场或运输过程中从真正的自然感染宿主、带毒动物或污染的环境感染了SARS-CoV，SARS-CoV在果子狸体内繁殖放大后散播到(Dao)外界环境或在与人密切接触时将足够量的病毒传播到(Dao)人，引起人的发病。果子狸在SARS-CoV的传播中扮演了中间放大宿主的重要角色。第九十一页，共二百七十页。

4、SARS-CoV实现动物到人跨种传播的分子进化基础SARS病毒S蛋白与宿主细胞的功能受体ACE2(An-giotensin-convertingenzyme2)结合、进而与细胞膜融合进入细胞实现对宿主细胞的感染。分子进化分析显示SARS-CoV从果子狸到人的传播过程中，S基因始终经历着强阳性选择，并不断提高对新宿主的适应能力。因此SARS病毒S蛋白发生进化和变异以适应新的宿主细胞是实现其跨种传播以及人与人之(Zhi)间传播的首要物质基础。第九十二页，共二百七十页。迄今为止，虽然已证实蝙蝠是SARS-CoV的自然宿(Su)主和果子狸在SARS传播中的中间宿主作用，但仍未发现蝙蝠传播SARS-CoV的直接证据。SARS-CoV由蝙蝠到果子狸是直接传播还是间接传播，还需要进行动物实验研究。另外，在SARS-CoV的起源和发生过程中是否存在果子狸以外的其它中间宿主动物尚待进一步研究。第九十三页，共二百七十页。九、非典后遗症(Zheng)与国家赔偿

据卫生部公布的数据，中国共有5327人被感染上非典病毒。2003年，中央财政支出了13亿多元的SARS防治基金，各地累计投人100亿元。非典给中国造成了一次重大损失。其中有一个后果是，不少人虽然经过治疗，但是出现了后遗症。早在2003年10月，广州、北京等地非典治愈者就发现患有非典后遗症，典型的表现在生理上表现为股骨头坏死，也有踝、膝等关节坏死。2005年5月，北京、香港SARS康复者陆续出现骨坏死后遗症。第九十四页，共二百七十页。

2004年《南方周末》刊登了《关注:SARS六护士的苦难生存现状》，其中提到了张丽娟、李敏、宋冰、张春阳、于立萍、刘波这六位长春医护人员因后遗症生存的心里和生理痛苦。对此，有些病人，尤其是为了治疗SARS而得病甚至死亡的医护人员提出了通过“国家赔偿”加以弥补的措施。比如我国台湾地区就有一例：

2003年间SARS肆虐，台湾和平医院医师林重威为救治病患，感染SARS不治，他的父母诉请“国家赔偿”。台“最高法(Fa)院”18日判决台北市立联合医院应负赔偿责任，应给付林重威的父母共748万1621元(新台币，150万人民币)，并自2003年12月21日起至清偿之日止，按年息5%计算迟延利息认定。本案是因SARS死亡获“国赔”的首宗案例。”第九十五页，共二百七十页。第九十六页，共二百七十页。

中国工程院院士钟南山是第一个提出在抢救SARS病人时采用皮质激素治疗的权威专家，此治疗方案成功救治了很多SARS病人。他们对38例使用皮质激素的SARS病人进行了回顾性调查，发现有效的比例达53%。而这38例如果当时不采用激素疗法会全部死亡。其(Qi)实目前学术界对到底是大剂量使用皮质激素造成骨坏死，还是SARS病毒造成骨坏死目前尚存在争论。所以医师使用激素造成骨坏死并没有确定的依据，在这一点上，医生不存在任何诊疗责任。第九十七页，共二百七十页。

皮质激素虽然具有肯定的解热(Re)镇痛疗效，但它又有过多的严重不良反应：类皮质功能亢进；类固醇性糖尿病；肌萎缩和骨质疏松；诱发和加重感染；诱发和加重溃疡；诱发精神症状；并发眼病；致畸胎；不恰当地停药还可能出现皮质功能不足、激素停药综合证和症状反跳等弊病。第九十八页，共二百七十页。

对于一般患者进行激素疗法，造成后遗症，患者是无从根据提出任何赔偿的，包括民事赔偿。对于误诊病人？？？？对于受医院指派而去救助SARS病人自己也被感染上而产生后遗症的。那么可对其进行的措施有:

如果操作规程正确，那么属于劳(Lao)动工伤事故。看《工伤保险条例》中有关工伤的认定，可知到这属于工伤，依照法律可享受医院工伤保险。第九十九页，共二百七十页。如果操作规程不正确，那么依照劳动法:

第七十三条劳动者在下列情形下，依法享受社会保险待遇：退休；患病、负伤；因工伤残或者患职业病；失业；生育。劳动者死亡后，其遗属依法享受遗属津贴。劳动者享受社会保险待遇的条件和标准由法律、法规规定。劳动者享受的社会保险金必须按时足额支付。第五十六条劳动者在劳动过程中必须严格遵守安全操作规程。劳动者对用人单位管理人员违章指挥、强令冒险作业，有权拒绝执行；对危害生命安全和身体健康的行为，有权提出批评、检举和控告。所(Suo)以工伤赔偿主要是工伤保险赔偿。如果单位存在侵权行为，那么还可以用民事侵权法来处理。第一百页，共二百七十页。

《北京市关于非典出院人员社区健康管理工作实施方案》

本市从2004年6月开始至2008年，用5年时间了解全市非典出院人员生存质量、社会功能(Neng)和心理问题，初步掌握他们的社区卫生服务需求，为他们提供连续性、个体化的医疗服务。具体工作将分两个阶段实施：第一阶段，2004年6－7月，先行在西城区、海淀区开展试点；第二阶段从2004年7月－2008年6月，在全市实施非典出院人员社区健康管理。今后每年6－7月，为全市非典出院人员进行社区健康状况调查。

第一百零一页，共二百七十页。感染原因：抢救华北第一例输入性非典患者时感染，已是74岁高龄的他，是中国抗(Kang)非第一线年龄最大的医生；而后冒着生命危险用自己的身体进行血清治疗SARS试验，成功康复。现状：无任何后遗症。现已退休在家。第一百零二页，共二百七十页。

血清试验成功，引起了海内外的关注。许多医学专家都认为这是目前人类抗击“非典”过程中的一个(Ge)有效方法。可是，让姜素椿遗憾的是，血清疗法并没有在国内推广，“后来卫生部开会，我第一个(Ge)发言，毫不客气‘怕什么呢？不就是输血吗？外科手术要不要输血？艾滋病什么的可以查呀！’”最后得到多数与会讨论专家的认可。不久，香港开始了这种治疗试验。2003年5月7日，香港媒体披露，香港中文大学医学院推出血清疗法，40例两组对照，经过一个月临床实践，输入血清的20例不仅实现了零死亡，病程还缩短一半。第一百零三页，共二百七十页。第五节Ⅴ类病毒—流(Liu)感病毒

流感病毒(influenzavirus)属正黏病毒科(Orthomyxoviridae)，该科分为甲型流感病毒属（InfluenzavirusA）、乙型流感病毒属（InfluenzavirusB）、丙型流感病毒属（InfluenzavirusC）、托高土病毒属（Thogotovirus）和鲑传贫病毒属（Isavirus）等。正黏病毒科和副黏病毒科的病毒有许多相似的特征：均含有神经氨酸酶(NA)和血凝素（HA），可凝集某些动物的红细胞，对消化道、呼吸道系统具有致病性等，对黏多糖和糖蛋白具有特殊的亲和力，尤其是对细胞表面含唾液酸的受体有更强的亲和力。第一百零四页，共二百七十页。

按照病毒核蛋白(nucleocapsideprotein，NP)和基质蛋白(matrixprotein，M)的特征，流感病毒分为甲(A)、乙(B)和丙(C)型。1933年，Smith等人用雪貂分离出甲型流感病毒，确定(Ding)了流感的病毒病因。随后，Frances等人于1940年分离出乙型流感病毒。丙型流感病毒于1949年分离成功。

根据病毒颗粒表面血凝素(hemagglutinin，HA)和神经氨酸酶(neuraminidase，NA)蛋白抗原性的差别，甲型流感病毒又可进一步分为不同的亚型。迄今所发现甲型流感病毒有

15个

HA亚型(H1～H15)，9个

NA亚型(N1～N9)，乙、丙型未见亚型。第一百零五页，共二百七十页。

世界卫生组织(WHO)1980年规定的流感病毒命名规则为：型别／宿主名称／分离地区／编号／分离年份(HA和NA亚型)，若宿主是人则可省略。

如

A／Beijing／353／89(H3NZ)，即甲型流感病毒，宿主是人，从北京(Jing)分离，分离时间是1989年，编号

353，为

H3N2亚型。

又如A／Duck／Pennsylvania／10218／84(H5N2)，即甲型流感病毒，宿主是鸭，从美国宾西法尼亚州分离，分离时间是1984年，毒株编号为10218，H5N2亚型。第一百零六页，共二百七十页。一、病毒的生物学特性

流感病毒为有囊膜、分节段的-ssRNA病毒，属正黏病毒科。分甲型流感病毒属（8段）、乙型流感病毒属（8段）和丙型流感病毒属（7段，缺少编码神经氨酸酶的第6条链）。其中甲型流感病毒感染人(Ren)、禽、马、猪、海豹、鲸等；乙型流感病毒仅感染人(Ren)；丙型流感病毒感染人(Ren)与猪。以甲型的流行规模最大，乙型次之，丙型极少引起流行。第一百零七页，共二百七十页。

流感病毒粒子为(Wei)球形、椭圆形或丝状。由鸡胚或细胞传代的病毒多为(Wei)球形，直径为(Wei)80-120nm，从人或动物新分离的病毒形态变异较大，可见80-120nm直径的丝状形态。第一百零八页，共二百七十页。流感病毒的电镜照(Zhao)片第一百零九页，共二百七十页。RNA片段无5’帽子结构(Gou)和3’聚A尾结构，但均有一段保守序列。5’端有13个核苷酸各节段高度保守：-GGAACAAAGAUGAppp5’3’端有12个核苷酸各节段高度保守：3’HO-CCGUUUUCGUCC-这些序列具有启动子活性。就A型流感病毒而言，8段vRNA共编码10种病毒蛋白，即PA、PB1、PB2、NP、HA、NA、M1、M2、NS1、NS2。第一百一十页，共二百七十页。12435678PB2PB1RNPRNAM2M1NAHA分(Fen)节段的（-）SSRNAPA

RNA多聚酶核糖核蛋白（RNP）第一百一十一页，共二百七十页。病毒囊膜来自宿主细胞的双层类脂膜，膜上镶嵌着3种膜蛋白，分别为HA、NA和(He)M1蛋白。丙型流感病毒只有HA和NA两种膜蛋白。另外，A型流感病毒囊膜中还有少量离子通道蛋白，即M2。

第一百一十二页，共二百七十页。

内部的核衣壳(Ke)呈螺旋丝状，直径大约为

10nm，长度在

50～60nm之间。核衣壳是由

NP和

RNA聚合酶复合体(PB1、PB2及

PA)与病毒的

8个

RNA片段结合而成。由于带有自己的RNA聚合酶复合体，流感病毒可以有效地感染不增值的人类细胞。NP基因与NP蛋白：NP是核衣壳的主要蛋白，富含精氨酸，为磷酸化蛋白。NP可与vRNA和cRNA结合，但不与mRNA结合。为型特异性性抗原，可区分A、B、C三型流感病毒。NP也是寄主针对所有流感病毒亚型产生细胞毒性T淋巴细胞的主要靶标。第一百一十三页，共二百七十页。

HA基因和