W5601微生物的无菌操作技术2微

微生物学及操作技术微生物的无菌操作技术123目录页CONTENTSPAGE无菌操作技术的概念无菌工作环境的准备无菌操作的技术要点1过渡页TRANSITIONPAGE无菌操作技术的概念1.无菌操作概念2.无菌操作目的无菌操作技术无菌操作技术：指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。2.实验原理2.无菌操作目的1.无菌操作概念无菌操作技术无菌操作目的2.实验原理2.无菌操作目的1.无菌操作概念一方面保证待测物品不被周围环境微生物污染另一方面防止微生物在操作中污染环境或感染操作人员2无菌环境的要求和保持进入无菌室前的准备无菌操作的要求无菌2.实验原理2.进入无菌室前的准备1.无菌环境的要求与保持3.无菌操作的要求无菌的环境的要求与保持

无菌环境无菌室超净工作台无菌操作技术实验步骤1.无菌环境的要求与保持2.进入无菌室前的准备3.无菌操作的要求（1）无菌室的消毒和防污染*无菌室内空气测试应基本达到无菌。*每日（使用前）紫外线照射（1~2小时）.*每周用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸（2小时）.*每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒。*定期作实验室沉降菌计数，以检查无菌室微生物生长繁殖动态。无菌操作技术2.实验原理1.无菌环境的要求与保持2.进入无菌室前的准备3.无菌操作的要求1、无菌室无菌室的结构：应有更衣间、缓冲间、操作间应有良好的通风条件，安装空调设备及过滤设备无菌操作技术2.实验原理1.无菌环境的要求与保持2.进入无菌室前的准备3.无菌操作的要求（2）无菌室的消毒和防污染*无菌室内空气测试应基本达到无菌。*每日（使用前）紫外线照射（1~2小时）.*每周用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸（2小时）.*每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒。*定期作实验室沉降菌计数，以检查无菌室微生物生长繁殖动态。无菌操作技术2.实验原理1.无菌环境的要求与保持2.进入无菌室前的准备3.无菌操作的要求2、超净台

超净工作台是为实验室工作提供无菌操作环境的设施，以保护实验免受外部环境的影响，同时为外部环境提供某些程度的保护以防污染并保护操作者。原理：超净工作台的洁净环境是在特定的空间内，洁净空气(进滤空气)按设定的方向流动而形成的。以气流方向来分，现有的超净工作台可分为垂直式，由内向外式以及侧向式。无菌操作技术2.实验原理1.无菌环境的要求与保持2.进入无菌室前的准备3.无菌操作的要求无菌操作技术2.实验原理1.无菌环境的要求与保持2.进入无菌室前的准备3.无菌操作的要求超净台使用风速保持在0.32-0.48米/秒使用前打开紫外灯照射40~60min开启超净工作台工作电源，关闭紫外灯，并用75%的酒精或0.5%过氧乙酸喷洒擦拭消毒工作台面。使用中，有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉球擦拭，请用含水棉布擦拭；请保持超净台整洁、干燥，不要堆积杂物；使用完毕，关闭煤气开关或酒精灯；使用完毕后，用消毒液擦拭工作台面，关闭工作电源，重新开启紫外灯照射15min.定期做无菌试验，以测定净化台是否符合无菌要求。无菌操作技术2.实验原理1.无菌环境的要求与保持2.进入无菌室前的准备3.无菌操作的要求生物安全柜生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人，实验室环境以及实验室材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物设计的。无菌操作技术2.实验原理1.无菌环境的要求与保持2.进入无菌室前的准备3.无菌操作的要求3、无菌器材准备灭菌器材：玻璃器皿、培养基、无菌衣等.消毒器材：接种试管、无菌室内的凳子、试管架、天平、工作台等无菌操作技术2.实验原理1.无菌环境的要求与保持2.进入无菌室前的准备3.无菌操作的要求进入无菌室前的准备（1）定期检查无菌环境的空气是否符合规定；（2）用紫外线灭菌处理30~60min；（3）检查无菌器材是否完备；（4）实验人员进入无菌室前先用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球将手擦干净。（5）缓冲室内换上洗净并经紫外线灯照射过的工作衣、帽、鞋。无菌操作技术2.实验原理1.无菌环境的要求与保持2.进入无菌室前的准备3.无菌操作的要求3.无菌操作的要求（1）在操作中不应有大幅度或快速的动作；（2）使用玻璃器皿应轻取轻放。（3）在火焰上方操作；（4）接种用具在使用前、后都必须灼烧灭菌；（5）在接种培养物时，协作应轻、准。（6）不能用嘴直接吸吹吸管。（7）带有菌液的吸管、玻片等器材应及时置于盛有5%来苏尔溶液的消毒内消毒。无菌操作技术无菌操作的注意事项1.开包后的无菌包和开封后的无菌溶液有效期均为24小时，无菌盘有效期限不超过4小时。2.无菌持物钳取时不可触及容器口边缘及溶液以上的容器内壁。使用时应保持钳端向下，不可倒转向上，用后立即放入容器中。如到远处夹取物品时，无菌持物钳应连同容器一并搬移，就地取出使用。3.使用无菌瓶内的溶液时，不可将无菌敷料堵塞瓶口倾倒无菌溶液，或直接伸入溶液瓶