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文档简介
生物梅里埃工業部生物梅里埃解決方案
测试种类
显色培养基/BACTOMETER
(i)食品定量(细菌总数、大肠菌群、真菌计数)
VIDAS免疫分析仪(ii)定性/筛选(沙门氏菌、李斯特菌、弯曲菌)API/ATBVITEK(iii)病源菌生化鉴定(手工、自动、全自动)
食物致病菌的快速检测前增菌打碎分离及拓增目标微生物选择性增菌後增菌食品+緩沖液快速检测分离平板初步鉴定血清学试验快速鉴定生化鉴定鉴定所遇的困难- 分类学复杂及进化- 涉及很多生化项目- 工业微生物容易出现变异- 结果处理及计算麻烦质控检验需要- 广范的鉴定范围- 可靠的结果- 容易操作- 快速报告- 可负担的成本API系统- 构成: 试条由特別选择的生化反应小管
API试条有多種类 各有相应的数据库 所有生化结果以同时间一并阅读API系统 试条由10,20,50..…测试组成不等 结果:鉴定百分率 基本单位:条目(Taxa)
-种 (PseudomonasAeruginosa)
-生物型号 (E.Coli1)
-属 (SalmonellaSpp.)
-一群菌种 (Aeromonashydrophilia/cavicie)
所引用的分类学跟国际认可的一样
-InternationalJournalofSystematicBacteriology
资料库=整个系统的心脏生化鉴定可靠及具创意的选择系统组成:容易使用生化鉴定生化鉴定容易使用ID32鉴定试条(数码鉴定法)++--++---24124124…. 3 6 0
将每3个生化反应分成一组,每组中阳性结果分别标记为1、2、4将每组数值相加,得到一个10位数的编码API结果原理:- 生化结果组合跟资料库內的典型条目(Taxa)作出比较- 经计算後,鉴定百比率(%Id)=机会率,指示出不同菌类的比较T值(Tindex)=指示出在同一个菌类的相似程度鉴定百分率%ID细菌鉴定的可能性:与数据库中各个项的接近程度来确认未知菌是否属于某一个分类单位(科,属,种)?鉴定百分率:ID%图示XC0.1%A0.1%B99.8%
待检菌X典型性参数Tindex
待检菌的分类单位被确定以后,T值表示其生化反应结果与该菌最典型生化谱的接近程度生化鉴定可靠及具创意的选择最典型生化普菌种XT值资料库生化结果(菌种X)(菌種X)根据待检细菌各种不同生化反应的结果计算出其鉴定百分率。从而找出待检菌在整个数据库中应属于哪个分类单位。待检菌的分类单位被确定以后,根据T值来评定其与该分类单位中典型菌株的相似性。从而可以确定待检菌在“种”中的典型程度。ATB鉴定百分率:ID%与T值图示结果评价
结果判读每一个鉴定结果都会附有相应的评语-鉴定结果的%ID值和T参数-鉴定结果的可信性
极好的鉴定%id>99.9T>0.75非常好的鉴定%id>99T>0.5好的鉴定%id>90T>0.25可接受的结果%id>80T>0不可接受的结果%id<80
API资料库,不断更新,跟据-分类学的进化-新的菌种-生化反应的演进-鉴定菌种需要的改变API系列是細菌鑒定的参考標准中国用户上千家具国际参考标准的试剂API每2.5秒世界上便用一條API試劑鑒定只需要16种簡單的試劑有關API的文章現有1500篇(600篇有关API20E)細菌學API鉴定范围 庞大资料库15种试条>550种细菌可被鉴定研究用试条:乳酸杆菌,芽胞菌,弯曲菌 简单方便以同一基础概念运用标准化方法 快速结果4-24小时 降低成本成品化,单一化试剂简单判读结果
半自动系统(APILABPLUS)- 由APILABPLUS软件代替20本不同的API编码手冊- 鉴定结果存於电脑內,无需自行记录- 不断免费更新,无需购买最新版本的编码手冊- 由於电脑储存存量大,一些可能性很低的结果也能在软件中提示微生物鉴定完整的鉴定谱球菌杆菌接触
接触革兰氏革兰氏氧化革兰氏革兰氏杆菌球菌API資料庫,不斷更新,跟據-分類學的進化-新的菌種-生化反應的演進-鑒定菌種需要的改變優點:- 標準化,簡易化- 在制造過程中,進行質控- FDA標準- 用家可用ATCC菌種進行質控- 系統化- 操作簡易- 快速報告- 20年經驗,擁有菌種資料>25000,鑒定系統的發源生化測試>750革兰氏阴性弯曲菌例子弯曲菌的生化确认革兰氏阴性海鸥型氧化酶阳性接触酶阳性弯曲菌属检测
10µl25g样本
+225mlPreston肉汤+马血Campylobacterbloodfreeagar孵育24小时,37°C,微需氧环境
APIcampystrip(6McF)孵育24-48小时,42°C,微需氧环境血平板孵育24-48小时,42°C,微需氧环境孵育24-48小时,42°C,微需氧环境D2D4D6D7结果D0传统方法弯曲菌属
空肠弯曲菌孵育48小时,42°C,CAMPYLOSEL平板Ref.43361VIDASCAMPYLOBACTER
前培养肉汤24hr-48hr,42°c阴性结果无弯曲菌属rVIDASCAM结果70分钟阳性结果确认结果D0D2APIcampy(6McF)
APIcampy:鉴定弯曲菌的参考方法
第一节酶反应apocarps
URENITESTHIPGGTTTCPyrAArgAPAL
1个酶反应
à酯酶检测
=EST4个酶反应à胺基酶检测
=GGT,PyrA,ArgA,AspA1个酶反应
à磷酶检测
=PAL4个生化反应à
URE,NIT,TTC,HIPAPIcampy:鉴定弯曲菌的参考方法第二节同化及抑制试验6个同化反应
à
GLU,SUT,ACE,PROP,MLT,CIT3个抗生素
à
NAL,CFZ,ERO
1个生化反应
à
H2SH2SGLUSUTNALCFZACEPROPMLTCIT18条目李斯特菌的生化确认VIDASLMO2:单核细胞增生李斯特氏菌
(*Alltypeoffood,exceptenvironmentalsamples)70mins出结果25g样本
+225ml半
Fraser肉汤24-26h,30°C1°C1mlFraser肉汤
24-26h,30°C1°C检测
确认半Fraser肉汤
orFraser肉汤APIListeriaPALCAM平板OXFORD平板24ha,37°C1°C分离可疑菌落TSA羊血平板VIDAS李斯特阳性样本确认鉴定:CAMP试验李斯特菌
CAMP-试验培养
18小时
37oC单核细胞增生李斯特氏菌
无害李斯特菌
绵羊李斯特菌金葡马红利用专利(DIM)方法鉴定包括单增李斯特菌等6个条目的李斯特菌
不用进行CAMP试验
APIListeria由国际参考试验室使用并
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