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文档简介
进程,诱导其细胞、分化,最终由单个花花药培养属于培养,花粉培养属于细胞培
Microsporecultureof花药和花粉发育过花药和花粉培养的发花药和花粉培养的意花药培花粉培单倍体植株加花药和花粉发育过花药和花粉培养的发花药和花粉培养的意花药培花粉培单倍体植株加花的结构花药横药绒毡花药的发育过Sanders,PaulM ntReprod1999,11(6):297-花粉的发育过 ntCell,Vol.4,879-887,BCDE 成熟花粉的形(a)玉米(b蒜(c舌草(d荆(ef)花药和花粉发育过花药和花粉培养的发花药和花粉培养的意花药培花粉培单倍体植株加花药和花粉培养简1921年Bergner等发现曼陀罗能够产生自然单倍体1964年,Guh和Maheshwari通过曼陀罗花药培养得到胚状t)1972年,Sharp等用看护培养从番茄花粉诱导单倍体植株 八十年代统计:科、属 种,花药培养成 InvitroProductionofEmbryosfromAnthersofDatura,1964烟草花药再生出单倍体植株(不结实 ntsfromPollenGrains,19691970年, 遗传所得到了水稻花药培养产生的1971年, 遗传所得到了小麦花药培养产生的1974年, 植物所等单位世界上第一个用作物:有30多种开展了培养试验,有20多种园艺植物:大白菜、青菜、甘蓝、茄子、番茄、葡萄、苹果、柑桔等等得到了单倍体花药和花粉发育过花药和花粉培养的发花药和花粉培养的意花药培花粉培单倍体植株加 优点:花粉数量多、体积小、形态比较一致、(二)单倍体育可以获得纯合的双单倍与杂交育种比较可缩短世代,提高选择与诱变育种相结合,可以加速育种过二倍体供体植 型为AaBb,若要从后代选 为从bb的纯合单 、rr='
花
单倍 aB--,--- ,->,aaB'B>常规方法 1
花药和花粉发育过花药和花粉培养的发花药和花粉培养的意花药培花粉培单倍体植株加选幼年树花 取下花取花药镜 接种培 再 1010%NaClO溶
无菌水洗3接花 滤纸吸镊子剥开取花 去掉花接种培养基(20-30个花药/10ml试管3.培恒光光照强11-16小时
胚状体从花药分化
花药诱导出的胚状体继代胚状体诱
诱导影响花药培养效果的因型:植物材料的植物材料的遗传类型,影响花药的培养。同一种内不同品种,不同来源的材料、花Table1.Ge11otypic o,nthe frequency ofe1nbryogenesisinmicrosporeculturesofsixct1ltivarsofB.juncea Mean110.ofembryos/100buds(土Bio, .77VarunaRajatPusaBoldRH-30PR-45
29005土3l35156363366土8626293055}.54ab2112548012bntCeltTissueandOrganCulture(2005)83:169-花粉发育时Thisoccursbecausemicrosporeswouldonlyrespondtoembryoformationatadevelopmentalstagewhentheyarenotcommittedtodevelopintopollengrains确定取样时期的方 小孢子单核靠边期(醋酸洋红
所用材料取自大田要比从温室的一般取生长健壮,发育好者预处为提高愈伤组织的胚状体形成的比例,可对花药进0~8度,3~14天;温度越低,处理时间越~35度,12~16h(短期培养MS、Nitsch、Miller、B5、N6 生长素:2,4-D,NAA、玉米12~15%,番茄13.6%;渗透压稳定 花粉分化成植株的途若愈伤组织不易分化,要进行继代培 愈伤组织出现早,易分化绿苗DirectmicrosporeembryogenesisinCitrusanthersafter3monthsofculture花药和花粉发育过花药和花粉培养的发花药和花粉培养的意花药培花粉培单倍体植株加花粉培
低温预处选幼年树
取下花蕾(镜检花接花
取花通过药壁吸收 和化培养基中的外源物
过滤离一、花粉培养的优二、花粉的分机械分离花药漂浮培养自然释放磁力搅拌三、花粉的预处 重力作用:在从花蕾中取出前1小时,在5℃低速离心,可提高烟草花粉单倍体的诱粉培养 看护培辣椒花粉培养形成胚状ntCellRep(2008)油菜花粉培养形成的胚柄和胚状禾谷类花药和花粉培养中的白化苗现白化苗的控培养基成分:高浓度的2,4-D会使花粉愈伤组织分化 的白化培养温度:当培养温度提高时,白化苗的数目也随之增花药和花粉发育过花药和花粉培养的发花药和花粉培养的意花药培花粉培单倍体植株
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