现代实验方法样品制备PPT

现代实验方法样品制备PPT课件第一页，共四十五页，2022年，8月28日目的要求样品前处理在色谱分析过程中是一个既耗时又极易引进误差的步骤，样品处理的好坏直接影响色谱分析的最终结果，因此，为了提高分析测定效率，改善和优化色谱分析样品制备方法和技术是一个重要问题。通过本章的学习，目的是使学生掌握溶剂萃取、固相萃取、超临界流体萃取、微波萃取以及衍生化技术等色谱分析用样品的前处理方法，了解有关样品前处理仪器的一些相关知识。学习要点溶剂萃取技术；蒸馏及精馏技术；固相萃取技术；气体萃取技术；超临界流体萃取技术；微波萃取技术；衍生化技术技能要点溶剂萃取技术；蒸馏及精馏技术；固相萃取技术；超临界流体萃取技术；波萃取技术学习目标学习指南本节首页退出本章第二页，共四十五页，2022年，8月28日第三节固相萃取技术一、固相萃取概念二、固相萃取原理五、HPLC与SPE的比较三、装置及操作程序

四、溶剂的选择本节首页退出本章六、固相微萃取七、气体萃取（顶空技术）

第三页，共四十五页，2022年，8月28日一、固相萃取(SPE)概念本节首页退出本章SPE：SolidPhaseExtraction是一种液相色谱分离，利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物与干扰化合物分离，达到分离和富集目标化合物的目的。第四页，共四十五页，2022年，8月28日慢中等快淋洗液第五页，共四十五页，2022年，8月28日二、固相萃取的模式及原理本节首页退出本章反相固相萃取正相固相萃取离子交换固相萃取①阴离子交换②阳离子交换第六页，共四十五页，2022年，8月28日（一）、反相固相萃取本节首页退出本章流动相：极性（水溶液）或中等极性固定相：非极性。分离对象：中等到非极性物质。第七页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章分析物中的CH键+硅胶表面官能团→吸附→极性溶液中的有机分析物→保留在SPE。用非极性溶剂解吸吸附在固定相中的目标物质。1、反相固相萃取原理第八页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章2、常用反相固相萃取柱LC-18、LC-8：标准的单键合硅胶ENVI-18、ENVI-8：聚合键合类填料ENVI-ChromP：苯乙烯：疏水

ENVI-Carb：含碳

第九页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章（二）、正相固相萃取流动相：非极性、中等极性固定相：极性。分析物质：极性、中等极性、非极性第十页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章1、正相固相萃取原理保留取决于分析物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间的相互作用。用比样品本身更极性的溶剂洗脱吸附的分析物质。第十一页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章①极性官能团键合硅胶LC-CN，LC-NH2，

LC-Diol②极性吸附物质LC-Si，LC-Florisil，ENVI-Florisil，LC-Alumina2、常用正相固相萃取柱第十二页，共四十五页，2022年，8月28日知识窗流动相①②第十三页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章（三）、离子交换固相萃取适用于带有电荷的化合物（水溶液、有机溶液）。原理：静电吸引，化合物上的带电荷基团与键合硅胶上的带电荷基团之间的吸引。分为：阴离子交换和阳离子交换。第十四页，共四十五页，2022年，8月28日1、阴离子（负电荷）交换本节首页退出本章LC-SAX、LC-NH2：脂肪族季铵类盐+硅胶第十五页，共四十五页，2022年，8月28日第十六页，共四十五页，2022年，8月28日2、阳离子交换本节首页退出本章LC-SCX：磺酸基；LC-WCX：羧酸基团第十七页，共四十五页，2022年，8月28日第十八页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章（四）溶剂极性的影响①目标化合物在极性/非极性溶剂中的溶解度，这主要涉及淋洗液的选择。②目标化合物有无可能离子化（可用调节pH值实现离子化）。第十九页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章（四）溶剂极性的影响③目标化合物有无可能与吸附剂形成共价键。④在吸附剂上吸附点的竞争程度，关系到能否很好分离。第二十页，共四十五页，2022年，8月28日三、固相萃取的装置及操作程序本节首页退出本章固相萃取的装置筛板筛板筛板第二十一页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章1、固相萃取的装置第二十二页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章1、固相萃取的装置第二十三页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章2、操作程序（1）、活化吸附剂

萃取之前要用适当的溶剂淋洗小柱，以使吸附剂保持湿润，可以吸附目标化合物或干扰化合物。第二十四页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章2、操作程序（2）、上样（吸附）样品倒入活化后的固相萃取小柱，然后利用抽真空，加压或离心的方法使样品进入吸附剂。第二十五页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章2、操作程序3、洗涤（去除杂质）在样品进入吸附剂，目标化合物被吸附后，可先用较弱的溶剂将弱保留干扰化合物洗掉。第二十六页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章2、操作程序4、洗脱和收集再用较强的溶剂将目标化合物洗脱下来，加以收集。第二十七页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章活化吸附剂进样洗涤洗脱我来说！第二十八页，共四十五页，2022年，8月28日四、SPE分离机制与溶剂的选择分离机制典型的弱溶剂（保留条件）典型的强溶剂（洗脱条件）反相SPE缓冲液或低浓度的甲醇或乙腈乙腈、甲醇或溶剂与水的混合物正相SPE正己烷、甲苯等二氯甲烷、甲醇等阳离子交换SPE低离子强度缓冲液(<0.1mol/L)高离子强度缓冲液（＞0.1mol/L)低反离子强度高反离子强度阴性离子交换SPE低离子强度缓冲液（<0.1mol/L)高离子强度缓冲液(>0.1mol/L)第二十九页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章五、HPLC与SPE的比较HPLCSPE硬件（柱子）不锈钢柱塑料柱颗粒度(um)540颗粒形状球型(均匀）球型（不均匀）塔板数20～25，000＜100第三十页，共四十五页，2022年，8月28日1、柱子的比较柱接头螺帽柱管过滤片型号：C18柱管筛板固定相尖端？第三十一页，共四十五页，2022年，8月28日N=L/H2、塔板数的比较第三十二页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章六、固相微萃取

SPME不是将待测物质全部分离出来，通过在样品与固相涂层间的平衡来达到分离。方法：玻璃纤维浸入样品中→残留农药→扩散→吸附→平衡→取出玻璃纤维→洗脱→分析。第三十三页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章固相微萃取装置第三十四页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章固相微萃取装置关键：石英纤维上涂吸附剂原则：目标化合物是非极性时选择非极性涂层；目标化合物是极性时选择极性涂层。第三十五页，共四十五页，2022年，8月28日使用方法第三十六页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章七、气体萃取（顶空技术）第三十七页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章七、气体萃取（顶空技术）第三十八页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章七、气体萃取（顶空技术）取样品基质（液体和固体）上方的气相部分进行色谱分析。用途：痕量高挥发性物质的分析测定，气体是挥发性物质的最理想的溶剂。第三十九页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章1、特点①操作简单②可自动化③可变因素多④灵敏度高：检出限可达10-12水平。第四十页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章2、分类静态顶空：在一个密闭的容器中，样品与样品上方气体（1/2）达到平衡。动态顶空：

“连续气体萃取”方法，不必两相达到平衡。经捕集浓缩后进行测定。第四十一页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章3、静态顶空过程第四十二页，共四十五页，2022年，8月28日本节首页退出本章4、动态顶空过程捕集阱中捕集浓缩。“烘烤”：载气的流动方向与热解吸时的流动方