HIV抗体检测技术规程演示文稿

HIV抗体检测技术规程演示文(Wen)稿第一页，共二十八页。HIV抗体检测技(Ji)术规程第二页，共二十八页。

HIV病毒感染人体过程及免疫学机(Ji)制第三页，共二十八页。明确HIV感染者（诊断）控制传播及早医学干预血液筛查流行病学调查、高危人(Ren)群监测开展VCT的基础职业保护HIV抗体检测在艾滋病防治中的作用第四页，共二十八页。主(Zhu)要内容HIV抗体检测的相关规范性文件HIV抗体检测的方法和注意事项HIV抗体确证实验的相关规程和结果解释目前我市HIV筛查实验室中存在的问题第五页，共二十八页。HIV抗体检测的相(Xiang)关规范性文件《医疗机构临床实验室管理办法》卫医发〔2006〕73号《全国艾滋病检测工作管理办法》卫疾控发〔2006〕218号《全国艾滋病检测技术规范(2009年版)》第六页，共二十八页。HIV抗体检测的相关规范性文(Wen)件《全国艾滋病检测工作管理办法》卫疾控发〔2006〕218号检测工作要求

第十二条艾滋病检测实验室应在规定的职能范围内开展检测工作，遵守国家法律、法规和有关规范。检测技术及程序应符合《全国艾滋病检测技术规范》的要求。第七页，共二十八页。HIV抗(Kang)体检测的方法和注意事项HIV抗体检测的主要方法——金标准包括初筛实验和确证实验

第八页，共二十八页。初筛实验:试剂必须经国家食品药品监督管理局注册批准，在有效期内的，批批检合格敏感性和特异性好：方法包括：ELISA，化学发光法和快速(Su)检测法（免疫层析，颗粒凝集等方法）样本：血清、血浆；干血斑；唾液；尿液

HIV抗体检测的方法和注意事项快速免疫层析明胶颗粒凝集法（PA）HIVELISA第九页，共二十八页。试剂(Ji)质量评估：/n16/n1193/n4073/719991.html第十页，共二十八页。第十一页，共二十八页。严格遵照试剂说明书进行试验检测正确使用仪器设备正确判读试验结果作(Zuo)好实验记录试验操作注意事项

第十二页，共二十八页。HIV抗体(Ti)检测技术要求建立标准操作程序禁止肉眼判读！保证酶标仪，洗板机正常运转保证加样器准确选择高质量的与加样器配套的TIP头使用有效期内的试剂保证样品质量第十三页，共二十八页。影响ELISA测(Ce)定的因素试剂盒的因素：妥善保存试剂在有效期内使用试验操作

形成良好的操作习惯：加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。

严格按试剂说明书操作:空白孔不加样品和酶标试剂

操作过程中集中精力：避免加样错误第十四页，共二十八页。注意事(Shi)项保证实验室温度，室温过低有可能造成吸光度值偏低。

ELISA试验的敏感性很高，如果操作不当很容易出现非特异性反应。在操作过程中，尤其应注意洗涤过程。洗涤彻底可减少假阳性的机会。进行ELISA试验时，必须用酶标仪进行测定，不得目测结果。使用酶标仪时，要避免酶标孔内产生气泡，影响判读结果。第十五页，共二十八页。ELISA操作中的注意事(Shi)项试剂准备加样温育洗板显色比色操作示范请看教学片第十六页，共二十八页。ELISA试验假阳性(Xing)产生原因？样品加错位置，标本搞错洗板机设置不当，洗板时洗涤液溢出，污染其它孔洗板机内部管道有真菌生长实验中，实际孵育时间过长，温度过高待测标本溶血或含有血细胞。待测标本长菌或其它原因混浊。其它原因：〔与试验操作无关〕．第十七页，共二十八页。HIV抗体筛查和(He)复检的流程与2004版检测规范的不同报告HIV抗体检测阴性第十八页，共二十八页。HIV感(Gan)染产妇所生婴幼儿的抗体检测第十九页，共二十八页。HIV抗体确(Que)证实验的相关规程和结果解释复检阳性或一阴一阳的样本确认实验送确认前，应核对身份，补充个人信息（姓名，身份证号等）填写”HIV抗体复检检测单”样本“三级包装”第一层：带盖的试管第二层：防水，防漏第三层：包装箱（内附缓冲材料）第二十页，共二十八页。HIV抗(Kang)体确认实验包括：

免疫印迹实验(WB)

条带免疫试验(LIA)

免疫荧光试验(IFA)

放射免疫沉淀试验(RIPA)第二十一页，共二十八页。HIV抗体确认实验(Yan)结果a强阳性对照（HIV-1和HIV-2）b弱阳性对照（HIV-1）c阴性对照d典型的HIV-2血清阳性反应abcdgp160gp120p66p55p51gp41p39p31P24p17

血清对照HIV-2特异带第二十二页，共二十八页。HIV抗体(Ti)确认实验结果第二十三页，共二十八页。HIV抗体确(Que)证实验的流程第二十四页，共二十八页。HIV抗(Kang)体检测的样本保存用于抗体和抗原检测的血清和血浆样本：

1周内2-8℃保存

>1周-20℃保存筛查阳性样本：送确证筛查阴性样本：根据具体情况，至少1-2个月确证样品：保存10年以上第二十五页，共二十八页。目(Mu)前我市HIV筛查实验室中存在的问题实验室布局不合理，没有严格分区；没有标识

应设严格分区（污染区、半污染区和洁净区）；生物安全标识个别实验室设备不全，没有安全柜仪器没有定期校准

酶标仪/洗板机、加样器，温度计，高压灭菌器，生物安全柜每年校准，每季度期间核查没有HIV实验室生物安全管理制度和SOP

实验活动的基本依据，必须建立，每年应进行检查修订，并有记录第二十六页，共二十八页。目前我市HIV筛查(Cha)实验室中存在的问题没有质控记录：很多实验室都有人员流动性大，经培训的专业技术人员严重不足，部分人员未经专业技术培训就上岗

保证实验室负责人和主要技术人员的稳定，两年一培训，考核合格，持证上岗实验室技术人员生物安全意识淡薄

增强安全意识，做好防护，保护自身安全实验室原始记录不规范，缺乏可溯源性

应体现加样步骤和位置；试剂厂家、批号、效期，检测人和复核人第二十七页，共二十八页。目前我(Wo)市HIV筛查实验室中存在的问题复检阳性结果的报告问题筛查实验阴性直接出报告；复检后为阳性或一阴一阳的样本报告为“HIV抗体代确证”，用“