鱼类生理学具体实验内容

鱼类生理学试验试验一 反射中枢活动的某些根本特征及反射弧的分析试验工程学时：3** 要求：■必修□选修一、试验目的及要求：通过对某些脊髓反射〔如脊蛙的屈肌反射〕的分析，了解反射弧完整性与反射活动的关肌反射为指标，观看反射中枢活动的某些根本特征，并分析它们产生的机制。二、试验根本原理：在中枢神经系统的参与下，机体对刺激所产生的具有适应意义的规性律性反响过程称为反射。将动物的高位中枢切除仅保存脊髓的动物成为脊髓动物〔如脊蛙射过程的某些特征。反射活动的构造根底是反射弧。典型的反射弧由感受器、传入神经、神经中枢、传出到破坏，反射活动就无法实现。特征。如：反射时〔从刺激作用于感受器至效应器消灭反响所经受的时间〕的长短、反射活动空间范围的大小、反射活动持续时间的久暂以及引起反射活动的刺激条件等等。三、主要仪器设备及试验耗材：蟾蜍、硫酸溶液0.1%,0.3%,0.5%,1秒表、玻璃平皿、肌夹、搪瓷杯、小滤纸〔约1c×1c、烧杯。四、试验内容或步骤：1、试验预备神经干下穿一条细线备用。手术完后，用肌夹夹住动物下颌，悬挂在铁架台上。2、试验工程〔l〕反射中枢活动的某些根本特征①反射时的测定：在平皿内盛适量0.1%硫酸溶液，将蟾蜍一侧后肢的一个脚趾尖浸入度要全都。三次所测时间的平均值，即为此反射的反射时〔两次试验间隔至少2～3mi。0.3%、0.5%、1%的硫酸溶液再重复上述测定，比较四种浓度硫酸所测之反射时是否一样。〔2〕反射弧的分析①用浸有1%硫酸溶液的小滤纸片贴在下腹部。观看双后肢有何反响？待反响消灭后，的细线，剪断坐骨神经，再重复上述试验，比较两次结果有何不同？②分别将左右后肢趾尖浸入盛有1%硫酸的小平皿内〔两侧浸没的范围相等且仅限于趾尖，双侧后肢是否都发生反响？〔趾尖皮肤肯定要剥干净，再用1硫酸溶液浸泡该趾尖〔切不行将其他趾尖浸入④将一1%硫酸纸片贴于左后肢皮肤，观看引起的反响，用搪瓷杯中清水洗掉纸片及硫酸，擦干皮肤后，将探针插入脊髓腔内反复捣毁脊髓，再重复刚刚的试验。结果如何？[方法评估]操作简洁、易于把握，为常规试验方法。[应用意义]为了解中枢神经系统某些特征及活动规律的验证性试验统内反射中枢的活动规律及反射弧的完整与反射活动的关系。[留意事项]1、离断颅脑部位要适当，太高可能保存局部脑组织而消灭自主活动，太低也会影响反射的引出。2、每次用硫酸溶液或纸片处理后，应快速用搪瓷杯中的清水洗去皮肤上残存的硫酸，并用纱布擦干，以保护皮肤并防止冲淡硫酸溶液。测定反射时的硫酸浓度应由低到高。3五、思考题1、何谓反射时，反射时与刺激强度之间有何关系？2试验二 鱼类血液红细胞和白细胞的计数试验工程学时：3** 试验要求：■必修□选修附件一 鱼类红细胞与白细胞的计数〔必修〕[目的与原理]含量及其差异。显微镜下计数肯定容积的红、白细胞数。再将所得的结果换算为每立方mm血液中红、白细胞个数。[试验对象]鲤、鲫或草鱼。[试剂与器材]显微镜，血细胞计数板，计数器，鱼用注射器1ml或5m棉球，纱布，擦镜纸，小试管及试管架，移液管1ml及2m，红、白细胞稀释液〔或0.850.9的NaCl溶液，75的酒精，蒸馏水，抗凝剂1肝素钠溶液或10草酸钾溶液。[试验步骤]1、生疏血细胞计数板的构造：血细胞计数板为一长方形厚玻璃板。其中计数室方格大小的划分，各种产品略有不同，但根本原理一样。其中心横沟的两边各有一计数室，两计数〔图1-5-9个大方格〔图1-5-。大方格每边长1.0m。四角的大方格每个又分为16个中方格，这是用以2516个小方格〔用单线，中方格每边长为0.2m，计数红细胞时，数中心大方格的5个中方格〔即四角和中心的中方格〕内的红细胞数目〔1-5-。计数室较两边的盖玻片支柱低0.1m，因此，放上盖玻片后，计数板与盖玻片之间的距离为0.1mm，此为计数室的高度。22ml0.85~0.9%NaCl2ml1ml移液管在另一干净的小试管内参加白细胞稀释液0.38ml，备用。是将鱼腹部向上固定在鱼解剖台上，或用纱据解剖部位确认已刺入心脏，可稍后拔针管，如有血液吸入即可，否则重拔出再刺。图1-5-1血细胞计数室构造 图1-5-2血细胞计数区尾动脉取血方法〔血红蛋白〕吸血管吸10μl20μl血液至白细胞稀释液试管内，轻轻挤出血液并反复吸洗2～3次。然后将血液与稀释液混和均匀，但不行用力振荡，以免细胞裂开。3、充液：将盖玻片先盖在计数板上，用干净的吸血管吸取摇匀的稀释血液，而流入计数室内。但必需留意，如滴入过多时，流出室外凹沟中，易造成盖玻片浮起，体积不准；过少时，经屡次充液，易造成气泡，所以都应洗去重充液。4、计数：稀释血液滴入计数室后，须静置2—3分钟，然后低倍镜下计数〔显微镜焦距准确，缩小光圈并降低聚光器。使视野较暗。计数白细胞时，数四角四个大方格内的白细〔共5个中方格〕数上不数下，〔图1-5-计数白细胞时，如觉察每个大方格白细胞数相差1015个，表示血细胞分布不均匀。应将计数板洗净，重摇匀稀释血液，再充液计数。5．计算红细胞数目：将5个中方格内数得的红细胞总数乘以10，000．即得每立方mm血液中红细胞总数。1-5-3血细胞计数方式〔实心圈表示计数的红细胞，空心圈表示不应计数的红细胞〕

3=5个中格红细胞数×稀释mm倍数/5个中格容积〔1〕 稀释倍数等于稀释液2ml除以参加血1μ〔0.01m，为200倍。〔2〕 50.2×0.2×0.1×5=0.02mm3。白细胞数目：将4个大方格内数得白细胞总数乘以50，即每立方mm血液的白细胞总数。计算公式为：白细胞数/3=4个大方格白细胞数×稀释倍数/4个大格容积mm〔1〕0.38ml+20μL〔0.02ml〕/0.02ml20倍。〔2〕计数室41×1×0.1×4=0.4mm3。[方法评估]自动化分析方法，但该方法由于经典、便利、有用，仍较广泛用于血液检验和科研实践中。[应用意义]红细胞是血液中数量最多的有形成分，在正常状况下几乎占血容量的1／2，故使血液呈红色粘稠混悬液。红细胞数量正常状况下保持相对稳定的。多数鱼100—300万个/mm3，400/mm3低者数十万/mm3。细胞数量常因鱼种、年龄、外界环境变化、机体不同生理状况〔运动状况、患病、养分状况等〕而消灭肯定的差异。环境变化如长期缺氧红细胞代偿性增多。鱼类白细胞数量随种类、年龄、生理状况〔产卵、疾病以及一些外界环境因素影响而变化，此外，鱼类白细胞还与饲养条件、养分状况有关：饱食消化力旺盛时多，长期饥饿白细胞〔特别是嗜酸性白细胞〕显著削减。[留意事项]1、各种用具要事前清洗。清洗吸管时依据蒸馏水〔两次〕→95%酒精〔两次〕→乙醚〔两次〕的方法清洗。计数室用蒸馏水洗后，再用软纱布或擦镜纸吸干。2、采血要求快速、准确，不能凝血，也不能有气泡，否则弃去重采。3、血吸管用完后必需马上清洗干净，以防血液凝固堵塞管口。[思考题]1、综合试验所得结果，与红、白细胞的正常值相比照，有何变异？为什么？2、为什么机体正常血细胞数可维持在相对稳定的数量水平？3、试争论鱼类红细胞的正常值及其应用意义？4、白细胞数量的变化有何生理意义？5、血细胞计数室中心的大方各中每一种方格的容积是多少？附 血细胞稀释液1、白细胞稀释液冰醋酸〔破坏红细胞〕 1.5毫升1%龙胆紫〔染白细胞核便于计数〕 1毫升蒸馏水 加至100毫升2、红细胞稀释液NaCl (维持渗透压) 0.5克Na2SO4 (使溶液比重增加，红细胞分布不易下沉) 2.5克HgCl〔固定红细胞外形〕 0.25克蒸馏水 加至100毫升附件二鱼类血涂片的制作和白细胞分类计数〔必修〕[目的与原理]同鱼类白细胞分类计数和血细胞形态特征、变形率等的观看。酶和酸性磷酸酶，吞噬力量与中性粒细胞相当或稍弱，能吞噬抗原-抗体复合物，此外，嗜酸性粒细胞具有抗炎作用。嗜碱性粒细胞含有多种化学物质，如组织胺、肝素和5-羟色胺等，当抗原-抗体发生反响时，或机体在严寒环境中时，都能引起嗜碱性粒细胞释放组织胺和肝素。血液中的单核细胞穿出血管壁进入组织，变成巨噬细胞，可对抗组织内的致病物，各种细菌和病毒。淋巴细胞有免疫功能，对异己构型的物质具有杀灭和消退作用。各种白细胞必需经过染色，才易于区分其类别。常用者为瑞氏〔Wright’s〕染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。[试验对象] 鱼〔淡水鱼和海水鱼均可。[试剂与器材] 试剂：染色液的配制：1、姬姆萨〔Giemsa〕染液的配制Giemsa粉剂0.8；甘油〔医用50m；甲醇50m。将Giemsa37～408～12h，过滤，装入棕色内，密封保存备用。稀释液临用时取Giemsa5ml，加磷酸盐缓冲液〔pH6.4～6.8〕50ml，即为Giemsa稀释液。pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钾〔无水〕0.3g，磷酸氢二钠〔无水〕0.2g，加少量蒸馏水溶解，调整pH6.4~6.81000ml。2、瑞氏〔Wright′s〕染液的配制〔1〕0.1g60ml。(2)配制步骤：①将瑞氏染料粉放人乳钵内，加少量甲醇研磨。②将已溶解的染料倒入干净的玻璃瓶内，剩下未溶解的染料再参加少量甲醇进展研磨，如此反复操作，直至全部染料溶解为止。③装入玻璃瓶内密封，在室温下保存一周即可使用。④颖配制的染料偏碱性，放置后呈酸性，染液储存时间越久，染色愈好。器材：显微镜，香柏油，载玻片，盖玻片，玻片水平支架，采血针或注射器，计数器，小滴管，蜡笔，消毒棉球，瑞氏染液，pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液，姬姆萨染液，蒸馏水。[试验步骤]1、血涂片的制作：取一滴血〔采血方法见试验49，滴于干净无油脂的玻片一端。左当与血滴接触后，血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端〔图1-5-。推时角度要全都，用力应均匀，即推出均匀的血膜〔血膜不行过厚、过薄。将制好的血涂片晾干，不行加热。2、血涂片的染色步骤：用蜡笔在血膜两端各划一道线，以免染料外溢，置涂片于水平的支架上。用小滴管将瑞氏染液滴于涂片上，并盖满划出的涂片局部固定约半分钟。用小滴管再加1.5倍缓冲液或姬姆萨〔Glemsa〕染液，轻轻摇动，并轻吹液体使5—10分钟。用蒸馏水冲洗〔如自来水的pH7.2左右时亦可代用。冲洗血膜时应将玻璃片持平，冲洗后斜置血涂片于空气中枯燥。或先用滤纸吸取水分快速枯燥，即可镜检。3、白细胞分类计数：先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处〔一般在体尾交界处，在油镜下由此处开头按其形态特征进展分类计数，计数100个白细胞，记录各种白细胞所占的百分数。例如：嗜中性白细胞分数〔%〕=计数嗜中性白细胞个数/计数总白细胞个数×100%。1-5-4血涂片制备示意图鲜红至桔红色；嗜碱性粒细胞颗粒呈深蓝紫色；淋巴细胞核呈深蓝紫色，胞质呈天蓝色；单核细胞核呈浅紫色，胞质呈灰蓝色。[方法评估]显微镜法白细胞分类是经典、传统的血细胞分类法，目前还无任何仪器可以完全取代。胞分类主要是从细胞的体积大小、细胞核形、细胞化学染色等方面进展检测，检测速度快，确认病理转变还必需以显微镜检查为准。[应用意义]在不同的生理状态下，不同种类白细胞数目波动较大。如运动、严寒、消化期、生殖期等，此外，在机体失血、剧痛、急性炎症、慢性炎症等病理状态下，白细胞也增多。例如，急性感染、急性中毒、严峻组织损伤、恶性肿瘤等中性粒细胞增多；某些病毒、细菌感染、某些慢性感染时，淋巴细胞数量增多。[留意事项]1、所用玻片必需干净，无油污。2、如染色太浅，可依据原来步骤重染；染色太深或有沉淀物则可用甲醇脱色后重染。3、如白细胞核为天蓝色则染色时间过短。如红细胞呈紫红色，表示染色时间过长。4、染色时切勿使染液枯槁，否则发生不易去掉的沉淀。5、冲洗时不行先倾倒染色，应先轻轻摇动玻片，缓慢加水使沉渣泛起，然后再用水冲洗。6、水冲洗时间不宜过长，否则会脱色。[思考题]1、试述瑞氏〔Wright’s〕染色法区分各种白细胞的依据？2、怎样才能制备一个形态清楚的血涂片？3、试验所得结果与正常值相比照，有何变异？为什么？试验三 温度对鱼类呼吸代谢的影响试验工程学时：4** 试验要求：■必修□选修一、试验目的及要求：被测动物的代谢率〔或代谢强度。把握影响鱼类呼吸代谢的主要影响因素。二、试验根本原理：耗氧率常常被直接用来表示机体的代谢强度率也是间接测定能量代谢的重要指标之一。温度和pH是影响耗氧率的重要因素。本实验通过测定温度和pH对鱼类耗氧量的影响，从而可以了解温度和pH对鱼体代谢活动式，二是流水式。本试验承受的是静水密闭测定法。三、主要仪器设备及试验耗材：试剂：1、硫酸锰：称取52gMnSO·5H

O〔37gMnSO·H

90毫升蒸馏水溶解，然后稀释4 2 4 2100ml。静置数日，取清液使用。2、碱性碘化钾：50gNaOH(70KOH)15g固体KI5035ml纯水中。然100ml3、浓H2SO41.84的试剂。4、HCl〔1：1〕5、0.05NNa2S2O3：称取2.5gNa2S2O3·5H2O,500ml，参加NaOH0.2g使溶液呈碱性，减慢Na2S2O3分解，贮存于棕色瓶中，浓度要标定。6、0.51g300ml烧杯中，用少量纯水调成悬浊液。冲入刚煮沸200ml纯水，并再煮沸即可。材料：鲫、罗非鱼或其它水生动物。器材：水产动物呼吸试验装置；酸式滴定管；恒温水浴锅；采样瓶〔或磨口〕30ml假设干；三角锥瓶100ml假设干；微量滴定管；乳胶管；滴定架；蝴蝶夹；罗纹水止；移液管；吸耳球等。四、试验内容或步骤：1、试验设置不同的试验温度，如金鱼〔鲫鱼，可设置102℃和3℃三个试验温度。高于室温则需要加热，并使水温保持相对稳定。2、试验设置不同的pH，然后测定不同pH3〔见图1或2装时，首先将呼吸室布满水，放入试验动物〔试验动物放入前需称量，使测试动物稳定半小时方可开头试验。4、测定试验开头时水中溶解氧〔初溶氧，及试验完毕时水中溶解氧〔末溶氧。5、溶氧测定方法：用30ml细口瓶〔具塞磨口瓶〕作为水样瓶，用虹吸法取样一满瓶水样后，马上加硫酸锰3滴，碱性碘化钾3滴，盖上瓶盖〔瓶中不行有气泡，上下摇动约1分钟。静置，待沉淀下降到中部后，加浓硫酸5滴，盖上盖再摇匀。取酸化后水样15ml于锥0.050N0.55～6滴，再连续滴定到蓝色刚刚消逝。记录滴定消耗体积V〔毫升。图图1静水密闭法装置2流水密闭法装置6、耗氧率计算：NV溶解氧〔mg/l〕=V样

×1000(初溶氧－末溶氧)耗氧率〔Og/kg/h〕=2

〔动物体重×试验时间〕

×呼吸室体积五、思考题1、承受静水式和流水式方法进展耗氧率测定各有何优缺点？2、为何用静水式测定耗氧率要在一昼夜实行3-4个时间段测定，并取其平均值，为什么？3、温度和pH影响鱼类呼吸代谢？试验四 亚硝酸盐对鱼类血红蛋白的影响试验工程学时：3** 试验要求：■必修□选修附件一 鱼类血红蛋白含量的测定〔必修〕方法一、酸化血红蛋白稀释测定法〔改进沙利氏法〕[目的与原理]把握测定鱼类血红蛋白含量的原理和方法这就可以与标准色相比，从而测出其含量。通常以每100ml血液中含血红蛋白克数来表示，7-8g。[试验对象]鲤、鲫或草鱼。试验设置四个组，即空白比照组和三个低中高浓度的亚硝酸盐试验组。[试剂与器材]75球，0.1mol/L盐酸，蒸馏水，滴管，纱布，抗凝剂〔1%肝素钠溶液或10%草酸钾溶液。[试验步骤]1吸血管为一厚壁毛细玻璃管，其上有10μl、20μl的刻度，尾端连有橡皮头，供吸血用。比色计的两侧，装有标准浓度的高铁血红蛋白溶液，也有用比色玻璃柱〔或片〕来代替的。比色管可插在比色计中，与两侧的标准比色柱进展比色。比色管的两侧通常刻有两行刻度。一行为血红蛋白确实定值，以g计数〔100毫升血液中所含血红蛋白的克数〕来表示，刻度范围为2～22%〔即相当于正常平均值的百分数来表示，10%～160%。目前测定常用确定值来表示。2、用蒸馏水将比色管洗净，吸血管则依次用蒸馏水，95%酒精和乙醚洗净枯燥备用。3、用滴管加0.1mol/L4—6滴到刻度比色管内，约加到管下端刻度“2”或“10%”处为止。4、采血：采血方法见前面的试验，用吸血管吸血至20μl刻度〔要准确。用绵球认真将管尖端外面的血拭去。5、将吸血管中血液轻轻地滴到比色管中盐酸底部，并用上层较清的盐酸溶液反复清洗吸血管3次。使吸血管内的血液完全洗净。切勿带入空气，以至形成气泡影响比色。吸血管15分钟使管内的盐酸和血红蛋白作用完全，形成棕色的高铁血红蛋白。6、把比色管插入标准比色架两色柱中心的空格中，使无刻度的两侧面位于空格的前前方，便于透光和比色。7、用吸管将蒸馏水逐滴地参加比色管内，每加一滴都应充分混匀并观看比色管内的颜〔读数应以溶液凹面最低点相全都的刻度为佳。即为每100ml血液中所含血红蛋白的克数〔用g/100ml表示。8、试验完毕应将吸血管和比色管洗净，放回盒内。[方法评估]仪器的准确度有关。[应用意义]血红蛋白含量与年龄、性别、性周期、养分状况、活动状况、季节变化等有关，养分不良或长期饥饿可引起血红蛋白量显著降低。[留意事项]1、用吸血管吸血过程应认真、认真，准确把握住吸入的血液量是初学者的一个难点，也是试验结果准确与否的一个关键。2、血红蛋白吸管很简洁被损坏，应妥当疼惜。管内有凝血块时不行用金属丝疏通，可45%→95%酒精→乙醚的挨次清洗，最终吹干吸管。310分钟以上方可稀释比色，否则血红蛋白不能充分转变成高铁血红蛋白。最好在30分钟内比色完毕。4、滴加蒸馏水时，宜少量屡次，逐滴参加后混匀比色，以免稀释过度，得不到准确结果。5、比色应在自然光线下进展，避开在阴暗处或有色灯光下比色，并将比色管刻度转向两侧，以免影响比色效果。试验五设计性试验水体污染对鱼类血液和脑组织胆碱能神经递质的影响试验工程学时：8** 试验要求：■必修□选修〔一〕试验目的及要求：把握胆碱酯酶活力测定的原理和方法，并用羟胺三氯化铁显色法测定鱼类血液和脑组织中胆碱酯酶活力。对鱼类的影响。〔二〕主要仪器设备分光光度计，恒温水浴，匀浆器，冰盘，解剖器械。附件 鱼脑组织〔或血液〕胆碱酯酶活力的测定[目的与原理]把握胆碱酯酶活力测定的原理和方法，并用羟胺三氯化铁显色法测定鱼脑胆碱酯酶活力。成乙酰胆碱的胆碱乙酰化酶和催化乙酰胆碱水解的胆碱酯酶。在肯定温度、pH条件下，酶的反响速率与酶的量、反响速率，以及作用时间成近似的线性未经胆碱酯酶水解的乙酰胆碱与羟氨作用生成乙酰羟氨，乙酰羟氨酸性条件下与三氯化铁(FeCl)3试剂：1、磷酸盐缓冲液〔pH7.2〕23.752克磷酸氢二钠〔NaHPO·2HO〕1000ml。2 4 218.156g磷酸二氢钾(KHPO2

)1000ml。4取〔1〕72ml和(2)28ml，混合即成。20.0905g0.001M〔pH4.5〕10ml，0.04mol贮备液，置冰箱内保存〔2星期0.04M1份，加90.004mol使用液。31M13.9200ml300C时，应置于冰箱内。4、14％NaOH 称取14gNaOH，加蒸馏水溶解至100ml。5、1010g10N100ml。6、1010.0g，加0.83ml10ml蒸馏水，待全部100ml。7、0.001mol醋酸缓冲液〔pH4.5〕称取醋酸钠〔NaAC·3H2O〕13.6g，加蒸馏水溶解后再稀释至100ml即成0.1mol0.58ml加水至100ml即配成0.1mol57ml、43ml100倍即成。820分钟配制，将1mol14％NaOH液等体积混合即成。材料：鱼脑组织〔或鱼血液〕器材：分光光度计，恒温水浴，匀浆器，冰盘，解剖器械。[试验步骤]1、取颖或﹣20℃冷冻鱼，从鱼头反面剖骨，认真取出完整的鱼脑，用滤纸轻轻吸去外表体液，剪碎、称重，在冰浴下加1毫升磷酸缓冲液匀浆，再用磷酸缓冲液稀释成每ml2mg脑组织液。2、按下表参加试剂试剂 试 管样品管比照管空白管标准管1.01.0－1.0－－2.01.01.0样品管比照管空白管标准管1.01.0－1.0－－2.01.01.0－－－3〔202530℃〕204.0ml。1ml鱼脑组织液。4、加102.0ml，充分摇匀，然后每管再加102.0毫升，充分摇匀。5、各管试液用滤纸过滤，以除蛋白质。62cm525nm0测量其余各管的光密度。7、计算4 2 〔比照管光密度－样品管光密度〕4 2 脑胆碱酯酶活力＝ ×÷×标准管光密度=〔比照管光密度－样品管光密度〕×6标准管光密度胆碱酯酶活力以每mgμgμg/mg/mi。[方法评估]活力受基质浓度的影响，本法的消耗基质，应过量参加30～70％，在此范围外易产生误差。此方法在国内应用较普遍。[应用意义]时把握水体污染对鱼类等水生动物的影响。[留意事项]1、测定胆碱酯酶活力时温度、反响时间应严格掌握。2、由于鱼脑胆碱酯酶的活力除受有机污染物影响外，水体中多种因素也对该酶有肯定影响，正常鱼脑胆碱酯酶活力有30%的波动。因此测定时肯定要有足够的样品数量，以保证明验结果的准确性。[思考题]1、试述胆碱酯酶的作用原理？2、取脑的酶组织液时为什么要用冰浴？3、当水体受有机磷污染时，鱼脑胆碱酯酶活力有何变化？为什么？试验六 几种激素对鱼类血糖调整的分析试验工程学时：5** 试验要求：■必修□选修一、试验目的及要求：把握邻甲苯胺法测定血糖的原理和操作技术把握鱼类血糖调整的生理机制。二、试验根本原理：鱼类的血糖受激素的调整而处于动态平衡之中。参与调整或影响血糖的激素很多，如胰岛素、胰高血糖素、肾上腺素以及甲状腺、垂体、肾上腺皮质分泌的激素。测定血糖的方法很多，最准确的方法是葡萄糖氧化酶法。但是限于条件，本试验承受邻〔或蓝绿色〕应如下：三、主要仪器设备及试验耗材：试剂：1、邻甲苯胺试剂：称取硫脲〔A.R.〕2.5g，溶于冰醋酸〔A.R.〕750ml中。将此溶液转1L150ml，2.4100ml,1L刻度，置棕色2个月。2、葡萄糖贮存标准液10mg/m：将少量无水葡萄糖A.R或C.P〕内一夜。准确称取此葡萄糖1.000g，以饱和苯甲酸溶液溶解并转移入100ml容量瓶内，再100ml刻度。置冰箱中可长期保存。3、葡萄糖标准液1.5mg/m：在100ml容量瓶内，参加葡萄糖贮存标准液15.0m100ml刻度，混和。4、0.1g/L0.01g100mL。5、胰岛素：用鱼用生理盐水配制成2.10-mol/20IU/m。6、糖皮质激