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文档简介

3.4蛋白质工程的原理与应用一、蛋白质工程

以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活需求。蛋白质工程的基本途径预期的蛋白质功能设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)对蛋白质的改造:改造蛋白质大改:设计并制造出自然界不存在的蛋白质中改:替换一个肽段或一个特定的结构域小改:改造活性部位的一个或几个氨基酸残基在基因水平改造蛋白质:(1)定点诱变技术(已知蛋白质的空间结构)优点:目的性和针对性较强(2)非定点诱变技术(不确定诱变位点)突变位点多,诱变结果难预测异亮氨酸苏氨酸二、蛋白质工程的应用天门冬酰胺天门冬酰胺酵母菌丙糖磷酸异构酶热稳定性提高50%工业生产上实例1:干扰素的保存天然的干扰素在体外保存相当困难。如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸,那么在—70℃的条件下,可以保存半年。实例2:生产单体速效胰岛素如果把胰岛素B链由B28脯氨酸-B29赖氨酸改为B28赖氨酸-B29脯氨酸就可以避免胰岛素分子形成聚合体以保证其效能的及时发挥。原因:胰岛素注射到人体后会堆积在皮下,要经过较长时间才能进入血液,而且进入到血液中的胰岛素又会不断地被分解。实例3:工业用酶许多工业用酶是在改变天然酶的特性后,才使之适应生产和使用需要的。在已研究过的几千种酶中,只有极少数可以应用于工业生产,绝大多数酶都不能应用于工业生产,这是因为工业生产中每一步的反应体系中常常会有酸、碱或有机溶剂存在,反应温度较高,在这种条件下,大多数酶会很快变性失活。鼠抗体人抗体恒定区恒定区可变区可变区嵌合抗体对人体的不良反应减少制药领域上小结:蛋白质工程与基因工程的区别和联系项目蛋白质工程基因工程区别操作流程结果联系预期蛋白质功能→找到对应的脱氧核苷酸序列→获得新的蛋白质获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定通过改造基因得到符合需求的蛋白质生产自然界已经存在的蛋白质

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