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文档简介

阶段评估检测(八)3)(301001.(14)(2023·全国卷Ⅲ)图(a)中的三个DNAEcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。依据基因工程的有关学问,答复以下问题:经BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被 酶切后的产物连接,理由是 。假设某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲乙丙三种含有目的基因的重组子如图(c)所示。这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有 ,不能表达的缘由是。DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有 和 ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是 。【解题指南】(1)图示信息:图(a)中三种酶的识别序列,图(b)中终止子、启动子、图(c)中目的基因的插入位置。(2)关键学问:只有两种限制性核酸内切酶剪切时识别的序列一样时,才能被DNA连接酶连常表达。【解析】此题主要考察限制性核酸内切酶和DNA(1)BamHⅠ和Sau3AⅠ的共同识别序列是—GATC—,二者切割形成的黏性末端一样,可以被DNA在基因表达载体中,启动子应位于目的基因的前端,终止子应位于目的基因的后端,这样目的基因才能顺当地转录并完成翻译过程,即顺当表达,图中所示甲、丙均不符。常见的DNA连接酶有TDNAE·coliDNATDNA4 4末端,又能连接平末端。答案:(1)Sau3AⅠ两种酶切割后产生的片段具有一样的黏性末端甲和丙甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中目的基因插入在终止子的下游,二者的目的基因均不能被转录(其他合理答案亦可)E·coliDNATDNA4TDNA4【加固训练】(2023·海南高考)基因工程又称为DNA在基因工程中,猎取目的基因主要有两大途径,即 和从 中分别。cDNAcDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少,其缘由是 。在基因表达载体中启动子是 聚合酶识别并结合的部位假设承受原核生物作为基因表达载体的受体细胞,最常用的原核生物是 。将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时,常用的携带目的基因的金属颗粒有和 颗粒。细胞的方法。在基因工程中,猎取目的基因主要有两大途径,既可在核苷酸序列的状况下人工合成,也可用限制酶对生物材料的DNAcDNA文库是由mRNA反转录获得的,其中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因,而基因组文库中含有该植物的全部基因。在基因表达载体中,启动子是RNA聚合酶识别并结合的部位。假设承受原核生物作为基因表达载体的受体细胞,最常用的原核生物是大肠杆菌。将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时,常用的携带目的基因的金属颗粒有金粉和钨粉颗粒。答案:(1)人工合成生物材料(其他合理答案亦可)cDNA基因(其他合理答案亦可)RNA大肠杆菌(或细菌)(4)金粉钨粉2.(12分)(2023·抚州模拟)现代生物工程技术推动了医药学、免疫学等领域的进展,依据现代生物工程技术的相关学问和原理答复以下问题:利用基因工程技术实现胰岛素的批量生产是目前糖尿病治疗的思路,该过程中的关键操作环节是 ,该环节目的是使胰岛素基因 ,同时,使其能够表达和发挥作用。单克隆抗体的制备中,将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进展融合,再用特定的选择性培育基进展筛选获得杂交瘤细胞后还需进展 培育和抗体阳性检测经过屡次筛选就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞最终获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的缘由是 。在胚胎工程中胚胎移植前通过 技术可获得较多胚胎移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理根底是 。(1)基因工程的核心步骤是构建基因表达载体在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代,且在下一代能够表达和发挥作用。单克隆抗体的制备过程中,获得的杂交瘤细胞还需要进展克隆化培育和抗体阳性检测,经过屡次筛选后获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞体的缘由是其由一种BB淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体。利用胚胎分割技术可以获得多个一样的胚胎;由于受体子宫对外来胚胎根本不发生排斥反响,因此移植后的胚胎能在受体子宫中存活。答案:(1)基因表达载体的构建在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代克隆化每一种B胚胎分割受体子宫对外来胚胎根本不发生排斥反响3.(12分)干扰素是治疗癌症的重要药物,它必需从血液中提取,由于每升人血液中只能提取0.5μg,所以价格昂贵。美国加利福尼亚的某生物制品公司用以以下图的方式生产干扰素。试答复相关问题:假设要使获得的转基因牛乳汁中含有人干扰素,构建的基因表达载体必需包括:乳腺蛋白基因的启动子人干扰素基因终止子 和复制原点等将基因表达载体导入受精卵最有效的方法是 。通常状况下对供体和受体母牛选择后要用激素进展 并用激素对供体母牛做 处理。为了实现干扰素的批量生产,早期胚胎进展移植之前要进展质量检测,并要求早期胚胎细胞中的性染色体组成为 选择发育良好的囊胚或 胚进展移植为了提高胚胎利用效率,可在这两个阶段进展胚胎分割胚胎分割可以看作动物 (填“有性或“无性”)生殖的方法之一。近年来,关于胚胎干细胞的争论越来越多。胚胎干细胞具有发育的全能性,如以下图的细胞A和细胞B分别是 细胞细胞可以从这些细胞中获得胚胎干细胞。【解析】(1)基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点。将目的基因导入动物细胞的最有效的方法是显微注射技术。胚胎移植过程中要留意对供、受体母牛进展同期发情处理,同时要用促性腺激素对供体母牛进展超数排卵处理,以获得更多的后代。XX性生殖的方法之一。通常从早期胚胎的内细胞团或胎儿的原始性腺中获得胚胎干细胞。答案:(1)标记基因显微注射技术同期发情处理超数排卵XX桑椹无性内细胞团原始性腺4.(12分)(2023·海南高考)甜蛋白是一种高甜度的特别蛋白质。为了改善黄瓜的品质,科问题:用农杆菌感染时,应优先选用黄瓜 填“受伤的”或“完好的)叶片与含重组质粒的农杆菌共同培育,选用这种叶片的理由是 。假设在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白则说明该重组质粒中 已转移到植物细胞中且能够表达用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交觉察子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为1∶1,则说明甜蛋白基因已经整合到 (填“核基因组”“线粒体基因组”或“叶绿体基因组”)中。假设某种转基因作物由于受到病毒感染而减产假设要以该转基因作物为材料获得脱毒苗,应选用 作为外植体进展组织培育。4个步骤,即目的基因猎取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。因此,基因工程的含义可概括为 。【解析】(1)受伤的双子叶植物如黄瓜叶片能分泌大量的酚类物质,吸引农杆菌向伤口处转移。一般黄瓜原来没有甜蛋白,假设在转基因黄瓜中检测到甜蛋白,说明甜蛋白基因已经转其基因型可看作Aa(不含甜蛋白基因看作a),与一般黄瓜(aa)杂交,后代性状分别比为1∶1;假设甜蛋白基因整合到线粒体或叶绿体基因组中,其遗传具有母系遗传的特点,要么后代全有此性状(转基因黄瓜作母本)要么后代都没有此性状(转基因黄瓜作父本)。植物的根尖或茎尖没有或很少有病毒,取这些部位的材料进展植物组织培育可以获得脱毒苗。基因工程的含义是利用体外重组技术或转基因技术,将一生物的特定基因转移到另一种生物的基因组中,使后者表达出的遗传特性,从而制造出的生物类型和生物产品。答案:(1)受伤的叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质,可吸引农杆菌移向这些细胞(2)甜蛋白基因核基因组(3)茎尖(4)依据人们的愿望进展设计,并通过体外重组和转基因等技术,赐予生物的遗传特性,制造出符合人们需要的生物类型5.(14分)(2023·全国卷Ⅱ)某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达(L1)基因连接GFP5L1-GFPP0,构建了真核表达载体P1,其局部构造和酶切位点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不一样。答复以下问题:据图推断该团队在将甲插入质粒P0时使用了两种限制酶这两种酶是 。使用这两种酶进展酶切是为了保证 ,也是为了保证 。将P1转入体外培育的牛皮肤细胞后,假设在该细胞中观看到了绿色荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了 和 过程。为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的 移入牛的 中、体外培育、胚胎移植等。为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进展鉴定,在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的 (填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。【解析】(1P0(L1-GFPE1和E4两种酶切割,并且把目的基因插入启动子和终止子之间,从而使其能在受体细胞中表达。(2)在牛皮肤细胞中观看到了绿色荧光说明基因已表达,而基因的表达包括转录和翻译两个过程。由(4)题意可知,获得含有L1-GFP融合基因(甲)的牛为克隆牛,需要用核移植技术,马上能够产生绿色荧光细胞的细胞核移入去核卵母细胞中。检测甲是否存在于牛的不同组织细胞中,可以承受PCR技术扩增,再用DNA分子杂交技术来检测,PCRDNA,并不是RNA。答案:(1)E1和E4甲的完整甲与载体正确连接转录翻译细胞核去核卵母细胞(4DNA6.(10分)(2023·延边模拟)Ⅱ型糖尿病病因简洁,多数是胰岛素拮抗引起机体对胰岛素的素单克隆抗体制备的问题:首先需要将人胰岛素注射到安康成熟小鼠体内,其目的是猎取 细胞;再将该细胞与 相融合,以制取杂交瘤细胞;其中诱导融合的常用生物诱导因素是 。细胞融合试验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有 等两两融合的细胞。细胞融合过程表达了细胞膜具有 的特性。为检验得到的杂交瘤细胞能否分泌胰岛素抗体可用 与从杂交瘤细胞培育液中提取的抗体杂交。在体外条件下,当培育的小鼠杂交瘤细胞到达确定密度时,需进展 培育以得到更多数量的细胞。细胞融合技术的优点是 。【解析】(1)为了获得能分泌抗人胰岛素抗体的B细胞,应领先将人的胰岛素作为抗原注射到小鼠体内;杂交瘤细胞是由能分泌抗人胰岛素抗体的B细胞与骨髓瘤细胞诱导融合形成的(2)假设只考虑B细胞相互融合形成的细(3)检测杂交瘤细胞产生的胰岛素抗体可以用抗原抗体杂交法(4)动物答案:(1)能分泌抗人胰岛素抗体的B小鼠骨髓瘤细胞灭活的病毒B人胰岛素传代突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能7.(12分)生态农业是指运用生态学原理,在环境与经济协调进展的思想指导下,应用现代(农户养猪,猪粪发酵产沼气,沼气发电或做燃气供家用,沼渣培育果林)生产模式。请答复以下问题:该农业生产体系实现了 和物质循环再生利用充分利用了生态系统中的能量和物质。同碳元素一样,氮元素在生物群落和无机环境之间也是不断循环的,生产中还要往农田不断施加氮肥,这与物质循环冲突吗? ,为什么? 。在生态农业体系中,农作物也会患病有害动物的破坏,对有害动物进展防控的技术有多种。利用性引诱剂诱杀某种害虫的雄性个体,破坏害虫种群正常的 ,降低其种群密度,这种防治方法属于 ,利用了生态系统的 功能。【解析】(1)“桑基鱼塘”和“猪沼果”的生态模式下,猪的粪便、蚕沙、蚕蛹中的能量被实现了对能量的多级利用和物质循环再生利用,充分利用了生态系统中的能量和物质。(2)同碳元素一样,氮元素在生物群落和无机环境之间也是不断循环的,生产中还要往农田不断施加氮肥,这与物质循环不冲突,由于农田土壤中的氮含量往往缺乏以使农作物高产,加氮肥(或农产品源源不断地自农田生态系统输出,其中的氮元素并不能都归还土壤,所以需要施加氮肥)。(3)性外激素多是由雌虫分泌并释放,能引诱雄虫前来交配。性引诱剂就是仿照雌虫分泌的法属于生物防治,利用了生态系统的信息传递功能。答案:(1)对能量的多级利用(2)不冲突农田土壤中的氮含量往往缺乏以使农作物高产,加氮肥(或农产品源源不断地自农田生态系统输出,其中的氮元素并不能都归还土壤,所以需要施加氮肥)(3)性别比例生物防治信息传递8.(14分)(2023·凉山州模拟)“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一,其本质是利用腺病毒和人P53基因(抑癌基因)拼装得到重组病毒。人的P53DNA5中,无遗传毒性;载体经基因工程改造后,只对细胞实施一次感染,不能复制,不能污染。请答复以下问题:在“今又生”的生产中,为了获得更高的安全性能,在载体一般应具备的条件中,科学家选择性地放弃了一般载体都应当具有的 。检测P53基因的表达产物,还可以承受 技术。假设要猎取人类基因组中抑癌基因P53,可以实行的方法通常包括 和通过化学方法人工合成。目的基因的大量扩增则可以承受 ,该技术中需使用的一种特别的酶是 。在争论中假设要获得

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