药物鉴别试验

药物鉴别试验第一页，共五十八页，2022年，8月28日第一节鉴别的定义与目的中国药典2010年版定义定义：根据药物的分子结构、理化性质，采用物理、化学或生物学方法来判断药物的真伪。★注意：鉴别试验方法仅证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，而非对未知物进行定性分析。（目的）第二页，共五十八页，2022年，8月28日意义：它是药品质量检验工作中的首项任务，只有在药物鉴别无误的情况下，进行药物的杂质检查、含量测定等分析才有意义。性质：药物鉴别试验的试验方法虽有一定的专属性，但不足以确证其结构，因此不能赖以鉴别未知物。第三页，共五十八页，2022年，8月28日第二节鉴别试验的项目性状（Description)一般鉴别试验

（generalidentificationtest）专属鉴别试验

（specificidentificationtest）第四页，共五十八页，2022年，8月28日（一）性状药物的性状（description）反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、溶解度和物理常数等。1.外观：指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。2.溶解度：药典采用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述药品在不同溶剂中的溶解性能。第五页，共五十八页，2022年，8月28日例子：CHP2010中盐酸异丙嗪的性状描述：本品为白色或乳白色结晶性粉末；有微臭，味极苦；有引湿性；遇光渐变色；水溶液显酸性反应。盐酸异丙嗪片的性状描述：本品为糖衣片，除去包衣后显白色。色泽晶型聚集状态气味其它第六页，共五十八页，2022年，8月28日盐酸异丙嗪（英语：Promethazine，又名盐酸普鲁米近(PromethazineHydrochloride)或非那根(Phenergan)）是一种常见的止咳药物，是一种抗组织胺药，能竞争性阻断组胺H1受体，对抗组胺所致之毛细血管扩张，并降低其通透性。因此，能够平复因为气管受刺激而引起的咳嗽。

第七页，共五十八页，2022年，8月28日水杨酸阿司匹林外观白色细微的针状结晶或白色结晶性粉末；无臭或几乎无臭白色结晶或结晶性粉末；无臭或微带醋酸臭溶解度在乙醇或乙醚中易溶；

在沸水中溶解；

在三氯甲烷中略溶；在水中微溶在乙醇中易溶；

在三氯甲烷或乙醚中溶解；

在水或无水乙醚中微溶；

在氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液中溶解，但同时分解解热镇痛药第八页，共五十八页，2022年，8月28日3.物理常数:

不仅对药品具有鉴别意义，也反映了该药品的纯杂程度。药典收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。水杨酸阿司匹林熔点158-161℃135-138℃（1）熔点：固体→液体的温度第九页，共五十八页，2022年，8月28日在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每1mL中含有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度。作用：反映手性药物特性及其纯度的主要指标，用以区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。维生素C的比旋度测定：20.5°~21.5°例子手性（2）比旋度第十页，共五十八页，2022年，8月28日[α]为比旋度；α为旋光度；l为光程长短（dm）；c为每100ml中含有干燥品物质重量（g）第十一页，共五十八页，2022年，8月28日（3）吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。有两种表示方式：摩尔吸收系数和百分吸收系数。后者是中国药典收载的方法，它是指在一定波长下，溶液浓度为1％（W/V)，厚度为lcm时的吸收度，用表示，用于考查药品的质量，定量分析。第十二页，共五十八页，2022年，8月28日几种常见喹诺酮类药物的紫外吸收特征药物介质λmax(nm)诺氟沙星0.1mol/LNaOH2731098司帕沙星0.025mol/LNaOH291691洛美沙星0.1mol/LHCl287975吡哌酸0.1mol/LHCl2751630氧氟沙星0.1mol/LHCl226；294918甲磺酸培氟沙星0.1mol/LHCl2771001第十三页，共五十八页，2022年，8月28日常见的氟喹诺酮类药物第十四页，共五十八页，2022年，8月28日喹诺酮类结构通式A、B环稠合而成A环：芳香杂环，4-酮-3-羧酸吡啶衍生物X：C原子或杂原子N：有取代基B环：芳环、杂环（含取代基）第十五页，共五十八页，2022年，8月28日(二)一般鉴别试验（generalidentificationtest）

依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。无机药物：药物中的阴离子和阳离子的特殊反应；有机药物：典型的官能团反应。一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。通常一般鉴别试验不适用于数种化学药物的混合物鉴别或在有干扰物质存在时鉴别。第十六页，共五十八页，2022年，8月28日一般鉴别试验项目

丙二酰脲类：苯巴比妥芳香第一胺类：对乙酰氨基酚托烷生物碱类：硫酸阿托品有机酸盐：无机金属盐类：无机酸盐：有机氟化物类：氟康唑钠、钾、锂、镁、铁、钙、。。。水杨酸、苯甲酸等亚硫酸、亚硫酸氢盐等第十七页，共五十八页，2022年，8月28日苯巴比妥：用作镇静和催眠药物，适用于治疗神经过度兴奋引起的失眠症，能引起安稳的睡眠。但不宜长期服用，因其会引起全身无力、呕吐、头痛等副作用。对乙酰氨基酚：镇痛解热药。常用于发热、头痛和其他轻微疼痛。硫酸阿托品：抗胆碱药，用于胃肠道、胆绞痛，散瞳检查验光，角膜炎，有机磷农药中毒、感染性休克等综合症的治疗。氟康唑：是治疗真菌感染的一种药物，为广谱抗真菌药，对人和动物的真菌感染均有治疗作用，目前市场上有片剂、胶囊、粉针剂和注射液几种剂型。

第十八页，共五十八页，2022年，8月28日1.有机氟化物（P72）有机氟化物变成无机氟化物第十九页，共五十八页，2022年，8月28日氧瓶燃烧法是将试样包在无灰滤纸内，点燃后，立即放入充满氧气的燃烧瓶中，以铂丝（或镍铬丝）作催化剂，进行燃烧分解，燃烧产物被预先装入瓶中的吸收液吸收，试样中的卤素、硫、磷、硼、金属分别形成卤离子、硫酸根离子、磷酸根离子、硼酸根离子及金属氧化物而被溶解在吸收液中。然后，根据各个元素的特点采用一般方法（通常是容量法）来测定其中的各个元素的含量。第二十页，共五十八页，2022年，8月28日2.有机酸盐FeCl3反应:②加稀HCl，即析出白色水杨酸沉淀；分离，沉淀溶于醋酸铵溶液。①中性时呈红色酸性时呈紫色水杨酸盐第二十一页，共五十八页，2022年，8月28日取供试品中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，即生成游离银并附在试管内壁形成银镜。酒石酸盐第二十二页，共五十八页，2022年，8月28日3.芳香第一胺类:橙黄到猩红色第二十三页，共五十八页，2022年，8月28日4.托烷生物碱类:Vitali反应托烷生物碱均有莨菪酸结构醌型产物Vitali反应莨菪酸的特征反应

第二十四页，共五十八页，2022年，8月28日硫酸阿托品

--生物碱类抗胆碱药

第二十五页，共五十八页，2022年，8月28日临床应用内脏（特别是胃肠）绞痛扩瞳、遗尿、盗汗、流涎症、缓慢性心律失常、抗休克有机磷农药（胆碱酯酶抑制剂）中毒等第二十六页，共五十八页，2022年，8月28日结构特点α位莨菪醇β位伪莨菪醇内消旋无旋光性莨菪烷骨架153三个手性碳莨菪酸天然(-)-莨菪酸为S-构型莨菪碱酯α-羟甲基苯乙酸第二十七页，共五十八页，2022年，8月28日5.无机金属盐:焰色反应鉴定。（P74）

钠黄钾紫钙砖红钡黄绿

另外铵盐的检测:第二十八页，共五十八页，2022年，8月28日6.无机酸根的鉴别:氯化物:硝酸银鉴定法以及二氧化锰氧化法硫酸盐:氯化钡鉴定法以及醋酸铅鉴定法以及盐酸排除法硝酸盐:硫酸及硫酸亚铁显棕色法与铜反应生成红棕色蒸气高锰酸钾排除法第二十九页，共五十八页，2022年，8月28日（三）专属鉴别试验

是证实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应，来鉴别药物真伪。在第六章以后会详细讲解。例子:同属巴比妥类使溴褪色硫化铅沉淀注意与一般鉴别试验的区别★共性中找寻个性差异第三十页，共五十八页，2022年，8月28日加碳酸钠试液煮沸后放冷，加过量稀硫酸，析出白色沉淀，并有醋酸臭味+H2SO4CH3COOH第三十一页，共五十八页，2022年，8月28日药物鉴别一般鉴别专属鉴别以某些类别药物的共同化学结构为依据,根据其相同的物理化学性质进行药物真伪的鉴别,可以区别不同药物类别。在一般鉴别的基础上,利用各种药物化学结构的差异来鉴别药物,可以区别同类药物或具有相同化学结构部分的各个药物单体。第三十二页，共五十八页，2022年，8月28日第三节鉴别方法化学鉴别法呈色反应鉴别法沉淀生成反应鉴别法荧光反应鉴别法

气体生成反应鉴别法测定生成物的熔点使试剂褪色的鉴别法维C应用少原则：反应迅速、现象明显，具有明确的原理第三十三页，共五十八页，2022年，8月28日1.呈色反应鉴别法：系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的有色产物。在鉴别试验中最为常用的反应类型有：（1）三氯化铁呈色反应：一般都含有酚羟基或水解后产生酚羟基；（2）异羟酸铁反应：一般多为芳酸及其脂类、酰胺类；第三十四页，共五十八页，2022年，8月28日（3）茚三酮呈色反应：氨基酸及氨基糖苷；（4）重氮化一偶合显色反应：一般都有芳伯氨基或能产生芳伯氨基；第三十五页，共五十八页，2022年，8月28日例：葡萄糖的鉴别——呈色反应取本品约0.2g，加水5ml溶解后，缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀第三十六页，共五十八页，2022年，8月28日斐林（Fehling）试验斐林溶液是含硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液，它能使脂肪醛和还原性糖发生氧化，同时生成红色氧化亚铜沉淀。但不能氧化芳香醛和非还原性糖。第三十七页，共五十八页，2022年，8月28日2.沉淀生成反应鉴别法：系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成不同颜色和具有特殊形状的沉淀。常用的沉淀反应有：（1）与重金属离子的沉淀反应：在一定条件下，药物和重金属离子反应，生成不同形式的沉淀；（2）与硫氰化铬胺（雷氏盐）的沉淀反应：这类药物多为生物碱及其盐和具有芳香环的有机碱及其盐；第三十八页，共五十八页，2022年，8月28日硝酸银——丙二酰脲类、氯化物、微C银镜反应——异烟肼氧化亚铜——葡萄糖铜盐——磺胺类三氯化铁——苯甲酸盐重金属离子——利多卡因生物碱沉淀剂——氮杂环类第三十九页，共五十八页，2022年，8月28日3.荧光反应鉴别法常用的荧光发射形式有以下类型：（1）药物本身（2）药物溶液加硫酸使呈酸性后（3）药物和溴反应后（4）药物和间苯二酚反应后在可见光下发射荧光；第四十页，共五十八页，2022年，8月28日4.气体生成反应鉴别法胺类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物：经强碱处理后，加热，产生氨气；含硫的药物：可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体；含碘有机药物：经直火加热，可生成紫色碘蒸气；含醋酸酯和乙酰胺类药物：经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。第四十一页，共五十八页，2022年，8月28日光谱鉴别法UV鉴别法IR鉴别法NIR鉴别法AAS鉴别法NMR鉴别法MS鉴别法XRD鉴别法紫外近红外红外原子吸收核磁共振质谱法X射线衍射第四十二页，共五十八页，2022年，8月28日1.红外光谱法专属性强、应用较广（固体、液体、气体样品）主要用于组分单一、结构明确的原料药，特别适合于结构复杂、细微差别同类药物，如磺胺类、甾体激素类和抗生素类药品。鉴别方法：中国药典和BP均采用标准图谱对照法；USP采用对照品法。第四十三页，共五十八页，2022年，8月28日第四十四页，共五十八页，2022年，8月28日2.紫外光谱法★光谱简单，专属性差。★常用的方法有：

（1）测定最大吸收波长或同时测定最小吸收波长；

（2）规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸收度；

（3）规定吸收波长和吸收系数法；

（4）规定吸收波长和吸收度比值法；

（5）经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。

以上方法可以单个应用，也可几个结合起来使用，以提高方法的专属性。第四十五页，共五十八页，2022年，8月28日

示例一取色甘酸钠，加磷酸盐缓冲液（pH7.4）溶解并稀释成每1ml中约含10μg的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录IVA）测定，在238nm与326nm波长处有最大吸收。对比吸收光谱特征参数第四十六页，共五十八页，2022年，8月28日

示例二取对氨基水杨酸钠250mg，加1mol/L氢氧化钠溶液3mL，溶解后转移至500mL量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。精密吸取5mL溶液置于内含pH7磷酸盐缓冲液12.5mL的250mL量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，即为供试品溶液。另配制相同浓度缓冲溶液的空白对照液。于2652nm和2952nm波长处测定吸收度A265和A295，规定A265/A295的值应在1.50～1.56之间。对比规定吸收波长的吸收度比值第四十七页，共五十八页，2022年，8月28日

示例三

USP(30)采用对照品法，将样品与对照品按同法处理，在200400nm波长范围内扫描两溶液，要求在相同的波长处有最大吸收、最小吸收和相同的吸收系数，或吸收比在规定的限度内。

阿替洛尔的紫外光谱鉴别：“本品50μg/ml甲醇溶液显示的紫外光谱图与相同条件下测得的USP阿替洛尔参考标准品的紫外光谱图一致”对比吸收光谱一致性第四十八页，共五十八页，2022年，8月28日色谱鉴别法TLC鉴别法HPLC鉴别法GC鉴别法第四十九页，共五十八页，2022年，8月28日1.薄层色谱法ChP2010中对TLC鉴别法的要求对照品供试品对照品混合供试品供试品结构类似品供试品混合结构类似品比移值+颜色综合考虑一致性实验中考虑：供试品/对照品；薄层板；展开剂；显色剂第五十页，共五十八页，2022年，8月