高中生物选修1知识点总结

- .专题一传统发酵技术的应用课题一果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代产物的过程。2、有氧发酵：醋酸发酵谷氨酸发酵·无氧发酵：酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌·生殖4、在有氧条件下，酵母菌进展有氧呼吸，大量繁殖。 CHO＋6O→6CO＋6HO6 12 6 2 2 25、在无氧条件下，酵母菌能进展酒精发酵。 CHO→2CHOH＋2CO6 12 6 2 5 26、20℃左右最适宜酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃7呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 CHOH＋O→CHCOOH＋HO2 5 2 3 210、控制发酵条件的作用①醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进展深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。②醋酸菌最适生长温度为30～35℃，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的时机。③有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化。11、实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒〔→醋酸发酵→果醋〕、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反响呈现灰绿色。先在试管中参加发酵液2ｍL，再滴入物质的量浓度为3mol/L的HSO33滴，振荡试管，2 4观察颜色13应该关闭充气口；制醋时，应该充气口连接气泵，输入氧气。疑难解答〔1〕你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？机。〔2〕你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？如：要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁机、发酵装置要清洗干净，并进展酒精消毒；每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。〔3〕制葡萄酒时，为什么要将温度控制在18～25℃？制葡萄醋时，为什么要将温度控制在30～35℃？. -可修遍---.z..z.温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20℃左右最适合酵母菌的繁殖。因此需要将温度控制在其最适温度围。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30～35℃，因此要将温度控制在30～35℃。课题二腐乳的制作1、多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌。代类型是异养需氧型。生殖方式是孢子生殖。营腐生生活。2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。3、实验流程：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制4、酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进展前期发酵和后期发酵。成腐乳的香气。5、将豆腐切成3cm×3cm×1cm的假设干块。所用豆腐的含水量为70％左右，水分过多那么腐乳不易成形。*水分测定方法如下：准确称取经研钵研磨成糊状的样品5～10g(准确到0.02mg)，置于重量的蒸发皿中，均匀摊平后，在100～105℃电热枯燥箱枯燥4h，取出后置于枯燥器冷却至室温后称重，然后再烘30min，直至所称重量不变为止。样品水分含量〔%〕计算公式如下：(烘干前容器和样品质量-烘干后容器和样品质量)/烘干前样品质量·毛霉的生长：条件：将豆腐块平放在笼屉，将笼屉中的控制在15～18℃，并保持一定的温度。来源：1.来自空气中的毛霉孢子，2.直接接种优良毛霉菌种时间：5天·加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐而增加盐量，接近瓶口外表的盐要铺厚一些。加盐腌制的时间约为8天左右。·用盐腌制时，注意控制盐的用量：盐的浓度过低，缺乏以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味·食盐的作用：1.抑制微生物的生长，防止腐败变质2.析出水分，是豆腐变硬，在后期制作过程中不易酥烂3.调味作用，给腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌丝上的蛋白酶。·配制卤汤：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中酒的含量一般控制在12%左右。·.防止杂菌污染以防腐2.与有机酸结合形成酯，赋予腐乳风味·香辛料的作用：1.调味作用2.杀菌防腐作用3.参与并促进发酵过程·过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。疑难解答〔1〕利用所学的生物学知识，解释豆腐长白毛是怎么一回事？豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝，在豆腐中还有匍匐菌丝。〔2〕为什么要撒许多盐，将长毛的豆腐腌起来？盐能防止杂菌污染，防止豆腐腐败。〔3〕我们平常吃的豆腐，哪种适合用来做腐乳？含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形。〔4它对人体有害吗？它的作用是什么？的"体〞，使腐乳成形。课题三制作泡菜·酸。分裂方式是二分裂。反响式为：CHO酶2CHO+能量 含抗生素牛奶不6 12 6 3 6 3常用于生产酸奶。·亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水，在食品生产中用作食品添加剂。亚硝酸盐含量发酵时间〔d〕·30mg/kg，酱腌菜中亚硝酸盐含量发酵时间〔d〕一般在腌制10天后亚硝酸盐含量开场降低，故在10天之后食用最好*测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反响后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与浓度的标准显色液目测比拟，估算泡菜中亚硝酸盐含量。专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养·展微生物培养的物质根底。〔是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂〕后，制成琼脂固体那么常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。成分是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。用途是指在培养基鉴别培养基类别的微生物。·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。·碳源：能为微生物的代提供碳元素的物质。如CO、NaHCO等无机碳源；糖类、石油、2 3花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。·氮源：能为微生物的代提供氮元素的物质。如N、NH、NO-、NH+〔无机氮源〕蛋白2 3 3 4质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨〔有机氮源〕等。只有固氮微生物才能利用N。2·培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是那么需要提供无氧的条件·无菌技术·获得纯洁培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进展清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进展灭菌。③为防止周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进展。④实验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？答：无菌技术还能有效防止操作者自身被微生物感染。·消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体外表或部一局部对人体有害的微生。灭菌。灭菌方法：①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。比拟项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消比拟项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消消毒 较为温和 局部生活状态的微生物 不能灭菌 强烈 全部微生物 能制作牛肉膏蛋白胨固体培养基〔1〕方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。〔2〕倒平板操作的步骤：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。③用左手的拇指和食指将培养皿翻开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基〔约10～20mL〕倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。④等待平板冷却凝固，大约需5～10min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。·倒平板操作的讨论培养基灭菌后，需要冷却到50温度？可以进展倒平板了。为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？培养微生物吗？为什么？培养微生物。纯化大肠杆菌〔1〕微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。〔2逐步稀释的子细胞群体，这就是菌落。〔3〕稀释涂布平板法是将菌液进展一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的外表，进展培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。〔4〕用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基外表形成单个的菌落，以便于纯化菌种。〔5〕平板划线法操作步骤：①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。②在火焰旁冷却接种环，并翻开棉塞。③将试管口通过火焰。④将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。⑤将试管通过火焰并塞上棉塞⑥左手将皿盖翻开一条缝隙右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养皿。⑦灼烧接种环，其冷却后，从第 一区域划线的末端开场往第二区域划线。重复以上操作，在三、四、五区域划线。注意不要将最 后一区的划线与第一区相连。⑧将平板倒置放入培养箱中培养。·平板划线操作的讨论需要灼烧接种环吗？为什么？数目逐渐减少，以便得到菌落。划线完毕后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，防止细菌污染环境和感染操作者。答：以免接种环温度太高，杀死菌种。在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开场划线？答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开场，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。〔6〕涂布平板操作的步骤：①将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。②取少量菌液，滴加到培养基外表。③将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10s。④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基外表。涂布平板操作的讨论涂布平板的所有操作都应在火焰附近进展。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进展无菌操作？提示：应从操作的各个细节保证"无菌〞。例如，酒精灯与培养皿的距离要适宜、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。菌种的保存〔1〕对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。①临时保藏方法放入4℃的冰箱中保藏。以后每3～6个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。②缺点：这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。〔2〕对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱中保存。疑难解答〔1〕生物的营养生殖所需的外源物质。人及动物的营养物质：水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。植物的营养物质：矿质元素、水、二氧化碳等三类。微生物的营养物质：水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。〔2〕确定培养基制作是否合格的方法将未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天，无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否那么需要重新制备。课题二土壤中分解尿素的细菌的别离与计数尿素最初是从人的尿液中发现的筛选菌株〔1〕实验室中微生物的筛选应用的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件〔包括营养、温度、pH等〕，同时抑制或阻止其他微生物生长。〔2〕选择性培养基。〔3〕配制选择培养基的依据物；参加高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。统计菌落数目〔1〕测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。〔2〕稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。采用此方法的考前须知：1.一般选取菌落数在30~300之间的平板进展计数2.为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中参加TTC3.本法仅限于形成菌落的微生物设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。实验设计等的综合考虑和安排。〔1pH≈7的土壤中取样。铲去3～8cm的土壤层取样。〔2〕样品的稀释：样品的稀释程度将直接影响平板上生长的菌落数目。在实际操作中，通30~300测定土壤中细菌的数量，一般选用104105106测定放线菌的数量，一般选用103 104105测定真菌的数量，一般选用102 103104〔3〕微生物的培养与观察不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌30~37℃1~2天放线菌25~28℃5~7天霉菌25~28℃3~4天每隔24疑难解答〔1〕如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？3C/V*M其中，代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积〔ml〕，M代表稀释倍数课题三分解纤维素的微生物的别离纤维素，一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。纤维素与纤维素酶〔1〕棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，木材、作物秸秆等也富含纤维素。〔2C1CX成葡萄糖，为微生物的生长提供营养。纤维素分解菌的筛选〔1〕筛选方法：刚果红染色法。能够通过颜色反响直接对微生物进展筛选。〔2〕刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。别离分解纤维素的微生物的实验流程释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落〔1〕土壤采集选择富含纤维素的环境。〔2〕刚果红染色法别离纤维素分解菌的步骤 倒平板操作、制备菌悬液、涂布平板〔3〕刚果红染色法种类课题延伸固体发酵展定量的测定。疑难解答〔1〕为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。〔2〕将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集10cm左右腐殖土壤中。〔3〕两种刚果红染色法的比拟-方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，参加刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优透明圈，与纤维素分解菌不易区分。〔4〕为什么选择培养能够"浓缩〞所需的微生物？专题三ＤＮＡ和蛋白质技术课题一 ＤＮＡ的粗提取与鉴定·提取DNA的溶解性原理包括哪些方面？DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精。·DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点？要使DNA溶解，需要使用什么浓度？要使DNA析出，又需要使用什么浓度？在0.14mol/L时溶解度最小；较高浓度可使DNA溶解；0.14mol/L可使DNA析出。·在溶解细胞中的DNA时，人们通常选用2mol/LNaCl溶液；将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水，以稀释NaCl溶液。酒精是一种常用有机溶剂，但DNA却不能溶于酒精〔特别是95％冷却酒精〕，但细胞中蛋白质可溶于酒精。DNA降解；DNA·采用DNA不溶于酒精的原理，可以到达什么目的？将DNA和蛋白质进一步别离。·提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应选用怎样的酶和怎样的温度值？蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。温度值为60～80℃，因为该温度值蛋白质变性沉淀，而DNA不会变性。补充：DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋，其温度在80℃以上，如在PCR技术中DNA变性温度在95℃。·洗涤剂在提取DNA中有何作用？洗涤剂将细胞膜上的蛋白质，从而瓦解细胞膜。·当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用什么指示剂进展鉴定？在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。原理总结：通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA，可以从细胞中提取和提纯DNA剂鉴定提取的物质是否是DNA。实验材料的选取. z.-不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原那么。本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。一是因为鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少DNA的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液。破碎细胞，获取含DNA的滤液·假设选用鸡血和洋葱作实验材料，那么怎样获取含DNA的滤液？在鸡血细胞液中参加一定量蒸馏水并用玻棒搅拌，过滤后收集滤液；切碎洋葱，参加一定量洗涤剂和食盐，搅拌研磨，过滤后收集滤液。·为什么参加蒸馏水能使鸡血细胞破裂？再加上搅拌的机械作用DN。·在以上实验中，参加蒸馏水、洗涤剂和食盐的作用分别是什么？过滤时应中选用〔滤纸、尼龙布〕。血细胞在蒸馏水量吸水而裂；洗涤剂瓦解细胞膜；食盐溶解DNA物质；选用尼龙布进展过滤。·在处理植物组织时需要进展研磨，其目的是什么？研磨不充分产生什么结果？破碎细胞壁，使核物质容易溶解在NaCl溶液中；研磨不充分会使DNA的提取量减少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。。具体做法。10mL鸡血＋20mL蒸馏水→同方向搅拌→3层尼龙布过滤→滤液去除滤液中的杂质为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNADNA溶解度不同的多种杂质。最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等杂质，需要进一步提纯DNA。方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。方案二与方案三的原理有什么不同？答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA别离。析出与鉴定·在滤液中仍然含有一些杂质，怎样除去这些杂质呢？得到的DNA呈何颜色？滤液与等体积的冷却酒精混合均匀，静置2～3分钟，析出的白色丝状物就是DNA。DNA呈白色。·怎样鉴定析出的白色丝状物就是DNA呢？具体做法。试管2支，编号甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色丝状物，使之溶解→各加4mL二苯胺，混合均匀→沸水浴5min→观察颜色变化实验操作. z.-制备鸡血细胞液… 加柠檬酸钠，静置或离心↓破碎细胞，释放DNA…加蒸馏水，同一方向快速通方向搅拌↓→过滤，除去细胞壁、细胞膜等。溶解核DNA 参加NaCl至2mol/L，同一方向缓慢搅拌↓DNA析出… 加蒸馏水至0.14mol/L，过滤，在溶解到2mol/L溶液中↓→除去细胞质中的大局部物质。DNA初步纯化… 与等体积95％冷却酒精混合，析出白色丝状物↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。DNA鉴定… 二苯胺，沸水浴，呈现蓝色料烧杯；使用尼龙布过滤；玻棒沿同一方向搅拌；玻棒搅拌要缓慢〔细胞破裂快速搅拌玻棒不要碰到烧杯壁；二苯胺试剂要现用现配等。课题二酵母细胞的固定化一、实验原理1．使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反响柱，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔，而反响溶液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反响柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反响柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反响柱的下端流出。反响柱能连续使用半年，大大降低了生产本钱，提高了果糖的产量和质量。2．固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定，而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞个大，。固定化细胞优点：本钱更低，操作更容易，可以催化一系列的化学反响。二、实验步骤1称取lg干酵母，放入50mL的小烧杯中，加人蒸馏水101h【注】活化：让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态2。配制物质的量浓度为0.05mo1/L的CaCl溶液称取无水CaCl0.83g。放人200mL的烧杯中，150mL3。配制海藻酸20.7g入50mL小烧杯中。加人10mL水，用酒精灯加热，边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10mL4将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加人已活化的醉母细胞，进展充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。【注】冷却至室温的目的：防止杀死酵母菌5。固定化酵母细胞以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl溶液中，观察液滴在CaCl溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在CaCl溶液中浸泡302in左右。 2【注CaCl溶液的作用：使胶体聚沉 26使用固定化酵母细胞发酵2-3将150mL质量分数为200mL. z.--.z..z.酵母细胞，置于25℃下发酵24h。三、考前须知配制海藻酸钠溶液：小火、连续加热、定容，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入气泡制备固定化酵母细胞：高度适宜，并匀速滴入刚形成的凝胶珠应在CaCL2溶液中浸泡一段时间，以便Ca2+与Na+充分交换，形成的凝胶珠的颜色和形状固定的酵母细胞数目较少要再作尝试。一、实验原理

课题三 血红蛋白的提取和别离蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和别离各种蛋白质。凝胶色谱法〔分配色谱法〔1〕原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒部，路程长，流动慢。〔2〕凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。〔3〕别离过程：混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子＊洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。〔4〕作用：别离蛋白质，测定生物大分子分子量，蛋白质的脱盐等。2．缓冲溶液〔1〕原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成〔如HCO－NaHCO，NaHPO4/NaHPO等，调节酸和盐的用量，可配制不同pH的缓冲液。2 3

3 2 2 4〔2〕缓冲液作用：抵抗外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。3．凝胶电泳法：〔1〕原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、