分析仪器实验讲义

实验一两组分混合物的实验目(1)实验原 A总Aibεi A总Ai之和；ci和εii组分的浓度和摩尔吸收系数。各组分cY，在波长λ1和λ2下，测得总吸光度Aλ1和Aλ2。根据式(1)，可以得出以下方程组：Axyxcy 1 1Axyxcy 2 2式（2）中，ελ1，ελ1为X，Y在波长为λ1和λ2X和Y的摩尔吸收系数，可用XY的系列标准溶液，在λ1和λ2波长下测量XYXY在λ1和仪器和试仪器：GBC-cintra10e分光光度计；容量瓶：25mL8个Cr(NO3)30.100mol/LCo和Cr混合试样。实验内容与步2.505.007.510.00m在可见光区分别绘制Co2+和Cr3+溶液的吸收光谱，并由曲线上找出λ1和λ2标准曲线的绘制：以蒸馏水为参比，在λ1和λ2分别测定配制的Co(NO3)2 系列标准溶液的吸光度，并分别绘制二者的标准曲线收光谱，读出试液在波长λ1和λ2处的吸光度Aλ1和Aλ2。数据处CoCr的吸收光谱，确定λ1和λ2Co2+Cr3+在λ1和λ24条标准曲线，根据标准溶液的浓度，由关系式A=εbcCoCr的ελ1和ελ2；根据混合试样的吸收光谱，Aλ1和Aλ2，依据吸收度具有加和性的原理，设联立方程式并解之，思考(1)分光光度法中，两组分同时测定时，如何选择测定波长λ1和(1)本实验影响结果准确性的因素有哪些实验二有机化合物红外光谱图实验目实验原σ/cm-O—H，N—HC≡C，C≡N伸缩C=O（酸，醛，酮，酰胺，酯，酸酐）伸缩振动脂，C=N红外光谱中4000cm-1~1350cm-1区域称为基团特征频率区（或官能团区，因为在化合物分子中，同一类型的原子团振动频率非常接近，总是出现在某一特定范围内。CH3(CH2)5CH3，CH3(CH2)4CNCH3(CH2)5CH=CH2CH3、CH2基团，它们使这一区域的谱峰产生明显差异，犹如人的因人而异。标准的红外谱图集，常见的有勒(Sadtier)红外谱图集红外样品的一般根据样品的性质，采取不同的方法进行，其中将固体样品与纯，可以用的卤化物有NaCl，KCl，KBr，KINaCl的晶格能较大不易压成透明薄片，而KI又不易精制，因此大多采用KBrKCl作样品载体。C＝C1670～1620cm-1,随着取代基的位置不同，吸收峰的位置有所C＝C伸缩振动吸收峰处于较高波数，强度较弱。但有共扼时，其强度增加，两个C＝C键相互耦合的结果。烯烃中的＝C－H2975cm-1，不对称伸缩振动吸收出现在3080cm-1，这是烯烃中C－H键存在的特征。于受氢键和芳环共轭两方面的影响，苯甲酸缔合体的C＝O伸缩振动吸收位移到1700—仪器与试AVATAR360红外光谱仪及附件，KBr压片器及附件，玛璃研钵、烘箱，红外干燥苯甲酸(分析纯)、山梨酸、KBr(分析纯)实验内容与步数据记录与处1640cm-1处出现吸收峰。思考1900~1600cm-1区域中有强吸收带出现，能否判定分实验 荧光分析法测定邻-羟基苯甲酸和间-羟基苯甲酸含实验目实验原邻-pH＝12时12μg/ml范围内均与其荧光强度呈良好线性关系，且对-羟基苯甲酸在上述条件下均不会发仪器与试仪器：岛津RF－5301PC型荧光分光光度计，其基本操作参见附录。10mL比色管、分NaOH水溶液实验内容与步分别移取0.400.801.201.602.00mL邻-羟基苯甲酸标准溶液于已编号的分别移取0.400.801.201.602.00mL间-羟基苯甲酸标准溶液于已编号的取未知溶液各2.0mL10mL比色管中，其中一份加入1.0mLpH5.5HAc- 液的激发光谱和荧光最大激发波长λmax；再固定激发波长λmax350～500nm区间进行发射波长扫描，获得溶液的发射光谱和荧光最大发射波长λmaxem λmax处和发射光谱λmax 度If。注意事(4)定量操作(工作曲线测定，未知液测定)数据处作工作曲线。根据pH5.5的未知液的荧光强度，可从邻-羟基苯甲酸的工作曲线上确定邻-pH12pH5.5时未知液荧光强度思考 λmaxem和λmax各代表什么?为什么对某种组分，其λmax 和λmax处荧光强度应 实验五气相色谱定性定量分目的与要实验原据以上公式，只要用标准物求得有关被测物的fm值，再由待测样品测得峰面积，便可GC-3800色谱工作站具有强大的数据处理功hfm值会随实验参数的波动而变化，故其定量精度往往比峰面实验仪器和试氢火焰检测器FID；色谱柱：25mtr.0.53mm.1.0m. CPSil24CB毛细柱；；实验步打开系统气路，设置N25.5kg/cm2，空气为4kg/cm2，H2，当GC3800图标上的字变黑，表明工作站－GC连接完成。打开teachablemethod6,该方法被激活。检查GC3800即由该方法中的参数控制；，Sample注入由环己烷、正己烷组成的试样溶液0.02μL注意事思考从实验结果看，实测样与标准样的保留时间tr值完全相同吗？为什么附录 UV-VIS分光光度计操作规 进入“online:GBC…”，确定操作形式“OperationB光度测定形式“photometricmode” C波长扫描参数“Wavelengthscanparameters”D在“File E做基线“Baseline”:把空白液注入两个比色皿内，并分别放入参比和样品光路,B光度测定形式“photometricmode” 反射率“Reflectance” 在多个波长下进行时间扫描,波长之间用逗号隔开。F简单报表“ShortTable”G在“File点击“Select”选择结果文件的路径,例如: I读数“Read”：将盛有样品的比色皿放入样品光路，点击“read结果处理五 定量测定(在“Applicalion”中进入“A样品重复次数“Numberofsamplereplicates”：对每个样品的重复次数。Ignore：零点选择（忽略，使用零点及强迫过零） Linear：线 DW1、W2…12…,波长之间用*,/样品Label…（样品名称“Basesamplename”：输入待测样品的名称，例如：KMnO4。在标准品的浓度栏中,输入标准品浓度值Std栏中,选项“Checkoption”：提示后继续“PromptandContinue”：提示后继续测量。仪器“Instrument”：输入测量波长等参数（参数设置方法同快捷操作方式中固定然后按“OK需要报告“Enable需要报告“EnableOnlineresults”简略报告“ShortStyle”包括方法参数“Includemethodparameters”包括附件参数“Includeaccessoryparameters”6）结果“Resultstorage”: 比色皿(吸收池)使用注意馏水仔细淋洗，严重污染的比色皿可用冷稀硝酸（50％）或热稀硝酸或重铬酸3mol/L的盐酸溶液或乙醇－氨水（1：3）等进行洗涤。如果仍然难以恢复其透明可离开。附录 NecoletAvatar360FT-IR操作规注意事时，屏幕的右下角实时显示√、O、x三种状态之一，它们分别表示仪器处保持的干燥。仪器样品室内变色硅胶应经常更换(保持蓝色)，样品放入或取NieoletAvatarIR-360博里叶变换红外吸收光谱仪的主要组光栅型仪器后的第3代红外吸收光谱仪。附图 傅里叶变换红外吸收光谱仪的工45。KBr分束器组成)。光源发出的红外光直接进入迈克尔逊到达定镜，到达动镜和定镜的光都被反射回分束器并再次发生反射和透射后相汇成光。征吸收，图也产生相应的特征变化。因此，只要获得样品吸收后的图，就能利用计操作规一．开机二．检查仪器示灯亮。保持系统稳定15min。三．进入“OMNIC在Windows桌面双击红外光谱仪软件OMNICE.S.P图标，进入OMNICE.S.P窗口四 建立和选择实验方OMNIC菜单栏experiment下拉框中选择所用的实验文件安装实注：在collect选项里，通常选择次数为16次，分辨率为4cm-1，采样间隔为1.9290.6329cms-单击中colBak按钮收集背景光谱。或者从collect菜单中选择collectbackground命令，出现collectbackground窗口，按屏幕显示进行操作。单击样品ColSmp工具图标或从Collect菜单中选择collectsample命令，然后按屏幕提示进行操作，进行样品扫描。屏幕出现样品的红外吸收光谱图P149⑴.⑵processAbsorbanceOtherconversionml命令，从下拉列表框⑴FindPks工具图标，自动标出谱图中谱峰波数；单击谱图右上角的Replace按钮，标记谱峰的谱图即自动替代原谱图。例如，采用人工找峰，则可单击屏幕下方图标的T图标，移动光标箭头对准谱峰，单击鼠标左键，标出谱峰波数后按Esc键或Enter键即可。用自动找峰方法在未单击Replace按钮文前单击Print按钮，可以⑵i图标，在注解框里(comments)填按鼠标左键选择谱图，从file菜单中选择Saveas，在框中键入文件名，按OK结单击打印Print工具图标，打印谱图。取出待测学台、、显示器电源开关，最后关闭稳压电源开关。试样的处理(一)、红外光谱法对试样的要提纯，否则各组份光谱相互，难于判断。1.气体样品2 所测光谱区内本身没有吸收，不侵蚀盐窗，对试样没有溶剂化效应等。3.1~2mg试样与200mgKBr研细均匀，置于模具中，在油压机上压成透明薄片，即可用于测定。试样和KBr都应经干燥处理，研磨到粒度小于2微米，以免散射光影响。池和微量气体池，采用全反射系统或用带有卤化碱透镜的反射系统进量。附录 RF- 荧光分光光度计操作规一、开确认试样室中光无遮挡物后，依次打开仪器和计算机的电源开关。在Windows窗二、光谱的测现现“save记录最大波长和荧光强度：按鼠标右键，从菜单中选择“crosshair”，在“Cross子菜单中选择“Display”，移动标志线到指定位置，读出最大波长和荧Save若要改变实验参数，可从“configure”选择“parameters”，弹出框，输入指定三、定量参数设置：在“Acquiremode”菜单中选择“tative”。屏幕上出现框“tativeparameters”。输入指定参数。动调节图谱范围。如标准溶液表中有错，可双击该行或按“Enter”键，标准溶液框自品的文件名，单击“OK”。测量完毕。数据处理：从“presentation”中选择“Plot”菜单，屏幕弹出“Polt框，包含4个可打印项目（标准，未知，参数和文件。可对其中任意几项进行打印。如果四面体液池使用注意倒入溶液前，应先用该溶液淋洗内壁三次，倒入量不可过多，以液池高度的后方可离开。附录 varianCP-3800操作规氢气设在0.3Mpa载气设在0.5Mpa空气设在0.6Mpa若以下要激活TCD程序，则要先通载气5-10分钟。5、在文件中ActivedMethod中找到相应的方法文件，如：PX-OFF或WL-OFF，激活！度升到设定的值时打开WL-ON程序文件，并稳定半小时以上。 ysis如果是标定就选择C