GMP质量体系纯化水检验操作规程

目的：阐述饮用水和纯化水的质量检测程序，确保生产用水符合要求。范围：纯化水。责任人：检验员。程序：1定义：为蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得供药用的水，不含任何附加剂。2性状：本品为无色的澄明液体；无臭，无味。3检验方法3.1酸碱度3.1.1概述：检查制备与贮存过程中引入的酸性杂质如二氧化碳、氯化氢，或碱性杂质如氨等。3.1.2检查方法：取本品10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色；另取10ml，加溴麝香草酚兰指示液5滴，不得显兰色。3.1.3保存方法：用玻璃瓶盛装，在2～5℃暗处冷藏，并充满容器，可保存24h。3.2氯化物、硫酸盐与钙盐3.2.1原理：在酸性条件下Cl-与Ag＋生成白色凝乳状沉淀，Ba2＋与SO42-、Ca2＋与C2O42-均生成白色沉淀而使溶液浑浊。3.2.2检查方法：取本品，分置3个试管中，每管各50ml，第一管中加硝酸5滴与硝酸银试液1ml，第二管中加氯化钡试液2ml，第三管中加草酸铵试液2ml，均不得发生浑浊。3.3硝酸盐3.3.1概述：由水源带入，是一种对人体健康有危害的化学物质。反应原理：NO3－还原成NO，NO与K3SO4作用反应呈色。3.3.2检查方法：取本品5ml置试管中，于冰浴中冷却，加10％氯化钾溶液0.4ml与0.1％二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将试管于50℃水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液〔取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，再精密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得（每1ml相当于1µgNO3）〕0.3ml，加无硝酸盐的水4.7ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000006％）。3.4亚硝酸盐3.4.1概述：由水源带入，是一种对人体健康有危害的化学物质。反应原理：NO3－还原成NO2－，与对氨基苯磺酸－α－萘胺反应呈色。3.4.2检查方法：取本品10ml，置纳氏管中，加对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1→100）1ml及盐酸萘乙二胺溶液0.1％二苯胺硫酸溶液（0.1→100）1ml，产生的粉红色，与标准亚硝酸盐溶液〔取亚硝酸钠0.750g（按干燥品计算），加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取1ml，加水稀释成50ml，即得（每1ml相当于1µgNO2）〕0.2ml，加无亚硝酸盐的水9.8ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000002％）。3.5氨3.5.1反应原理：氨与碘化汞钾反应即显黄棕色。3.5.2检查方法：取本品50ml。加碱性碘化汞钾试液2ml，放置15分钟，如显色，与氯化铵溶液（取氯化铵31.5mg，加无氨水适量使溶解并稀释成1000ml）1.5ml，加无氨水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较，不得更深（0.00003％）。3.6二氧化碳3.6.1原理：由水源带入或放置过程中吸收空气中的CO2。如有CO2存在与氢氧化钙反应，生成碳酸钙而呈浑浊。Ca（OH）2＋CO2→CaCO3↓+H2O3.6.2检查方法：取本品25ml，置50ml塞量筒中，加氢氧化钙试液25ml，密塞，振摇，放置，1小时内不得发生浑浊。3.7易氧化物3.7.1原理：不挥发性有机物质与还原性物质的污染。如有存在，则在酸性条件下，可使高锰酸钾液还原退色。3.7.2检查方法：取本品100ml加稀硫酸10ml，煮沸后，加0.02mol/L高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）0.10ml，再煮沸10分钟，粉红色不得完全消失。3.8不挥发物3.8.1概述：检查可溶性无机物及不挥发性有机物。3.8.2检查方法：取本品100ml置105℃恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干，并在105℃干燥至恒重，遗留残渣不得过1mg。3.9重金属3.9.1概述：检查在实验条件下能与硫代乙酰胺作用显色的金属杂质。3.9.2检查方法：取本品40ml加醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml与硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，与标准铅溶液2.0ml加水38ml用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.00005％）。3.10细菌总数检验3.10.1原理：根据细菌的特性，应用不同的营养条件及其他生理条件（如温度、培养时间、PH、需氧性质）去满足其要求，培养细菌。3.10.2操作步骤:以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15ml已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋转平皿，使水样与培养基充分混匀。每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置37℃恒温箱内培养24h，进行菌落计数，即为水样1ml中的细菌总数。3.10.3注意事项及建议：3.10.3.1防止菌落的蔓延生长。皿内琼脂凝固后，不要长久放置才翻转培养，而应于琼脂凝固后数分钟内将平皿翻转进行培养。3.10.3.21ml水样内未有菌落生长即照写，或1ml水样内菌落数＜1。3.10.3.3检验水样用消毒玻璃瓶存放并于4h内测定。建议取氯化或溴化过的水样时，所用的玻璃瓶消毒之前，按每125ml加0.1ml10％硫代硫酸钠以消除氯或溴对细菌的抑制作用。3.11总大肠杆菌3.11.1原理：根据总大肠杆菌群应有的生物特性，如革兰氏阴性无芽胞杆菌，在37℃24h内能发酵乳糖并产酸产气，能在选择性培养基上产生典型菌落。3.11.2操作步骤：取胆盐乳糖培养基3份，每份100ml，2份分别加入规定量的供试液，其中1份加入对照菌50～100个作阳性对照，第3份加入与供试液等量的稀释液作阴性对照。培养18～24h（必要时可延至48h）。阴性对照应无菌生长。取上述3份的培养物各0.2ml，分别接种至5mlMUG培养基管内培养，分别于5h与24h时，取未接种的MUG培养基管作本底对照，将各管置365nm紫外光下观察。阳性对照管呈现荧光，MUG阳性。供试液的MUG管呈现荧光，MUG阳性；无荧光，MUG阴性。然后加数滴靛基质试液于MUG管内，液面呈玫瑰红色为阳性，呈试剂本色为阴性。当阴性对照呈阴性，阳性对照正常生长，供试液胆盐乳糖培养基培养液澄明，并证明无菌生长，判未检出大肠杆菌。供试液MUG阳性，靛基质阳性，判检出大肠杆菌；MUG阴性，靛基质阴性，判未检出大肠杆菌。如MUG阳性、靛基质阴性或MUG阴性、靛基质阳性，菌应取供试液胆盐人乳糖培养基培养物划线于曙红亚甲蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板，培养18～24h，如上述供试液培养物的分离平板无菌落生长，判未检出大肠杆菌。或有菌落生长，阴挑选2～3可疑菌落作靛基质试验（Ⅰ）、甲基红试验（M）、乙酰甲基甲醇生成试验（V-P）、枸橼酸盐利用试验（C）及革兰氏染色、镜检，按表1规定判断结果。3.13注意事项：3.13.1培养基的保存不得超过一周。3.13.2检验水样用消毒玻璃瓶存放并于4h内测定。建议取氯化或