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文档简介

高考真题分类2018年北京卷5,6分)用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段,酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确 的是...A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B.图2中酶切产物可用于构建重组 DNAC.泳道①中是用 SalI处理得到的酶切产物D.图中被酶切的 DNA片段是单链 DNA【答案】D2018江苏卷8,2分)花药离体培养是重要的育种手段。下图是某二倍体植物花药育种过程的示意图,下列叙述正确的是A.为了防止微生物污染,过程①所用的花药需在 70%乙醇中浸泡 30min.过程②的培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于根的分化.过程④应将炼苗后的植株移栽到含有蔗糖和多种植物激素的基质上【答案】C2018江苏卷10,2分)下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述,正确的是.采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植C.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应.利用胚胎分割技术,同卵多胎较同卵双胎成功率更高【答案】A2018江苏卷22,3分)如图为细胞融合的示意图,下列叙述正确的是.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去分化再诱导融合.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C.c细胞的形成与 a、b细胞膜的流动性都有关D.c细胞将同时表达 a细胞和b细胞中的所有基因【答案】BC高考真题分类(2017年北京卷 5,6分)为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因 C(图1),拟将其与质粒(图 2)重组,再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不 符的是..A.用限制性核酸内切酶 EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将 C基因导入细胞C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞D.用分子杂交方法检测 C基因是否整合到菊花染色体上【答案】

C(2017

江苏

11)牛雄性胚胎中存在特异性

H-Y

抗原,可在牛早期胚胎培养液中添加

H-Y

单克隆抗体,筛选胚胎进行移植,

以利用乳腺生物反应器进行生物制药。

下列相关叙述正确的是A.H-Y

单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌

B.应选用原肠胚做雌雄鉴别C.鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植

D.用

H-Y

抗原免疫母牛可获得相应抗体【答案】

D(2017江苏14)下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述,错误的是A.精子在获能液中于 37℃、5%CO2条件下培养的目的是使精子获能B.小鼠在特定光控周期条件下饲养,注射相关激素有促进超数排卵的作用C.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质,因此发育成的个体没有形态学差异D.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育【答案】C(2017年4月浙江卷,28)【加试题】若利用根瘤农杆菌转基因技术将抗虫基因和抗除草剂基因转入大豆,获得若干转基因植物(T0代),从中选择抗虫抗除草剂的单株S1、S2和S3,分别进行自交获得T1代,T1代性状表现如图所示。已知目的基因能1次或多次插入并整合到受体细胞染色体上。下列叙述正确的是高考真题分类第28题图.抗虫对不抗虫表现为完全显性,抗除草剂对不抗除草剂表现为不完全显性B.根瘤农杆菌 Ti质粒携带的抗虫和抗除草剂基因分别插入到了 S2的2条非同源染色体上, 并正常表达C.若给S1后代T1植株喷施适量的除草剂,让存活植株自交,得到的自交一代群体中不抗虫抗除草剂的基因型频率为 1/2D.若取S3后代T1纯合抗虫不抗除草剂与纯合不抗虫抗除草剂单株杂交,得到的子二代中抗虫抗除草剂的纯合子占1/9【答案】C(2016年高考天津卷 4,6分)将携带抗 M基因、不带抗 N基因的鼠细胞去除细胞核后,与携带抗N基因、不带抗M基因的鼠细胞融合, 获得的胞质杂种细胞具有 M、N两种抗性。该实验证明了A.该胞质杂种细胞具有全能性 B.该胞质杂种细胞具有无限增殖能力C.抗M基因位于细胞质中 D.抗N基因位于细胞核中【答案】

C2016上海高考卷,第27题,2分)十年前两个研究小组几乎同时发现,将四个特定基因导入处于分化终端的体细胞(如成纤维细胞等)中,可诱导其形成具有胚胎干细胞样分化潜能的诱导型多能干细胞。这项先进技术的潜在应用前景是A.改造和优化人类基因组结构 B.突破干细胞定向分化的障碍C.解决异体组织 /器官排斥难题 D.克隆具有优良品质的动物个体【答案】C(2016江苏9)下列有关细胞工程的叙述,正确的是A.PEG是促细胞融合剂,可直接诱导植物细胞融合.用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂高考真题分类C.骨髓瘤细胞经免疫处理,可直接获得单克隆抗体D.核移植克隆的动物,其线粒体 DNA来自供卵母体【答案】D2016江苏11)印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物,通过胚胎工程技术,可以让家猫代孕而繁育,主要步骤如图所示。下列相关叙述正确的是.步骤甲、乙分别是指精子获能、胚胎分割.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞.步骤甲使用的培养液和早期胚胎培养液成分基本相同【答案】B2018年全国I卷,第38题,15分)回答下列问题:1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Coben)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外,还证明了_________(答出两点即可)。2)体外重组的质粒可通过Ca2+参与的________方法导入大肠杆菌细胞,而体外重组的噬菌体DNA通常需与_________组装成完整噬菌体后,才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞,在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是_______。3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用__________的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中因添加______________的抑制剂。【答案】(15分)(1)体外重组的质粒可以进入受体细胞;真核生物基因可在原核细胞中表达。(2)转化外壳蛋白(或噬菌体蛋白)细菌(3)蛋白酶缺陷型蛋白酶(2018年全国卷Ⅱ,第38题,15分)某种荧光蛋白(GFP)在紫外线或蓝光激发下会发出绿高考真题分类色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5’末端,获得了L1-GFP融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题:(1)据图推断,该团队在将甲插入质粒 P0时,使用了两种限制酶,这两种酶是 ________。使用这两种酶进行酶切是为了保证 _______,也是为了保证 __________。(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明 L1基因在牛的皮肤细胞中完成了 __________和___________过程。(3)为了获得含有甲的牛, 该团队需要做的工作包括: 将能够产生绿色荧光细胞的 ________移入牛的________中,体外培养、胚胎移植等。(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用 PCR方法进行鉴定,在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞的 ____________(填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为 PCR模板。【答案】( 15分)(1)E1

E4

甲的完整

甲与载体正确连接(2)转录

翻译

(3)细胞核

去核卵母细胞

(4)核

DNA(2018年全国卷Ⅲ,第 38题,15分)2018年《细胞》期刊报道,中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆, 获得两只克隆猴 ——“中中”和“华华”。 回答下列问题:(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程, 核移植是指 。通过核移植方法获得的克隆猴,与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目 (填“减半”“加倍”或“不变”) 。(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度 (填“大于”或“小于”)体细胞核移植,其原因是 。(3)在哺乳动物核移植的过程中,若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通高考真题分类常,所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目 (填“相同”或“不同”)性染色体组合 (填“相同”或“不同”) 。【答案】(15分)(1)将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中 不变(2)小于 胚胎细胞分化程度低,恢复全能性相对容易(3)相同 不同

,(2018海南卷.31)题,15分)甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质。为了改善黄瓜的品质,科学家采用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜细胞,得到了转基因植株。回答下列问题:(1)用农杆菌感染时,应优先选用黄瓜 (填“受伤的”或“完好的” )叶片与含重组质粒的农杆菌共培养,选用这种叶片的理由是 。(2)若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白, 则表明该重组质粒中 已转移到植物细胞中且能够表达;用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交,发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为 1:1,则说明甜蛋白基因已经整合到(填“核基因组”“线粒体基因组”或“叶绿体基因组” )中。(3)假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产,若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗,应选用 作为外植体进行组织培养。(4)通常,基因工程操作主要有 4个步骤,即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、 目的基因的检测与鉴定。 因此,基因工程的含义可概括为【答案】(15分)

。(1)受伤的 叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质,可吸引农杆菌移向这些细胞(2)甜蛋白基因 核基因组3)茎尖4)按照人们的愿望进行设计,并通过体外重组和转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出符合人们需要的新生物类型2018天津卷10,14分)甲型流感病毒为RNA病毒,易引起流感大规模流行。我国科学家在2017年发明了一种制备该病毒活疫苗的新方法,主要环节如下。(1)改造病毒的部分基因,使其失去在正常宿主细胞内的增殖能力。以病毒 RNA为模板,逆转录成对应

DNA

后,利用

技术扩增,并将其中某些基因(不包括表面抗原基因)内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列。与改造前的基因高考真题分类相比,改造后的基因表达时不能合成完整长度的 ,因此不能产生子代病毒。将该改造基因、表面抗原等其他基因分别构建重组质粒,并保存。(2)构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。设计合成一种特殊 tRNA的基因,其产物的反密码子能与( 1)中的终止密码子配对结合,并可携带一个非天然氨基酸( Uaa)。将该基因与 连接后导入宿主细胞。提取宿主细胞的 进行分子杂交鉴定,筛选获得成功表达上述 tRNA的转基因宿主细胞。(3)利用转基因宿主细胞制备疫苗。将( 1)中的重组质粒导入( 2)中的转基因宿主细胞,并在补加 的培养基中进行培养, 则该宿主细胞能利用上述特殊 tRNA,翻译出改造病毒基因的完整蛋白,产生大量子代病毒,用于制备疫苗。特殊 tRNA基因转录时,识别其启动子的酶是 (单选)。A.病毒的DNA聚合酶 B.宿主的 DNA聚合酶C.病毒的 RNA聚合酶 D.宿主的 RNA聚合酶4)上述子代病毒不能在正常宿主细胞中增殖,没有致病性,因此不经灭活或减毒即可制成疫苗。与不具侵染性的流感病毒灭活疫苗相比,该病毒活疫苗的优势之一是可引起免疫,增强免疫保护效果。【答案】(14分)(1)PCR 多肽(或蛋白质)(2)载体 总RNA(3)非天然氨基酸( Uaa) D(4)细胞(2018年江苏卷 32,8分)为生产具有特定性能的 α-淀粉酶,研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因(1656个碱基对),利用基因工程大量制备 α-淀粉酶,实验流程见下图。请回答下列问题:(1)利用 PCR技术扩增 α-淀粉酶基因前,需先获得 细菌的____________。2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的___端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是____。3)进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行高考真题分类设定,下列选项中__的设定与引物有关, ___的设定与扩增片段的长度有关。 (填序号)①变性温度 ②退火温度 ③延伸温度④变性时间 ⑤退火时间 ⑥延伸时间(4)下图表示筛选获得的工程菌中编码 α-淀粉酶的

mRNA

的部分碱基序列:图中虚线框内mRNA片段包含__个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第一个密码子最多有___种。(5)获得工程菌表达的 α-淀粉酶后,为探究影响酶活性的因素,以浓度为 1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性,结果如下:根据上述实验结果,初步判断该 α-淀粉酶活性最高的条件为【答案】(8分)

___________。1)基因组DNA2)5’使DNA片段能定向插入表达载体,减少自连3)②⑥4)8135)pH为8.5,缓冲液为50mmol/LTris-HCl(浙江2018年11月选考,7分)32.【加试题】回答下列(二)小题:(二)某农业生态丁程示意图如下,回答下列问题:(l)该农业生态工程体现的生态工程原理主要是 ________。对该工程的经济效益分析,可从系统内部的投入和产出、______________、系统的有效贡献等三方面进行核算。若要提高该工程的经济效益,可采用农业生产的技术_________在桑基上再种植大豆, 也可采用农业生态工程的_________技术放养适量的鸡鸭等动物以调整该工程的产业结构。(3)某小组应用基因工程方法开展适用于该生态工程的抗虫植物改良研究。为提高将重组 DNA分子导入受体细胞的高考真题分类效率,除考虑导入方法、筛选条件、防止污染外,还需考虑的主要因素有 ___________________(答出2点即可)。农杆菌介导法是目前植物转基因的常用方法,该方法的基本过程是农杆菌感染植物时,并将其插入到受体细胞的基因组中。 欲获得稳定遗传的抗虫性强的转基因植物品种,则转入的抗虫基因必须能在受体细胞中 ________________________答案:(1)物质循环 系统的实际消费2)间种种 植业和畜牧业合理优化(3)重组DNA的质量和浓度、受体细胞的生长状态与密度 携带目的基因的 Ti质粒转移到受体细胞 。(2018

年4月浙江卷,

32)回答与基因工程和植物克隆有关的问题:(1)将含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体

pBI121

均用限制性核酸内切酶EcoRI酶切,在切口处形成

__________。选取含抗虫基因的

DNA

片段与切割后的pBI121用

DNA

连接酶连接,在两个片段相邻处形成

__________,获得重组质粒。(2)已知用

CaCl2处理细菌,会改变其某些生理状态。取

CaCl2处理过的农杆菌与重组质粒在离心管内进行混合等操作,使重组质粒进入农杆菌,完成 _____________实验。在离心管中加入液体培养基,置于摇床慢速培养一段时间,其目的是 __________,从而表达卡那霉素抗性基因,并大量增殖。3)取田间不同品种水稻的幼胚,先进行____________,然后接种到培养基中培养,幼胚发生______________形成愈伤组织,并进行继代培养。用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织,再培养愈伤组织,以便获得抗虫的转基因水稻。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有:培养条件如光温、培养基配方如植物激素配比、以及_______________(答出2点即可)。【答案】(1)粘性末端磷酸二酯键(2)转化使CaCl2处理过的农杆菌恢复细胞的正常状态(3)消毒脱分化水稻的基因型、愈伤组织继代的次数(2017年全国I卷,第38题,15分)真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题:(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因 A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白 A,其原因是_____________________。(2)若用家蚕作为表达基因 A 的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用高考真题分类____________________作为载体,其原因是 _____________________。(3)若要高效地获得蛋白 A,可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比,大肠杆菌具有_________________(答出两点即可)等优点。4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是___________________(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明 DNA 是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是_________________________。【答案】(15分)(1)基因A有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应的 RNA序列不能被切除,无法表达出蛋白

A(2)噬菌体 噬菌体的宿主是细菌,而不是家蚕(3)繁殖快、容易培养(4)蛋白A的抗体(5)DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体(2017年全国卷Ⅱ,第38题,15分)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分, 几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内, 可增强其抗真菌病的能力。 回答下列问题:(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的 mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是 __________________________。提取 RNA

时,提取液中需添加 RNA酶抑制剂,其目的是 __________________________。2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是__________________________。3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是 __________________________(答出两点即可)。4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是______________。5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是 __________________________。【答案】(15分)(1)嫩叶组织细胞易破碎 防止RNA降解(2)在逆转录酶的作用下,以 mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成 cDNA高考真题分类3)目的基因无复制原点;目的基因无表达所需启动子4)磷酸二酯键5)目的基因的转录或翻译异常(2017年全国卷Ⅲ,第 38题,15分)编码蛋白甲的 DNA序列(序列甲)由 A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图 1所示。回答下列问题:(1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙, 若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的 DNA序列(TTCGCTTCT⋯⋯CAGGAAGGA ),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是 _____________________________________。(2)某同学在用 PCR技术获取 DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了 DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为_____________________,加入了________________作为合成DNA的原料。(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。①由图2可知,当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是__________________。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,CO2的作用是__________________。②仅根据图1、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少______________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。【答案】(15分)(1)编码乙的 DNA序列起始端无 ATG,转录出的 mRNA无起始密码子高考真题分类(2)模板 四种游离的脱氧核苷酸( dNTP)(3)①进行细胞传代培养 维持培养液是的 pH ②C2017年海南卷,31题,15分)甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料,利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题:1)以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体,在一定条件下进行组织培养,均能获得试管苗,其原理是 ________________________________________________。2)甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中,均加入一定量的蔗糖,蔗糖水解后可得到______________________。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗,该细胞应具备的条件是________________________(填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”)。3)图中A、B、C所示的是不同的培养结果,该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的,这两种激素是__________________________。A中的愈伤组织是叶肉细胞经_______________形成的。4)若该种植物是一种杂合体的名贵花卉,要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉,可用组织培养方法繁殖,在培养时,___________(填“能”或“不能”)采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体,原因是 _______________________。【答案】(15分)1)绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性,在一定条件下能发育成完整的植株。2)葡萄糖、果糖具有完整的细胞核(3)细胞分裂素、生长素 脱分化(4)不能 对杂合体的植株来说, 其体细胞的基因型相同, 而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同。用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株。(2017年高考天津卷 9,20分)玉米自交系(遗传稳定的育种材料) B具有高产、抗病等优良性状,但难以直接培育成转基因植株,为使其获得抗除草剂性状,需依次进行步骤 I、II试验。Ⅰ.获得抗除草剂转基因玉米自交系 A,技术路线如下图。高考真题分类(1)为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用 2种限制酶,选择的原则是选)。①Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点

______(单G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点③酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同④酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同A.①③ B.①④ C.②③ D.②④2)下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知,细胞脱分化时使用的激素是_______________,自交系_______________的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。3)农杆菌转化愈伤组织时,T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织,需使用含_____________________的选择培养基。4)转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用 K分别处理以下愈伤组织,出现蓝色的是 _______________(多选)。.无农杆菌附着的未转化愈伤组织B.无农杆菌附着的转化愈伤组织C.农杆菌附着的未转化愈伤组织高考真题分类D.农杆菌附着的转化愈伤组织(5)组织培养获得的转基因植株(核 DNA中仅插入一个 G基因)进行自交,在子代含基因的植株中,纯合子占 _______。继续筛选,最终选育出抗除草剂纯合自交系

GA。.通过回交使自交系B获得抗除草剂性状(6)抗除草剂自交系 A(GG)与自交系 B杂交产生 F1,然后进行多轮回交(下图) 。自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代 ______________。(7)假设子代生活力一致,请计算上图育种过程 F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例,并在图1中画出对应的折线图。若回交后每代不进行鉴定筛选,直接回交,请在图2中画出相应的折线图。(8)下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中,4种方法检出的含G基因植株的比例,从小到大依次是_________________。....方法检测对象检测目标检出的含G基因植株的比例PCR扩增基因组DNAG基因X1分子杂交总mRNAG基因转录产物X2抗原-抗体杂交总蛋白质G基因编码的蛋白质X3喷洒除草剂幼苗抗除草剂幼苗X4对Hn继续筛选,最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系。高考真题分类【答案】(20分)1)A2)2,4—D乙3)除草剂4)BD(少选得1分,错选或多选不得分)5)1/3(6)积累越来越多自交系 B的遗传物质/优良性状7)每图中F1和H1比例标识正确得1分,H2和H3比例标识正确得1分8)X4,X3,X2,X12017江苏33,8分)金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:1)从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA,通过______________获得___________用于PCR扩增。高考真题分类(2)设计一对与

MT

基因两端序列互补配对的引物(引物

1和引物

2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的

______________位点。设计引物时需要避免引物之间形成______________,而造成引物自连。(3)图中步骤

1代表______________,步骤

2代表退火,步骤

3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。(4)PCR

扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破

_________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但 ____________的引物需要设定更高的退火温度。(5)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有 ___________(填序号:①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物)。【答案】(8分)(1)逆转录 cDNA(2)限制性核酸内切酶 碱基互补配对(3)变性(4)引物与模板 GC含量高5)②③2017年11月浙江卷,32)【加试题】(节选)回答与植物克隆和动物克隆有关的问题:1)利用植物愈伤组织获得再生植株主要有两条途径:一是由愈伤组织的细胞先分化产生芽和根后再形成一个完整植株的__________途径,二是由愈伤组织细胞产生胚状体后再萌发形成完整植株的胚胎发生途径。另外也可不通过愈伤组织阶段而直接采用腋芽带的茎段培养成丛状苗,再诱导生根获得再生植株,其原因是腋芽中存在 __________。(2)利用植物克隆培育新品种,一方面可利用带有目的基因的 __________侵染植株,或将目的基因通过__________方法导入植物细胞、 组织、器官获得转基因植株, 另一方面利用异源植株的__________进行融合产生杂种植株, 或利用异源植物在试管内进行 __________,对其产生的胚进行培养产生杂种植株。(3)下列属于植物克隆和动物克隆共有培养方法是A.悬浮培养、器官培养 B.贴壁培养、传代培养C.器官培养、愈伤组织培养 D.原生质体培养、传代培养【答案】1)器官发生分生组织(2)农杆菌显微注射原生质体受精(3)A2017年4月浙江卷,32)【加试题】(节选)高考真题分类(二)回答与生态工程有关的问题:(1)对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图如下,术。其中“过腹还田”的具体途径是产生沼气,这是利用了农业生态工程中的

贯穿全过程的核心技术是。将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵技术。

技(2)农业生产上,畜牧业依赖和受制于种植业,可以通过种植业和畜牧业的提高经济和社会效益。“退耕还林”后,林地的增加可以减少于受损生态系统的恢复。 使用农药能有效控制农业害虫, 但也使生态系统的少,因此利用生物的 进行生物防治是今后的发展方向。【答案】

技术,更有利减(二)(1)物质的良性循环 秸秆→家畜→粪便→农田 洁净可再生的新能源开发(2)合理优化 水土流失 生物多样性 种间关系(2016年全国I卷,第40题,15分)某一质粒载体如图所示,外源 DNA插入到

Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(

Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,

Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用

BamHI

酶切后,与用

BamHI

酶切获得的目的基因混合,加入 DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有 (答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。高考真题分类(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞不能区分的,其原因是 ;并且和 的细胞也是不能区分的,其原因是 。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有的固体培养基。(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其 DNA 复制所需的原料来自于 。【答案】(15分)(1)能自我复制、具有标记基因(2)二者均不含氨苄青霉素抗性基因, 在该培养基上均不能生长 含有质粒载体 含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)

二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长

四环素(3)受体细胞(2016年全国卷Ⅱ,第40题,15分)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆晡乳动物(二倍体)的流程。回答下列问题:(1)图中A表示正常细胞核,染色体数为

2n,则其性染色体的组成可为____。过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用____的方法。②代表的过程是____。2)经过多次传代后,供体细胞中____的稳定性会降低。因此,选材时必须关注传代次数。3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是____________________。4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了___。【答案】(15分)(1)XX或XY 显微操作 胚胎移植(2)遗传物质高考真题分类3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性(2016年全国卷Ⅲ,第 40题,6分)图(a)中的三个 DNA片段上依次表示出了 EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)经 BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被 酶切后的产物连接,理由是 。(2)若某人利用图( b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子,如图(c)所示。这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有 ,不能表达的原因是 。(3)DNA

连接酶是将两个

DNA

片段连接起来的酶,常见的有

,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是

。【答案】(15分)(1)Sau3AⅠ

两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端高考真题分类2)甲和丙甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中目的基因插入在终止子的下游,二者的目的基因均不能被转录(其他合理答案亦可)(3)E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶(2016海南卷.31题,15分)基因工程又称为DNA重组技术,回答相关问题:(1)在基因工程中,获取目的基因主要有两大途径,即和从中分离。(2)利用某植物的成熟叶片为材料,同时构建cDNA文库和基因组文库,两个文库相比,cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少,其原因是。(3)在基因表达载体中,启动子是聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞,最常用的原核生物是。(4)将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时,常用的携带目的基因的金属颗粒有和颗粒。【答案】(15分)(1)人工合成生物材料(每空2分,共4分,其他合理答案可酌情给分)(2)cDNA文库中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因,而基因组文库中含有该植物的全部基因(5分,其他合理答案可酌情给分)(3)RNA(2分)大肠杆菌(或答细菌)(2分)(4)金粉钨粉(每空1分,共2分)(2016年高考天津卷7,12分)人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。(1)为获取 HSA基因,首先需采集人的血液,提取 _____________合成总cDNA,然后以cDNA为模板,使用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。(2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达

rHSA

的载体,需要选择的启动子是A.人血细胞启动子

_____________(填写字母,单选)。B.水稻胚乳细胞启动子高考真题分类C.大肠杆菌启动子

D.农杆菌启动子(3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是____________。(4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确空间结构才有活性。与途径相比,选择途径I获取rHSA的优势是________________________________。5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与_____________的生物学功能一致。【答案】(12分)1)总RNA(或mRNA)2)B3)吸引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于目的基因成功转化(4)水稻是真核生物,具有膜系统,能对初始 rHSA多肽进行高效加工5)HSA2016年北京卷,31,16分)嫁接是我国古代劳动人民早已使用的一项农业生产技术,目前也用于植物体内物质转运的基础研究。研究者将具有正常叶形的番茄( X)作为接穗,嫁接到叶形呈鼠耳形的番茄( M)砧木上,结果见图 1.(1)上述嫁接体能够成活,是因为嫁接部位的细胞在恢复分裂、

形成

组织后,经

形成上下连通的输导组织。(2)研究者对

X和

M植株的相关基因进行了分析,结果见图

2。由图可知,

M植株的

P基因发生了类似于染色体结构变异中的

变异,部分

P基因片段与

L基因发生融合,形成

P—L

基因(P—L)。以

P—L

为模板可转录出

,在

上翻译出蛋白质,M

植株鼠耳叶形的出现可能与此有关。(3)嫁接体正常叶形的接穗上长出了鼠耳形的新叶。 为探明原因,研究者进行了相关检测,结果见下表。高考真题分类实验材料M植株的叶X植株的叶检测对象接穗新生叶P—LmRNA有无有P—LDNA有无无①检测P—LmRNA需要先提取总RNA,再以mRNA为模板出cDNA,然后用PCR技术扩增目的片段。②检测P—LDNA需要提取基因组DNA,然后用PCR技术对图2中(选填序号)位点之间的片段扩增。a.Ⅰ~Ⅱb.Ⅱ~Ⅲc.Ⅱ~Ⅳd.Ⅲ~Ⅳ(4)综合上述实验,可以推测嫁接体中P—L基因的mRNA。【答案】(16分)(1)愈伤细胞分化(2)重复mRNA核糖体(3)①逆转录②C4)从砧木被运输到接穗新生叶中,发挥作用,影响新生叶的形态2016上海高考卷,第九题,9分)回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。在图27所示的质粒pZHZ11(总长为3.6kb,1kb=1000对碱基)中,lacZ基因编码β-半乳糖苷酶,后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色。68.若先用限制酶 BamHI切开pZHZ11,然后灭活 BamHI酶,再加DNA连接酶进行连接,最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中,则含 3.1kb质粒的细胞颜色为 _____;含3.6kb质粒的细胞颜色为_____。69.若将两端分别用限制酶 BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换 pZHZ11中0.5kb高考真题分类的BamHI酶切片段,形成 4.9kb的重组质粒,则目的基因长度为 _____kb。70.上述 4.9kb的重组质粒有两种形式,若用 BamHI和EcoRI联合酶切其中一种,只能获得1.7kb和3.2kb两种DNA片段;那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒,则可获得_____kb和_____kb两种DNA片段。71.若将人的染色体 DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因,然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达, 最后将产生的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥,那么上述过程属于 _____。A.人类基因工程 B.动物基因工程C.植物基因工程 D.微生物基因工程【答案】(9分)68.白色白色和蓝色/白色或蓝色69.1.870.1.43.571.C(2016江苏33)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用

______两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过

__________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于

__________态的大肠杆菌。(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加

__________,平板上长出的菌落,常用

PCR鉴定,所用的引物组成为图

2中_____________。(3)若

BamHⅠ酶切的

DNA

末端与

BclⅠ酶切的

DNA

末端连接,连接部位的

6个碱基对序列为

________________________,对于该部位,这两种酶

_____________(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开。高考真题分类4)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得_______种大小不同的DNA片段。【答案】(9分)(1)BclI和HindⅢ 连接 感受(2)四环素 引物甲和引物丙(3) 都不能4)72016年浙江理综生物,32,18分)若某研究小组用普通绵羊通过转基因技术获得了转基因绵羊甲和乙各1头,具体见下表。请回答:(1)A+基因转录时,在的催化下,将游离核苷酸通过键聚合成RNA分子。翻译时,核糖体移动到mRMA的,多肽合成结束。(2)为选育黑色细毛的绵羊,以绵羊甲、绵羊乙和普通绵羊为亲本杂交获得F1,选择1F中表现型为的绵羊和的绵羊杂交获得F2。用遗传图解表示由F1杂交获得F2的过程。(3)为获得稳定遗传的黑色细毛绵羊,从F2中选出合适的1对个体杂交得到F3,再从F3中选出2头黑色细毛绵羊(丙、丁)并分析A+和B+基因的表达产物,结果如下图所示。不考虑其他基因对A+和B+基因表达产物量的影响,推测绵羊丙的基因型是,理论上绵羊丁在F3中占的比例是。【答案】(18分)高考真题分类(1)RNA聚合酶 磷酸二酯 终止密码子(2)黑色粗毛 白色细毛(3)A+A+B+B-1/162016年浙江卷,自选模块,18)(一)下面是关于获得能产生人干扰素大肠杆菌的问题。请回答:(1)用限制性核酸内切酶识别人干扰素基因和质粒中一段特定的

①并切割,然后用

②连接形成重组

DNA

。该质粒是一种含抗生素抗性基因的

③ 核酸分子。A.双链环状

B.单链环状

C.双链线状

D.单链线状(2)将含人干扰素基因的重组质粒导入到大肠杆菌,经含有终获得能产生人干扰素的大肠杆菌。

④的培养基筛选等过程,最(二)某农户建立了小型的“蔬菜 -鸡、猪-沼气”系统。请回答:1)这一系统属于人工干预下的⑤生态系统,其生物组成成分包括生产者、消费者和⑥,在分析该生态系统的经济效益时,除了考虑这三者的投人与产出外,还要考虑⑦的投入(2)在该生态系统中,利用发酵技术产生沼气开发生物能属于 ⑧ 的生态工程。A.生物多样性保护和持续利用 B.节水和废水处理与利用C.山区小流域综合治理与开发 D.洁净及可再生能源系统组合利用【答案】(18分)(一)(1)①核苷酸序列; ②DNA连接酶; ③A(2)④抗生素;高考真题分类(二)(1)⑤庭院; ⑥分解者; ⑦劳动者;2)⑧D2016

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