微生物基础知识

微生物基础知识

与灭菌消毒

张桂萍2012.1.8微生物基础知识★定义：微小生物（细菌、放线菌、真菌、病毒、立克次氏体、支原体、衣原体、螺旋体原生动物以及单细胞藻类常见：※原核生物：细菌、放线菌、立克次氏体、衣原体：球菌（Coccus）、杆菌（Bacillus）、螺形菌（SpiralBacterium）：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、志贺氏菌、沙门菌※真核生物：真菌：霉菌、酵母菌、原生动物以及单细胞藻类※无细胞：病毒、类病毒、拟病毒微生物基础知识微生物有细胞结构无细胞结构原核微生物真核微生物病毒微生物发展史★经验学：酿酒，4000多年前的龙山文化时期。殷商时代的甲骨文中刻有“酒”字。北魏贾思勰的《齐民要术》（533～544）中，列有谷物制曲、酿酒、制酱、造醋和腌菜等方法。★形态学：17世纪，列文虎克显微镜（放大160～260倍）★生理学：19世纪60年代法国科学家L．巴斯德，加热灭菌法，后来被人称为巴斯德灭菌法★生化学：1897年德国学者E．毕希纳发现酵母菌的无细胞提取液能与酵母一样具有发酵糖液产生乙醇的作用，从而认识了酵母菌酒精发酵的酶促过程，将微生物生命活动与酶化学结合起来；1929年，A．弗莱明发现点青霉菌能抑制葡萄球菌的生长，揭示了微生物间的拮抗关系并发现了青霉素。1949年，S．A瓦克斯曼在他多年研究土壤微生物所积累资料的基础上，发现了链霉素。★分子生物学：1941年，G．W．比德尔和E．L．塔特姆用X射线和紫外线照射链孢霉，为分子遗传学打下了基础微生物的特点

体积小，面积大吸收多，转化快生长旺，繁殖快适应强，变异频分布广，种类多特点生长旺，繁殖快理论上，一个细胞经过7h，可繁殖约200万个，10h后可达10亿以上。20min部分微生物增殖简介

微生物名称代时每日分裂次数温度每日增殖率乳酸菌38分38252.7×1011

大肠杆菌18分80371.2×1024

根瘤菌110分13258.2×103

枯草杆菌31分46307.0×1013

光合细菌144分10301.0×103

酿酒酵母120分12304.1×103

小球藻7小时3.42510.6念珠藻*23小时1.04252.1

硅藻17小时1.4202.64草履虫10.4小时2.3264.92污染药品★注射了污染的针剂可能导致死亡★使用了污染的软膏或乳膏会引起皮肤和粘膜感染★服用了污染大肠杆菌、沙门菌等致病菌的制剂会导致肠道传染病的发生和流行；黑龙江省完达山制药厂生产的刺五加注射液部分批号的部分样品有被细菌污染的问题致三人死亡刺五加致人死亡案件的被告人张国宏在法庭上细菌（TheBacterium）★定义：是原核生物界的一种单细胞微生物。形体微小，结构简单，无成形细胞核，也无核仁和核膜，除核蛋白体外无其他细胞器★分类：界＼门＼纲＼目＼科＼属＼种★大小与形态：测量时以um为单位。按形态可分为球菌（Coccus）、杆菌（Bacillus）、螺形菌（SpiralBacterium）细菌形态\链球菌.jpg；细菌形态\麻风杆菌.jpg特征1.繁殖速度快：

大肠杆菌20min可繁殖一代1hrs1个》1624hrs1个》4×1024个细菌繁殖方法及其生长曲线介绍2.变异快在进化的压力下，迅速产生适应环境的新的变种3.许多细菌的生存能力很强，能以多种方式适应外界环境★结构：Ａ.基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体、质粒等

B.特殊结构：夹膜、鞭毛、菌毛、芽胞等★形态与结构检查法：Ａ.光学显微镜法

Ｂ.电子显微镜法Ｃ.染色法／ＧramStain（Ｇ+与Ｇ-）细菌形态\大肠埃希菌.jpg★细菌的化学组成：水＼无机盐＼蛋白质＼糖类＼脂肪类＼核酸★细菌的物理性状：光学性质＼表面积＼带电现象（PH）＼半渗性＼渗透压★细菌生长的条件：氧气＼温度＼水＼碳＼氮＼无机盐＼生长因子\PH

其中水是微生物生长所需的首要的必需条件，干燥的环境意味着微生物无法在此环境里生存。★我们的产品都有微生物生长所需的一切芽孢菌（bacillus）★定义：细菌的一科，能形成芽孢（内生孢子）的杆菌或球菌。包括芽孢杆菌属、芽孢乳杆菌属、梭菌属、脱硫肠状菌属和芽孢八叠球菌属等。★结构：芽孢的原生质外围有三层膜，从内到外是厚的皮层（cortex）、孢子壳和孢子外膜。细菌形态\芽孢构造.bmp★产生环境：存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处芽孢菌特征★能耐氧化；耐挤压；耐高温，能长期耐60°C高温，在120°C温度下能存活20分钟；耐酸碱，在酸性胃环境中能保持活性★繁殖快速：代谢快、繁殖快，四小时增殖10万倍，标准菌四小时仅可繁殖6倍。生命力强：无湿状态可耐低温－60℃、耐高温+280℃，耐强酸、耐强碱、抗菌消毒、耐高氧（嗜氧繁殖）、耐低氧（厌氧繁殖）。体积大：体积比一般病源菌分子大四倍数，占据空间优势，抑制有害菌的生长繁殖。细菌形态\枯草芽孢.jpg真菌（TheFungus）★定义：一种真核细胞微生物。结构比较完整，有细胞壁和完整的细胞核。少数为单细胞，多数为多细胞，由丝状体与孢子组成。

分类及其二相性：酵母菌（Yeast）、霉菌（Mold)★结构：菌丝、孢子★培养特性★抵抗力：对干燥、阳光、紫外线及一般消毒剂有较强的抵抗力；对常见的抗生素不敏感。但其不耐热。霉菌（molds）

★定义：霉菌是形成分枝菌丝的真菌的统称。★结构：由分枝或不分枝的菌丝（hypha）构成细菌形态\霉菌纤维镜下.jpg★产生的环境：1、水分潮湿环境2、营养物质特征★分生孢子细菌形态\霉菌形态.jpg★分布于土壤、水域、空气、动植物体内外★繁殖：营养繁殖、无性繁殖和有性繁殖（孢子）★臭氧及紫外线对霉菌孢子杀灭效果很差，采用过氧乙酸或戊二醛对环境熏蒸较好。酵母菌（yeast）★定义：是一群单细胞的真核微生物。★结构：为单细胞，一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形。大小约为1~5×5~30mm，最大可达100mm。★产生的环境：1、温度、湿度；2、营养物质★细菌的分布：无处不在，广泛存在于自然界包括水、空气、土壤、尘埃、人体等等。既是人类的朋友又是人类的敌人；也是我们最关心的微生物种类。（e.g:O157/歧酸杆菌）★真菌的分布：酵母菌存在于较潮湿的环境中；霉菌在环境中分布广泛，可以通过孢子在空气中传播，其在潮湿的环境中极易生长。微生物对产品的影响★某些微生物可在我们的产品中存活，并利用其中的成分进行大量繁殖，使产品组分发生变化，同时产生代谢产物。★在上述变化发生后，产品可出现变质、异味、外观改变、保存期缩短等等。★如果消费者使用了受污染的产品，可严重危害其身体健康。★如果政府或鉴定机构在我们的产品里检测出微生物指标超标的话，公司将面临巨大的压力。微生物是怎样被带进产品中?★原材料：包括生产用水★包装材料★生产设备★生产操作人员：手、呼吸道及不良行为★生产环境：空气、地板等消毒剂与灭菌剂★灭菌是指将传播媒介上所有微生物全部清除或杀灭，特别是抵抗力最强的细菌芽孢。★消毒是指将传播媒介上病原微生物清除或杀灭，使其达到无公害的要求，并非杀死所有的微生物，包括芽孢。★消毒剂是指能杀死微生物的消毒剂药剂，并非一定要杀死所有的微生物，包括细菌芽孢。★灭菌剂是指那些能杀死所有微生物，包括能100％杀死细菌芽孢的高效类消毒剂。★消毒与灭菌：区分消毒＼灭菌＼防腐＼无菌的概念★物理消毒灭菌法：干热灭菌法＼湿热灭菌法＼电磁波辐射灭菌法\滤过法等

高压蒸汽灭菌法★化学消毒灭菌法：酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂等消毒法★物理法：热消毒法、紫外消毒法、电离消毒法、微波法等§热消毒：蒸汽消毒和热水消毒§紫外消毒：波长为2000～3000A的紫外线★化学法：第一代为甲醛，第二代为环氧乙烷，第三代为戊二醛，第四代也是最新一代，即二氧化氯★机械法：清洁、擦拭★热消毒：流通蒸汽：条件：121℃、15min以上。§优点是效果好、无残留§缺点是只能用于耐热物品的消毒，使用成本高，会导致被使用物品或所在环境的温度升高★紫外：§优点是使用方便§缺点是紫外线穿透性差、光照强度随距离加长而降低。对不同微生物的杀灭剂量不同以及对人体暴露部位具有伤害性等。它主要应用于空气、水和物品表面的预防性消毒等。化学消毒★高效：杀灭包括芽胞和真菌在内的各种微生物，又称灭菌剂，如过氧乙酸、甲醛、戊二醛和环氧乙烷等；★中效：可杀灭细菌芽胞以外的各种微生物，如含氯消毒剂、含碘消毒剂、乙醇和煤酚皂溶液等；★低效：杀灭一般细菌繁殖体、部分真菌和亲脂性病毒，不能灭杀结核杆菌、亲水性病毒和细菌芽胞，如洗必太和新洁而灭等影响消毒效果的因素★消毒的剂量★微生物污染的种类和数量★温度的影响：物理消毒还是化学消毒，温度越高效果越好★酸碱度（PH值）★有机物质：有机物存在时，含氯消毒剂的杀菌作用显著下降；季铵盐类、双胍类和过氧化合物类的消毒作用受有机物的影响也很明显；但环氧乙烷、戊二醛等消毒剂受有机物的影响比较小。如果有机物存在，消毒剂量则应加大。★拮抗物质：季铵盐类消毒剂的作用会被肥皂或阴离子的洗涤剂所中和；酸碱中和★穿透作用：干热消毒比湿热穿透力差；甲醛蒸汽消毒比环氧乙烷穿透力差；紫外线消毒只能作用于物体表面和浅层液体中的微生物，一张纸即可使其杀菌力降低95%以上。化学消毒消毒环境相对湿度对气体消毒和熏蒸消毒的影响十分明显。温度过高或过低都会影响消毒效果，甚至导致消毒失败。室内空气甲醛熏蒸消毒的相对湿度应为80--90%，小型环氧乙烷消毒处理的相对湿度以40--60%为宜，大型消毒（>0.15立方米）为50%--80%。另外紫外线在相对湿度为60%以下杀菌力较强，在80%--90%时杀菌力下降30%-40%，因为相对湿度增高回影响紫外线的穿透力。使用消毒剂的原则★首选无毒、无残留、无腐蚀的消毒剂；其