生物选修1专题三

专题3植物的组织培养技术课题1菊花的组织培养课题2月季的花药培养课题1菊花的组织培养课题1学习目标、重难点学习目标：

1、掌握植物组织培养的原理

2、学会菊花或其他植物的组织培养重难点：植物组织培养过程中使用的

无菌技术指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。又称：植物离体培养一、植物组织培养的概念概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质植物组织培养原理：植物细胞的全能性什么叫分化？其实质是什么?什么叫脱（去）分化、再分化？愈伤组织的细胞有什么特点？阅读资料解决下列问题：二、植物组织培养的基本过程我就是愈伤组织哦！二、植物组织培养的基本过程三、影响植物组织培养的因素：1、外植体的选取

不同植物的组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同2、培养基的配制(MS培养基)

大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S

微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co

有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等未开花植物的茎上部新萌生的侧枝3、不同植物激素使用顺序使用顺序实验结果先生长素，后细胞分裂素有利于细胞分裂但不分化先细胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化

同时使用分化频率提高4、不同植物激素使用量生长素/细胞分裂素比值结果比值高时促根分化，抑芽形成比值低时促芽分化，抑根形成比值适中促进愈伤组织生长5、pH、温度、光照（菊花组培）

pH=5.8

温度控制在18—22℃

每日光照12h6、消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素再分化不需要光需要光制备MS固体培养基外植体消毒接种培养栽培四、实验操作移栽冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上配制各种母液配制培养基灭菌1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧）4、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？菊花的组织培养再分化材料性质、营养物质、调节物质、环境条件外植体的消毒接种基本原理:细胞的全能性基本过程:脱分化愈伤组织影响因素：操作流程：配制MS固体培养基培养移栽栽培课题2月季的花药培养主要知识：（一）、被子植物的花粉发育和产生花粉植株的两条途径（二）、月季花药离体培养的操作过程（三）、影响花药培养的因素植物的花药培养在育种上有什么意义？花粉粒（1N）单倍体植株（1N）二倍体纯合子植株（2N）缩短了育种周期，为新品种的培育开辟了新途径。花的结构花丝花药：囊状结构，内有很多花粉

花粉是由花粉母细胞（即小孢子母细胞）经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期等阶段。（一）被子植物的花粉发育雄蕊基础知识（一）被子植物的花粉发育1花粉母细胞（2n）4个小孢子(小孢子四分体)（n）减数分裂有丝分裂1个花粉管细胞核（n）1个生殖细胞核（n）有丝分裂2个精子单核居中期（n）单核靠边期（n）花粉发育过程：（二）产生花粉植株的两种途径形成原因：主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比（三）影响花药培养的因素1、材料的选择不同植物同一植物的不同生理状况（花期早期－初花期、花蕾）合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间）此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等2、培养基的组成实验操作材料选取材料和消毒接种和培养材料的选择选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。材料的消毒：花蕾（70％酒精）大约30s（无菌水）清洗（无菌吸水纸）吸干水分（1％氯化汞溶液）2～4min（无菌水）冲洗

月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？

在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。三、接种和培养剥取花药接种花药培养分化培养基培养鉴定和筛选不要损伤花药？要彻底除去花丝？常常会出现染色体倍性的变化？每个培养瓶接种（7～10）个花药花药长出愈伤组织还要转移到哪？温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。主要原因是营养核和生殖核融合造成的植物组织培养技术与花药培养技术的比较项目相同点不同点植物组织培养技术离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。外植体为体细胞，染色体数无需加倍。花药培养技术取材为花药，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理