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文档简介
实验十一
人群中PTC味盲基因频率分析1、通过对PTC味盲基因频率的分析,了解基因在群体水平上的传递规律,加深对群体遗传学中遗传平衡定律的认识。一、实验目的苯硫脲(phenylthiocarbamide,PTC)是一种人工合成化合物,呈白色晶体,因具有硫化酰胺基而呈苦味,不同的人对其溶液的苦味有不同的尝味能力。这种尝味能力是由一对等位基因(Tt)所决定的遗传形状,其中T对t为不完全显性。正常尝味者的基因型为TT,能尝出1/750000-1/6000000mol/L的PTC溶液的苦味;具有Tt的基因型的人尝味能力较低,只能尝出1/480000—1/380000mol/L的PTC溶液的苦味;而基因型为tt的人只能尝出1/24000mol/L以上浓度PTC溶液的苦味。个别人甚至对PTC的结晶也尝不出苦味。这一类个体在遗传学上称为PTC味盲。
二、实验原理测验对象:本班同学。1、溶液配制:称取PTC结晶1.3克,加蒸馏水1000ml,置室温下1-2天即可完全溶解。其间应不断摇晃以加快溶解过程。由此配成的溶液浓度为1/750mol/L,称为母液,也就是1号液。2-14号溶液均由上一号液比稀释而制成,具体配制方法见下表。编号配制方法浓度M基因型11.3gPTC+蒸馏水1000毫升1/750tt21号液100毫升+蒸馏水100毫升1/1500tt32号液100毫升+蒸馏水100毫升1/3000tt43号液100毫升+蒸馏水100毫升1/6000tt54号液100毫升+蒸馏水100毫升1/12000tt65号液100毫升+蒸馏水100毫升1/24000tt76号液100毫升+蒸馏水100毫升1/48000Tt87号液100毫升+蒸馏水100毫升1/96000Tt98号液100毫升+蒸馏水100毫升1/192000Tt109号液100毫升+蒸馏水100毫升1/384000Tt1110号液100毫升+蒸馏水100毫升1/768000TT1211号液100毫升+蒸馏水100毫升1/1536000TT1312号液100毫升+蒸馏水100毫升1/3072000TT1413号液100毫升+蒸馏水100毫升1/6144000TT三、实验程序(1)让受试者坐在椅子上,仰头张口,用滴管滴5-10滴14号液于受试者舌根部,让受试者徐徐咽下品味,然后用蒸馏水做同样的试验。(2)询问受试者能否鉴别此两种溶液的味道,若不能鉴别或鉴别不准,则依次用13号、12号溶液重复实验,直到能明确鉴别出来为止。(3)当受试者鉴别出来某一号溶液时,应当用此号溶液重复尝试3次,三次结果相同时才是可靠的。(4)测定时,应将PTC溶液与蒸馏水反复交替给受试者,以免由于受试者的猜想及其它心理作用而影响结果的准确性。(5)tt基因型的阈值范围为1-6号液,Tt基因型的阈值范围为7-10号液,TT基因型的阈值范围为11-14号液,根据受试者最初的觉察苦味溶液的编号,而查出相应的基因型。[实验注意事项]
:在于溶液的配制一定要严格、准确,使用的器皿要干净,水可以用市场买的纯净水来代替蒸馏水;在品尝试剂的时候最好能做双盲测试,排除心理因素,这样的数据更可靠。[作业]
:1、根据一个实验班的测定结果,求出基因T和t的频率以及群体TT、Tt、tt基因型频率。T的基因频率p=(2xTT+Tt)/(2x个体总数)t的基因频率q=(2xtt+Tt)/(2x个体总数)根据Hardy-Weinberg定律公式:p2+2pq+q2=1TT=p2
Tt=2pqtt=q21.结果统计:
tt基因型的范围为1-6号,
Tt基因型的范围为7-10号,TT基因型为11-14号。
2.T和t的基因频率计算
T基因频率:p=(32+15*2)/2*(7+32+15)=0.574t基因频率:q=(7*2+32)/2*(7+32+15)=0.426
3.平衡群体基因型频率的计算
按Hardy-Weinberg定律公式:p2+2pq+q2=1,得:
TT:p2=0.574*0.574=0.33
Tt:2pq=2*0.574*0.426=0.49
tt:q2=0.426*0.426=0.18
4.卡方(χ2)检验
假设我们所在班级的群体是一个遗传平衡群体,检测各基因型的理论预期值与实际测得值之间的吻合程度进行
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