标准解读
《GB/T 40186-2021 微生物诱变育种致遗传物质损伤强度测定 Umu法》是一项国家标准,规定了使用Umu测试方法来评估化学物质或环境因素对微生物遗传物质造成的损伤程度。该标准适用于研究化学品、药物、食品添加剂等物质的潜在遗传毒性。
Umu试验基于沙门氏菌中的umuC基因启动子与报告基因(如lacZ)融合的构建体,在存在诱导剂的情况下,umuC基因表达增加,从而通过检测β-半乳糖苷酶活性的变化间接反映DNA损伤情况。此方法能够快速、灵敏地评价待测物是否具有诱导细菌突变的能力,是传统Ames试验的一个补充手段。
按照该标准执行时,首先需要准备实验所需的试剂和材料,包括含有umu测试系统的指示菌株、待测样品溶液及对照品等;接着按照指定步骤进行培养,并在一定条件下添加待测物质;最后通过测量特定时间点下细菌中β-半乳糖苷酶活性水平的变化来判断其对遗传物质的影响程度。
整个过程中需要注意控制好各项条件参数以确保结果准确性,比如温度、pH值以及接种量等都应严格遵循文件给出的要求。此外,对于不同类型的样本可能还需要采取相应的预处理措施,比如有机溶剂溶解或者稀释至适当浓度后再加入到反应体系中去。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2021-05-21 颁布
- 2021-12-01 实施
文档简介
ICS07080
A21.
中华人民共和国国家标准
GB/T40186—2021
微生物诱变育种致遗传物质损伤强度
测定Umu法
Determinationofgeneticmaterialdamagestrengthformicrobialmutation
breeding—Umumethod
2021-05-21发布2021-12-01实施
国家市场监督管理总局发布
国家标准化管理委员会
GB/T40186—2021
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由中国标准化研究院提出并归口
。
本标准起草单位清华大学洛阳华清天木生物科技有限公司华南理工大学中国标准化研究院
:、、、。
本标准主要起草人张翀邢新会李梅剪兴金王立言郭肖杰张乐乐李爽马爱进
:、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T40186—2021
微生物诱变育种致遗传物质损伤强度
测定Umu法
1范围
本标准规定了用生物遗传毒性测试方法测定微生物诱变育种致遗传物质损伤强度的方法
(umu)。
本标准适用于利用测试法测定诱变育种致微生物遗传物质损伤强度
umu。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
分析实验室用水规格和试验方法
GB/T6682
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件
。
31
.
诱变mutagenesis
通过人为的措施诱导遗传物质产生突变
。
32
.
遗传物质损伤geneticmaterialdamage
化学或物理诱变源对遗传物质分子结构的改变
。
33
.
应急反应SOSresponse
当细胞发生脱氧核糖核酸损伤时产生的一种应激响应机制
(DNA),。
注在原核生物中主要受应急反应系统调控调控超过个基因的表达来应对损伤
:(SOSresponse),40DNA。
34
.
遗传物质损伤强度strengthofgeneticmaterialdamage
化学或物理诱变源对遗传物质分子结构改变程度的大小
。
注由于当细胞受到损伤时会发生应急修复修复使其以突变为代价继续存活下去常用修复强
:DNA(SOS),,SOS
弱代表遗传物质损伤强度
。
35
.
umu测试法umutest
一种将编码聚合酶中重要组分的umuC基因与编码β半乳糖苷酶的lacZ基因融合导入
DNAV-,
到鼠伤寒沙门氏菌Salmonellatyphimurium中通过检测β半乳糖苷酶活性来测定的诱导强度
(),-
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