标准解读

《GB/T 40174-2021 工具酶纯度的检测方法》是一项国家标准，旨在为工具酶纯度的测定提供标准化指导。该标准适用于各种工具酶，包括但不限于限制性内切酶、DNA聚合酶等生物技术领域中常用的酶类。

根据该标准文件，工具酶纯度的检测主要通过电泳分析法来进行，具体涵盖了SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳）和HPLC（高效液相色谱）两种技术手段。其中，SDS-PAGE被广泛用于蛋白质分离与鉴定，能够直观地展示出样品中不同分子量蛋白条带的情况；而HPLC则是一种更精确的方法，可用于定量分析目标酶及其杂质成分。

在执行过程中，首先需要准备相应的试剂及仪器设备，并按照规定条件制备待测样品。对于采用SDS-PAGE技术的情况，要求使用适当浓度的凝胶系统对样品进行处理，随后通过染色或银染等方式使条带显现出来，最后基于条带强度对比来评估目标酶的纯度水平。如果选择HPLC作为检测手段，则需设置合理的流动相组成、流速以及柱温等参数，确保获得准确可靠的测试结果。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2021-05-21 颁布
  • 2021-12-01 实施
©正版授权
GB/T 40174-2021工具酶纯度的检测方法_第1页
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文档简介

ICS07080

CCSC.27

中华人民共和国国家标准

GB/T40174—2021

工具酶纯度的检测方法

Puritydetectionmethodofreagentenzymes

2021-05-21发布2021-12-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T40174—2021

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由全国工具酶标准化工作组提出并归口

(SAC/SWG11)。

本文件起草单位福建南生科技有限公司夏禾深圳生物技术有限公司苏州坤琪生物科技有限

:、()、

公司上海鹰姿生命科技有限公司雷谷厦门生物医药有限公司福建华灿制药有限公司厦门大学

、、()、、、

安琪酵母股份有限公司山东大学北京化工大学复旦大学中国科学院微生物研究所深圳华因康基

、、、、、

因科技有限公司

。

本文件主要起草人黄发灿詹学雄郑登忠赵晶朱力钟江张永有姚鹃陈秀兰陈劲春刘文军

:、、、、、、、、、、、

郭延巍

。

Ⅰ

GB/T40174—2021

工具酶纯度的检测方法

1范围

本文件描述了工具酶纯度检测方法的术语和定义原理试剂或材料仪器设备样品制备试验步

、、、、、

骤结果计算及质量控制

、。

本文件适用于工具酶纯度的检测

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

电泳装置

YY/T0087

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

工具酶纯度purityofreagentenzymes

目标工具酶在样品总蛋白质或固含物中所占的质量百分比

。

32

.

蛋白质含量contentofprotein

样品经福林酚法测定出每毫克或每毫升样品中的蛋白质所占的质量

。

33

.

固含物含量contentofsolid

样品烘干后获得的无水固体物质在每毫克或每毫升样品中所占的质量

。

4原理

用牛血清白蛋白标准品作对照对样品经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳后的胶带进

,(SDS)-

行扫面再进行灰度值计算获得样品中目标工具酶的质量再采用福林酚法测定样品总蛋白质的质量

,,,

或用炽灼残渣检查法测定样品固含物含量从而计算出工具酶纯度

,。

5试剂或材料

除非另有规定所用的试剂均为分析纯水为规定的二级水

,,GB/T6682。

51碱性铜溶液

.

称取氢氧化钠碳酸钠加水使溶解作为甲液取酒石酸钾

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