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文档简介
试验一 胞间连丝的观看一、试验目的:观看植物细胞间的胞间连丝,进一步细胞间的物质运输与信号传递起桥梁作用。二、试验用具:1、器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子等三、试验内容:1、红辣椒表皮细胞临时装片制作:观看胞间连丝,剪取一小块红辣椒,用小刀留神刮除果肉,留下一层极薄的表皮,置于载玻片上,滴一滴清水,盖盖片,吸水后即可。2、玉米籽粒糊粉层临时装片制作:玉米籽粒用镊子剥去表皮后,露出糊粉层,制把切好的薄片置于载玻片上,加一滴清水后盖片,即可观看。3、柿子胚乳细胞永久装片的观看。四、留意事项:光线不要太亮五、作业:1、完成试验报告,并绘胞间连丝图。2、胞间连丝属于哪种细胞连接,有何生物学功能?试验二植物细胞原生质流淌的观看一、试验目的在活细胞中,原生质流淌是细胞活力强弱的重要指标。通常认为,原生质流淌是原生质中微丝肌动蛋白与肌球蛋白相互滑温度、渗透压、机械损伤等的影响。通过试验响因素。二、试验用品:1、材料:黑藻2、器材:显微镜、载玻片、盖玻片等三、试验内容:1、黑藻叶片细胞质流淌的观看取黑藻叶片制作临时装片并观看,留意流速,并记录。2、用温水浸泡,再观看其流淌速度有无改变,并记录。3、用照明灯照耀一段时间后再观看其流淌速度有无转变,并记录。四、作业:1、如何理解细胞原生质流淌的原理?2、细胞质环流有何特点?3、图示细胞质环流。一、试验原理:活体染色是指对生活有机体的细胞或B可专一性地对线粒体进展超活染色,这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用,使染料始终保持氧化状态〔即有色状态〕呈现蓝悬浮绿色,而线粒体四周的细胞质中,这些染料被复原为无色的色基。二、试验器材:詹纳斯绿B三、试验内容:〔一〕线粒体超活染色1、取清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金2B染色液。2、用牙签取口腔上皮细胞放置于染色液的15分钟〔留意:染色液不能枯燥〕盖片,吸出多余的染色液即可观看,线粒体为蓝绿色颗粒或短棒状的构造。〔二〕永久装片的观看1、线粒体 2、中心体四、作业:试验报告、并绘线粒体形态图试验四 叶绿体的分别与观看一、试验原理:组织匀浆后悬浮在等渗介质中进展差速离心,是分别细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小,外形和密度,也同离心力以及悬浮介质的粘度有关。在肯定的离心场中,同一时间内,密度不同,大小不同、沉降速度不同,细胞组分。二、材料与用具:离心机、组织匀浆器、天平、纱布、菠菜等三、试验内容:1、选取颖嫩菠菜叶,洗净擦干后去除叶30g150ml0.35mol/LNaCl溶液中装入研钵捣碎;2、将匀浆用纱布过滤于烧杯中;34ml1000r/min2分钟,弃沉淀;4、将上清液在3000r/min下离心5分钟,弃上清,沉淀即是叶绿体;50.35mol/L氯化钠溶液悬浮。6、取叶绿体悬液制临时装片观看。四、作业:完成试验报告,并绘图。试验五 细胞膜的通透性一、试验目的:1、观看细胞膜的通透性及各类物质进入细胞的速度。2、了解细胞膜通透性的一般规律。二、试验原理:放在低渗溶液中,水分子会大量渗到细胞内,使细胞胀破,血红细胞释放到介质中,的透性不同,有的溶质可以渗入,有的溶质渗透压,所以促进水分进入细胞,随着水分的不断进入红细胞最终裂开,即引起溶血。不同。因此,发生溶血现象所需时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。三、试验用品:剪刀,试管等四、试验材料:兔血五、试验步骤:1、制备兔红细胞悬液取兔静脉血20ml〔加抗凝剂3.8%柠檬酸钠,以1份兔血加10份0.17mol/L钠溶液配制兔红细胞悬液。2、低渗溶血的观看13mL蒸馏水,再参加0.5ml红细胞悬液,观看溶液颜色的变化,100%红细胞溶血。3、兔红细胞的渗透性取试管1支,参加0.17mol/l氯化钠3mL,再参加0.5ml象?分析缘由。取试管9支,编号后分别参加其他9种等渗溶液各3ml,再逐一参加0.5ml红细胞悬液,分别登记时间,轻轻摇动,观看溶某种溶液的溶血时间等于自参加红细胞悬液到溶液变成红色透亮所需的时间。4、溶血结果推断:不溶血:液体分两层,上层浅黄色,下层红色不透亮,镜检红细胞完好。,镜检红细胞有局部裂开。完全溶血:液体变红而透亮,镜检红细胞全部呈碎片。六、作业:1、统计不同等渗溶液的溶血状况。2、争论溶血试验在争论中应用的可能性。试验六 相差显微镜观看口腔上皮细胞带相板的物镜,合轴调中望远镜及滤色片,这些特别装置能使活细胞或未经染色的标生相位差,然后利用光的衍射和干射原理,把相位差变成振幅〔明暗差〕之差,使人的肉眼能够辩认出来。二、试验用具:相差显微镜、一般显微镜、解剖器具三、试验内容:理滤光片、调中望远镜2、口腔上皮细胞临时装片的制备与一般光镜下的观看。3四、留意事项:制备样品时,防止产生气泡五、作业:调好口腔上皮细胞的相差像后,比照一般明视野的像和相差像,画图说成像特点。试验七细胞荧光染色观看与荧光显微镜的使用一、试验目的:1、初步了解荧光显微镜的根本组件、位置和根本原理。2、学习细胞荧光染色的根本方法。二、试验用具:12、用具:荧光显微镜、镊子、盖玻片等三、试验内容:1P8荧光:物质中电子吸取光的能量由低能转变为高能状态,再回到低能状态时释放出的光。荧光显微镜组件:光源、激发滤片、双色反射镜、阻断滤片、物镜、目镜等。荧光显微镜的成像原理,2蛙血——涂片——晾干——甲醇固定,10分钟——1%分钟——水洗——枯燥3撕取内表皮——铺展于玻片上——晾干——1%分钟——水洗——枯燥4撕取绿色植物叶表皮细胞制作临时装片,即可观看。四、留意事项:1、荧光显微镜要在光线尽量暗的环境下观看。2五、作业:简述荧光显微镜的主要部件和根本光路。试验八细胞融合一、试验目的:1PEG诱导细胞融合的根本原理。2、通过试验,初步把握细胞融合的技术。二、试验原理:两个或两个以上的细胞合成为一个双核杂交。常用的诱导方法有病毒诱导融合、化融合,进而细胞质沟通,形成一个大的双核或多核融合细胞。三、试验材料与用具:P89四、试验步骤:1、在公鸡翼下静脉抽取2mL鸡血,参加盛有8mL的Alsever液中,使血液与Alsever1:4,混匀。21ml4ml0.85%生理盐水,充分混匀,800r/min离心3min,弃上清,重复上述条件离心两次。最终弃上GKN4ml离心,1000r/min,5min。3、弃上清,加GKN液制成10%细胞悬液。41ml于离心管中,放入37℃水浴中预热,同时将50%PEG液20min。5、200.5ml50%PEG溶液逐1mL细胞悬液中,边加边摇匀,然后放入37℃水浴中保温20min。620GKN8mL,静止于水浴中20min。7、800r/min离心3min,弃上清,加GKN1次。8、弃上清,参加GKN液少许,混匀,取少量制临时装片观看细胞融合状况。五、作业:1、绘制细胞融合图像。2、分析试验中遇到的问题及其解决方法。试验九 植物凝集素对红细胞的凝集作用一、试验目的:1、学习植物凝集素的提取方法;2、观看红细胞的凝集现象。二、试验原理:细胞外被是指细胞质膜外外表的一层黏多糖物质,它在细胞间的联系和识别、细胞发挥重要作用。向膜的外表,它们是细胞识别、细胞免疫及一类含糖的,并能与糖专一结合的蛋白质,集素使细胞凝集是由于它与细胞外表的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果。凝集素与糖分子结合有肯定的专一性和结合价,并与细胞膜上受体的分布有关。三、试验用具:离心机、天平、显微镜、试管、注射器等四、试验材料:土豆块茎或芸豆粒,家兔1只五、试验步骤120g,加100mlPBS2出的粗提取液过滤,即为土豆凝集素提取液。2
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