体内药物分析中样品预处理技术

体内药物分析中的样品预处理技术【摘要】本综述主要阐述近年来体内药物分析中样品预处理技术的几种常用方法技术，包括有机破坏、分离蛋白法液—液萃取法、固相萃取法固相微萃取技术和超临界流体萃取技术等。关键词】样品预处理技术；有机破坏；分离蛋白法；液—液萃取法；固相萃取法；固相微萃取法；超临界流体萃取法；体内药物分析【正文】在体内药物分析中常采用的生物样品包括血液、尿液、唾液、乳汁、精液、泪液、胃液、胆汁、粪便等样品。其中最常用的是血浆或血清，因为二者更能体现药物浓度与治疗作用之间的关系。测定体内药物及其代谢物时，常常不能进行直接测定，需要实施分离、净化、浓集、化学衍生等，这些处理技术即为样品预处理技术。样品预处理是体内药物分析中极为重要的环节，也是最困难，最繁琐的工作。在分析过程中如何方便、快捷地对样品进行预处理，将少量的药物从大量复杂的生物基质中分离出来，以便准确定性、定量，是体内药物分析面临的首要问题。常用的样品预处理技术有有机破坏法、蛋白分离技术、萃取技术等。近几年研究表明：采用固相微萃取技术及超临界流体萃取技术处理生物样品具有快速简便，选择性好、回收率高、无需使用大量有机溶剂等优点，因此成为当今体内药物分析中最有发展潜力的两种样品预处理技术。1.有机破坏技术有机破坏包括湿法破坏、干法破坏以及氧瓶燃烧法三种技术。湿法破坏是以硝酸为消解液，与生物样品共热，生物样品被氧化破坏游离出待测组分；干法破坏是将生物样品高温炽灼，生物介质被灰化，经水或酸溶解后测定；氧瓶燃烧法是采用燃烧分解有机物的简单技术，能将待测元素定量分解成离子型。2．分离蛋白质法蛋白质分离技术包括容剂解法、中性盐盐析法、强酸破坏、金属盐沉淀、超滤法、酶解法、加热法使蛋白质变性沉淀等。前两者主要是破坏蛋白质表面电荷及水化膜是蛋白质沉淀；金属盐能与蛋白中的特定离子生成沉淀达到分离效果；超滤法是运用半透膜的原理来分离蛋白质；待测组分对热稳定时可采用加热方法是蛋白质变性，从而与待测组分分离。3．分离、纯化与浓集技术主要采用萃取技术达到预处理的目的。常用的萃取方式有：液—液萃取法、固相萃取法、固相微萃取法、超临界流体萃取法等。3・1液一液萃取法（LLE）是利用待测药物与内源性干扰物油水分配系数不同而进行的液相分离技术。多数药物是亲脂性的，而血样或尿样等内源性物质多数是极性强的水溶性物质，用有机溶剂可将其萃取分离。3・2固相萃取法（SPE）SPE又称液一固萃取技术，其原理是将不同填料作为固定相装入微型小柱，当含有药物的生物样品通过小柱时，由于受到吸附、分配、离子交换或其他亲和力作用，药物或干扰物质被保留在固定相上，用适当溶剂洗除干扰物质，再用适当溶剂洗脱药物。3.3固相微萃取(SPME)是80年代后期发展起来的样品预处理方法，其装置简单，操作方便，已实现自动控制，适用于现场分析。它用一个类似于气相色谱微量进样器的萃取装置，从样品中萃取出待测物质，并直接与气相色谱(GC)或高效液相色谱(HPLC)联用，在进样口(GC即为气化室)将萃取的组分解吸附后进行色谱分离检测。SPME集萃取、浓缩、进样于一身，极大地提高了分析速度。萃取模式可分为直接固相微萃取和顶空固相微萃取两种。直接固相微萃取将涂有高分子固相液膜的石英纤维直接伸入样品基质中进行萃取，经过一定时间达到分配平衡，即可取出进行色谱分析。顶空固相微萃取则将石英纤维放在样品溶液上方进行顶空萃取，避免了基质的干扰，提高了分析速度。3・4超临界流体萃取法超临界流体(SF)是指温度与压力均在其临界点之上的流体在研究过的超临界流体体系中,C02因其价格低廉且无毒，应用最为广泛。超临界流体同时表现出液体与气体的优点，既有与液体相近的密度，又有与气体相近的粘度及高的扩散系数。故具有很高的溶解能力和良好的流动、传递性能，可代替传统的有毒、易挥发、易燃的有机溶剂。超临界流体萃取技术(SFE)对热敏感物质和复杂样品中微量组分萃取的有效性已引起人们关注，目前已用于体内分析。【结束语】综上所述，样品预处理技术是体内药物分析中十分关键的操作技术之一。随着科学技术的发展，样品预处理技术也得到不断的改进。然而，寻找快捷安全、易于实现自动化的新型样品预处理技术，在体内药物分析中也显得尤为重要。可见，样品预处理技术有着良好地发展前景。参考文献童珊珊，余江南，刘文英，安登魁，等.体内药物分析中的样品预处理技术J].药学杂志，2001,1(25)李好枝.体内药物分析.北京：中国医药科技出版社，2003徐铭，李范珠。微透析技术及其在体内药物分析中的应用.药学杂志，2006,34(2):165-168杨新磊，罗明