如何通过实验室技术鉴定临床有意义

如何通过实验室技术

鉴定临床有意义的血型抗体，

确保安全输血

莫秋红南宁输血医学研究所

临床有意义的抗体临床有意义的抗体：使红细胞寿命缩短，短时间内大量红细胞破坏，引起病人发生不良反应，如溶血性输血反应、新生儿溶血病。在37℃中和间接抗球蛋白试验（IAT）中有反应。南宁输血医学研究临床有意义的抗体自身抗体—温自身抗体型、冷自身抗体型同种抗体—ABO、Rh等抗体南宁输血医学研究临床有意义的血型抗体英国血液学标准委员会BritishCommitteeforStandardsinHaematology

BCSHSecretary,BritishSocietyforHaematology,Milkins.etal,2012,Guidelinesforpre-transfusioncompatibilityproceduresinbloodtransfusionlaboratories南宁输血医学研究临床有意义的血型抗体通常认为在25℃以下不反应的抗体，是没有临床意义的抗体，如抗-P1是常见冷抗体,但也有极少抗-P1在37℃反应,并引起严重的急性或迟发性输血反应。抗体没有临床意义是相对的。南宁输血医学研究易产生同种抗体的病人反复输血的病人，如地中海贫血，再生障碍性贫血，阵发性夜间血红蛋白尿（PNH）,骨髓增生异常综合症（MDS）等。具有妊娠史的病人。南宁输血医学研究抗体筛查和抗体鉴定目的原理试剂和材料实验方法结果的解释抗原鉴定南宁输血医学研究抗体筛查和抗体鉴定目的发现有临床意义的血型抗体，为患者提供相应抗原阴性的血液，减少或避免同种抗体引起的输血反应。南宁输血医学研究抗体筛查和抗体鉴定原理运用已知血型抗原的O型红细胞,检测病人血清中的未知抗体。南宁输血医学研究试剂和材料

筛选细胞通常由2或3个人份O型红细胞组成，要求DAT阴性，单人份/瓶，2-5%的红细胞悬，配有反应格局表。

谱细胞（Panelredcell)是由不少于8人份O型红细胞配套组成的红细胞试剂，要求DAT阴性，单人份/瓶，2-5%的红细胞悬液,配有反应格局表。南宁输血医学研究试剂和材料筛选细胞和谱细胞包含抗原要求：1,8-16种不同常见抗原：D,C,c,E,e,K,k,Fya,Fyb,Jka,Jkb,M,N,S,s,P1,Lea,Leb2,至少含有一个纯合子表达的抗原：Fya,Fyb,Jka,Jkb,S,s,3,Dia,Dib南宁输血医学研究试剂和材料盐水、白蛋白、低离子介质（LISS）、酶、聚乙烯乙二醇（PEG）、聚凝胺（Polybrene）、抗球蛋白等试剂和微柱凝胶卡等，可按抗体的血清学特征和实验的具体条件选择。南宁输血医学研究实验方法试管技术（盐水、白蛋白、Liss、酶、和PEG、抗球蛋白、凝聚胺）微柱凝胶技术Solid-phasesystems(SP)固相凝集技术Erythroctye-magnetizedtechnology(EMT)红细胞磁化技术南宁输血医学研究实验方法的比较微柱凝胶技术，灵敏度高，优于试管的IAT，不用洗涤细胞，操作简单，可实现自动化；但是对于假阳性和非临床意义的抗体检测率也高，并且价格昂贵。试管IAT技术的特异性最好(Weisbachetal.,2006)，并且价格便宜；缺点是操作繁琐，耗时长。南宁输血医学研究微柱凝胶技术南宁输血医学研究实验方法的比较58个AABB免疫血液学参比实验室常用的主要的方法中，49个实验室用试管法，7个用凝胶法，2个用固相法。对于参比实验室，试管凝集法是检测临床有意义的抗体首选的方法。利用多种实验技术，相互补充。

（Haywood.etal.2011.Determinationofoptimalmethodforantibodyidentificatoninareferencelaboratory）南宁输血医学研究结果的解释

阴性排除法,通过查看无反应的红细胞的抗原谱，可排除一些特异性抗体，同时可以估计有可能存在的抗体,以防有临床意义的抗体漏检，因为一个阳性反应格局可能是两种或多种抗体共同存在的格局。南宁输血医学研究抗原鉴定病人血清中检测出一种抗体或多种抗体，红细胞上应该不携带相应的抗原。如病人血清中含有抗-M，红细胞上应不带有M抗原。用血型结果，可排除一些抗体,并核对抗体鉴定的结果。南宁输血医学研究流程抗体筛查抗体筛查抗体鉴定抗原鉴定抗体特异性阳性阴性排除明确临床意义有相应抗原阴性的血液判断南宁输血医学研究案例1病人血型：CCDEe献血者血型ccDEE,或ccDEe南宁输血医学研究抗体筛查的假阴性假阴性：交叉配血不合或发生溶血性输血反应，抗体筛查的结果为阴性。南宁输血医学研究假阴性原因1，人员操作过程、记录错误、标本错误；2，低频抗原，红细胞不含有某些抗原；3，陈旧，抗原性减弱；4，弱抗体，如抗-Jka，(Jka+Jkb-)细胞w+，(Jka+Jkb+)细胞，无反应；5，补体抗体，需要新鲜的血清；6，实验方法的灵感度不够高。南宁输血医学研究复杂的反应格局（1）1,所有的细胞都凝集，强弱一致原因:自身免疫性抗体；针对高频抗原的抗体或抗-HI；实验方法的特异性低（如）LISS、PEG、酶的非特异性抗体。南宁输血医学研究解决方法（1）1,所有的细胞都凝集，强弱一致方法:自身对照；自身和DAT阴性，可能是高频抗原的抗体，如抗-HI，常见于非O型的病人，排除方法：血浆与病人血型相同的细胞不反应或弱反应（A型、B型反定型细胞）；非LISS、PEG、酶的IAT实验方法。南宁输血医学研究复杂的反应格局（2）2,反应格局不符合任何一个单一抗体的格局，凝集强弱不一原因1，2种或以上的混合抗体；2，抗原强弱不一，纯合子和杂合子；3，细胞过于陈旧，抗原减弱；4，实验方法的灵敏度不高。南宁输血医学研究解决方法（2）

2,反应格局不符合任何一个单一抗体的格局，强弱不一样方法1，选择某一抗体的抗原阴性，其他抗体的抗原阳性的谱细胞来排除其他抗体；2，多个血型系统的抗原鉴定,排除一些抗体；3，