半衰期测定-任衍开

磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定新乡医学院三全学院任衍开一、实验目的1.掌握磺胺类药物血浆药物浓度的测定方法2.掌握药物半衰期的计算方法3.了解药物血浆半衰期测定及计算的临床意义二、实验原理1.多数药物在体内按一级动力学规律消除,静脉注射后，如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其时量关系常呈直线。

2.药物血浆半衰期（halflife，T1/2）为：Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1二、实验原理3.呈色原理：

磺胺类药物在酸性溶液中，与亚硝酸钠起重氮反应，生成重氮盐。此重氮盐在碱性溶液中与酚类化合物起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。偶氮化合物的显色深浅与磺胺的浓度有关。

三、实验动物家兔（体重2.5Kg左右）四、实验器材和药品1.器材：分光光度计、离心机、兔手术台、手术器械、动脉夹、动脉插管、磅秤、注射器、移液管、离心管、试管等

分光光度计离心机四、实验器材和药品2.药品：20%磺胺嘧啶钠溶液、1%肝素钠溶液、

0.02%磺胺嘧啶钠溶液（标准液）、7.5%三氯醋酸溶液、0.5%亚硝酸钠溶液、0.5%麝香草酚溶液、20%NaOH溶液、20%乌拉坦溶液、蒸馏水五、实验步骤（一）动物基本操作（二）测定液和标准液的配制（三）比色管的配制（四）比色与计算（一）动物基本操作(血液标本的采集）1.抓取家兔1只，称重，用20％乌拉坦溶液5mL/kg行耳缘静脉麻醉，然后固定于手术台上。2.气管插管手术区剪毛，沿正中线剪开颈部皮肤，钝性分离皮下组织及肌肉，找出并游离气管，穿线备用。确定甲状软骨的位置，在其下3——4环装软骨处切一倒“T”形切口，插管固定。(一)动物基本操作(血液标本的采集）3.游离颈总动脉：分开肌肉层后，找出一侧颈总动脉并分离约2～3cm左右，在其下穿线两根线备用。（一）动物基本操作4.全身肝素化：耳缘静脉注射肝素5ml。线1结扎远心端，待血管充盈后，动脉夹夹闭近心端远心端剪一“V”形口，动脉插管，线2结扎固定（二次固定）5.动脉插管（肝素润洗）（一）动物基本操作6.取血：打开动脉夹取空白血样2ml置于用肝素浸过的试管中待用；然后由耳缘静脉注射20％磺胺嘧啶钠溶液2ml/kg，于给药后10min及40min各取血2ml，分别置于同上试管中待用（二）测定液和标准液的配制测定液的配制：用1ml注射器抽取上述血液各0.2ml，置于已盛有5.8ml

7.5％三氯醋酸溶液的玻璃试管中，充分摇匀，然后以1500r/min，离心5min待用。标准液的配制：取0.02％磺胺嘧啶钠溶液0.2ml，加入已装有5.8ml

7.5％三氯醋酸溶液试管中，摇匀待用。成分空白管（mL）标准管（mL）测定管（mL）给药前给药10min给药40min测定液//1.51.51.5标准液/1.5///蒸馏水1.5////0.5％NaNO2

0.50.50.50.50.50.5％麝香草酚1.01.01.01.01.0（三）各比色管的配制蒸馏水0.02%NaSD②1组标本各取0.2ml加入2组①2组各试管先加三氯乙酸5.8ml③2组测定液各取1.5ml清液加入3组④加0.5mlNaNO2⑤加1ml麝香草酚

标本（1组）

测定液（2组）

比色液（3组）空白管标准管给药前药后10′药后40′取13支试管分别用记号笔标记（四）比色与计算用722型分光光度计进行比色，选波长520nm，以空白管调“0”点，读出标准管及各测定管光密度，并记录。

六、实验结果标准管测定管给药前给药后10min给药后40min光密度值1.各比色管的光密度值六、实验结果2.计算Ke及T1/2Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1CNaSD=C标/OD标×（OD给药后-OD给药前）

七、注意事项1.麻醉时一定把握好速度。2.每次取血之前要先将残血放掉。3.各盛血的试管及动脉插管