朱虹课件：培养液中酵母菌种群数量的变化

培养液中酵母菌种群数量的变化探究：讨论探究：1.探究实验的一般步骤是什么？2.本实验的实验材料有哪些？3.实验步骤有哪些？4.该实验的注意事项有哪些?5.影响酵母菌种群数量增长的因素有哪些？探究11．提出问题：2．作出假设：3．设计实验：4．进行实验：5．分析结果：

6．得出结论：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长，随着时间的推移，由于资源和空间有限，呈“S”型增长。连续培养7天，每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度各小组汇报实验结果，结合前4天的结果，画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长，但随着时间的推移，由于资源和空间有限，将呈“S”型增长，并最终将全部死亡。实验材料：1.无菌培养液2.酵母菌3.血球计数板4.显微镜酵母菌:1.酵母菌是原核生物还是真核生物？与乳酸菌的主要区别是什么？2.酵母菌的生长特点是什么?3.酵母菌的呼吸方式是？写出相关的方程式？4.酵母菌的生殖方式是什么？酵母菌1.酵母菌是单细胞真核生物,2.生长周期短，增殖速度快，3.既可有氧呼吸,又可无氧呼吸,还可以用酵母菌作为实验材料研究（探究酵母菌的呼吸方式，判断细胞的死活探究膜的透性:）4.主要是出芽生殖(有丝分裂)酵母菌的计数（1）计数工具——血球计数板

每个计数板有两个计数室（1个计数室即一个大格）。血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器计数室计数室（中间大方格）的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为______mm3，合_________mL。1mm0.11×10-4血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器计数室计数室分为25中格（双线边）每一中格又分为16小格计数室是由___________个小格组成25×16=400计数室计数室分为16中格（双线边）每一中格又分为25小格计数室是由___________个小格组成16×25=400取样方法:25个中格每个中格有16个小格16个中格每个中格有25个小格*********抽样检测（书上68页）5×16=80个小格抽样检测：4×25=100个小格实验步骤：①将10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入3支试管中；②将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；③将试管在28℃条件下连续培养7d；④每天固定时间（即相同时间）取样计数酵母菌数量，每个样品计数三次，取平均值，连续7天；怎样计数?估算公式?⑤分析结果，得出结论。酵母菌的计数的操作震荡试管：使酵母菌在培养液中分布均匀。稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释；若菌液不浓，可不必稀释。加样品：在清洁干燥的血球计数板上先盖上盖玻片，再用无菌滴管将稀释的酵母菌液滴于盖玻片边缘，让培养液沿缝

隙自行渗入计数室。注意不可有气泡产生。多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部。再将血球计数板置于显微镜下进行计数。显微计数：根据血球计数板的规格，每个计数室选取5个（或4个中方格中的菌体进行计数。当菌体数太多，数不清时，事先要稀释培养液）例1：血球计数板计数室（大方格）规格为1mm*1mm,盖玻片下培养液厚度为0.1mm,若一个小方格内酵母菌有a个，则10ml培养液中有多少个酵母菌？若稀释10倍后，一个小方格中的酵母菌有b个，则10ml培养液中有多少个酵母菌？提示：先算每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？酵母菌的计数（2）计算：

每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？

酵母细胞个数/mL=所数小方格中细胞总数x400x104x稀释倍数所数的小方格数例3:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm3，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先

后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有

个。例2:在用血球计数板（2mm×2mm方格）对某一稀释50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16，据此估算10mL培养液中有酵母菌

个。2x1072×108稀释例4

检测员将1mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0．1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻

个／mL。5n×105

第1天第4天第6天第7天死亡第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1组第2组第3组------第n组平均值酵母菌数量变化记录表酵母菌数量变化记录表计数时有哪些注意事项？①从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次；如果酵母菌浓度过大，应先稀释。②对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取相邻两边及夹角计数；③对于已经出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算；已死亡的酵母菌不计数※。④每个样品一般计数三次，取其平均值。培养液中酵母菌种群数量的变化该实验的注意事项：1.每天计数的时间要固定（即相同）。2.进行计数前，应先将试管摇匀，目的是使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误差。（即不能直接从静置的试管中取样计数）3.显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。4.若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液稀释一定倍数后再计数。5.本实验无对照实验，酵母菌每天的数量变化在时间上已形成前后对照。6.本实验需要重复实验或重复组，使结果更准确。7.血球计数板使用后的清洗，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和自来水冲洗的方法清洗,然后自行晾干。死亡在计数前，还应有哪些步骤？需注意些什么？培养液配制灭菌接种培养无菌操作培养条件影响酵母菌种群数量的变化因素有:

种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等“S”型曲线有一个K值，即环境容纳量。

种群数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）的影响。试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”，有人提出了新的问题，某同学按下表完成了有关实验。温度、营养物质对酵母菌生长的影响试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128以计数酵母菌为例

(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.

(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.

(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.

(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.

血球计数板的使用(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.

(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和左方线上的酵母细胞(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式

(1)16格×25格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数

(2)25格x16格的血球计数板计算公式:

酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数

怎样进行酵母菌的计数？

对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算计算中的酵母菌总数，盖玻片下，培养液厚度为0.1mm，可算出10ml培养液中酵母菌总数的公式：2.5×104x(x为小方格内酵母菌数)

从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？本探究需要设置对照吗？如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作；如果不需要，请说明理由。需要做重复实验吗？目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差。不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化，只要分组实验，获得平均数值即可。

不用重复，只要分组实验获得平均值即可。5、怎样记录结果？记录表怎样设计？如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取怎样的措施？第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1组第2组第3组------第n组平均值摇匀试管取1mL酵母菌培养液稀释n倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以n×2.5×104，即为10mL酵母菌液中酵母菌个数。只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数。7对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？设计实验：A组为实验组，装培养液10mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度28℃。B组装培养液10mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度5℃，与A组形成温度条件对照。C组不装培养液，只装无菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28℃，