第十一章吩噻嗪类抗精神病药物分析

第十一章吩噻嗪类抗精神病

药物的分析吩噻嗪类药物分子结构中均含有硫氮杂蒽母核通常为－H、－Cl、－CF3、－SCH3等为具有2-3个碳链的二甲胺基，或为含氮杂环等一、基本结构第一节基本结构与主要性质典型药物分子结构盐酸异丙嗪典型药物分子结构盐酸氯丙嗪典型药物分子结构奋乃静典型药物分子结构盐酸氟奋乃静典型药物分子结构氟奋乃静典型药物分子结构盐酸三氟拉嗪典型药物分子结构盐酸硫利达嗪还原性UV、IR结构分析（1）三环共轭的大体系

硫、氮杂原子上未共用电子对与苯环形成p-

共轭，具有强紫外吸收1.硫氮杂蒽母核200300254205300～325紫外吸收光谱受取代基的影响，特别是S被氧化的程度不同，有不同的改变，在紫移的同时在270附近产生一新的吸收。270吩噻嗪吩噻嗪氧化产物300取代基：-X-SCH3、-COCH3（2）硫氮杂蒽环上硫原子为-2价，具有还原性，易氧化呈色。（3）硫氮杂蒽环上硫原子有两对孤对电子，易与金属离子络合呈色。2.取代基R：脂烃胺基、哌嗪基、哌啶基，具碱性R：卤素1.弱碱性二、主要理化性质具有弱碱性，极弱脂肪烃氨基、呱嗪及呱啶等衍生物所含氮原子碱性较强，可用于鉴别和含量测定2.易氧化性易被硫酸、硝酸、过氧化氢、三氯化铁氧化，可用于鉴别和含量测定，过程与产物比较复杂3.与金属离子配合呈色可与靶离子配合生成有色化合物，可用于鉴别和含量测定。氧化产物亚砜和砜无此反应机理4.紫外光吸收特性药物溶剂C(μg/ml)λmax(nm)A百分吸收系数盐酸氯丙嗪盐酸(9→1000)52540.46915306－－盐酸异丙嗪盐酸(0.1mol/L)6249－883~937奋乃静无水乙醇72580.65－盐酸氟奋乃静盐酸(9→1000)10255－553~593盐酸三氟拉嗪盐酸(1→20)10256－630盐酸硫利达嗪乙醇8264与315－－5.红外光吸收特性第二节鉴别试验化学法吩噻嗪类药物具有弱碱性、易氧化性、与金属离子配合呈色的特性可采用与生物碱沉淀剂、氧化显色反应、与钯离子配合呈色反应来鉴别本类药物化学法——与生物碱沉淀剂反应JP15盐酸氯丙嗪的鉴别方法三硝基苯酚沉淀、再用丙酮重结晶JP15盐酸氯丙嗪片的鉴别同上化学法——氧化显色反应常用氧化剂硫酸硝酸过氧化氢三氯化铁药物硫酸硝酸过氧化氢盐酸氯丙嗪－显红色，渐变为淡黄色－盐酸异丙嗪显樱桃红色，放置后颜色渐变深生成红色沉淀，加热即溶解，溶液由红色转变为橙黄色－奋乃静－－显深红色，放置后红色渐褪去盐酸氟奋乃静显淡红色，温热后变成红褐色－－盐酸三氟拉嗪－生成微带红色的白色沉淀；放置后，红色变深，加热后变黄色－盐酸硫利达嗪显蓝色－－化学法——与钯离子配合显色反应奋乃静绿色Cu焰色反应化学法——含卤素取代基的反应（如氟奋乃静等含氟有机药物）红色黄色显色反应化学法——含卤素取代基的反应与硝酸银的反应二氧化锰氧化反应化学法——氯化物的鉴别反应红外光谱法紫外可见盐酸氯丙嗪标准品对照硫氮杂蒽205nm254nm300nm光谱法TLCRf供试品斑点对照品斑点HPLC供试品对照品tR色谱法测定熔点其他方法第三节有关物质检查吩噻嗪类药物的有关物质主要包括：残留的原料及中间产物副产物药物的氧化产物检查方法高效液相色谱法（HPLC）薄层色谱法（TLC）一、盐酸氯丙嗪及其制剂的有关物质检查（一）合成路线与有关物质1、合成路线2、有关物质及其编号代码

残留的中间产物：

贮藏不当或存放时间过长而产生的有关物质：

（二）有关物质检查方法1、盐酸氯丙嗪的有关物质检查【示例11-23】ChP2010检查方法：HPLC高低浓度法色谱条件色谱柱：C8(0.25m4.0mm，5µm)流动相：乙腈-0.5%三氟乙酸(pH5.3)(50∶50)检测波长：254nm

判断标准：供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.5%)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(1.0%)。2、盐酸氯丙嗪(糖衣)片的有关物质检查【示例11-26】ChP2010检查法

检查方法：HPLC高低浓度对比法判断标准：供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.5%)。①采用过滤法排除片剂辅料的干扰；

说明：②取消了对杂质总量的控制，在一定程度上减弱了控制。第四节含量测定含量测定酸碱滴定法分光光度法HPLC法HPLC-MS酸碱滴定法非水滴定法乙醇-水溶液滴定法高氯酸+冰醋酸醋酐的作用温度的影响NaOH滴定法电位滴定法指示终点一、酸碱滴定法1.非水溶液滴定法【示例11-31】盐酸氯丙嗪的含量测定溶剂：冰醋酸与醋酐的混合溶液由于醋酐解离生成的醋酐合乙酰离子[CH3CO+·(CH3CO)2O]比醋酸解离生成的醋酸合质子[H+·CH3COOH]酸性强，更利于增强氯丙嗪的碱性，因此能够显著增大滴定突跃范围。滴定剂：高氯酸滴定液(0.1mol/L)指示终点方法：电位法指示电极：玻璃电极参比电极：饱和甘汞电极(玻璃套管内装氯化钾的饱和无水甲醇溶液)空白试验：一定程度上校正溶剂等对测定的影响高氯酸滴定液温度校正：①若滴定供试品与标定高氯酸滴定液时的温度差>10℃，应重新标定；②若≤10℃，则用下式校正：式中：0.0011为冰醋酸的膨胀系数；t0为标定高氯酸滴定液时的温度；t1为滴定供试品时的温度；N0为t0时高氯酸滴定液的浓度；N1为t1时高氯酸滴定液的浓度。【示例11-32】盐酸氯丙嗪注射液的含量测定（JP15）说明：通过碱化、有机溶剂提取游离碱氯嗪，排除了水的干扰(为减少水分对测定的干扰，在乙醚提取液中加入无水硫酸钠脱水)。例题：盐酸三氟拉嗪的含量测定：精密称取本品0.2089g，加无水甲酸l0ml与醋酐40ml溶解后，依照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1023mol/L)滴定，消耗高氯酸滴定液8.46ml，另取无水甲酸l0ml与醋酐40ml，同法测定，消耗高氯酸滴定液0.06ml，请计算盐酸三氟拉嗪的含量。每1ml高氯酸滴定液(O.1mol/L)相当于24.02mg的C21H24F3N3S．2HCI。

吩噻嗪类药物盐酸盐的水溶液显酸性，在乙醇-水溶液中，用氢氧化钠滴定液测定其含量。

反应体系中加入适量的盐酸，采用电位法指示滴定终点。

2.乙醇-水溶液中的氢氧化钠滴定法第一个等当点：

第二个等当点：

根据两个等当点间相应的氢氧化钠滴定液的体积，即可计算吩噻嗪类药物的盐酸盐的含量。

【示例11-35】盐酸氯丙嗪注射液的含量测定分光光度法直接分光光度法提取后分光光度法提取后双波长分光光度法二阶导数分光光度法纯度较高,杂质、辅料无干扰或干扰易排除测定此类药物制剂，可应用提取排除辅料干扰提取不能完全排除干扰，而药物的氧化物同样能被提取，这时可用在一定条件下可以方便地消除前两种药物中所产生的干扰钯离子比色法钯离子配位特性二、分光光度法1.直接分光光度法

本法适用于纯度较高、杂质及辅料无干扰或干扰易排除的吩噻嗪类药物的含量测定。【示例11-34】盐酸氯丙嗪(糖衣)片的含量测定（ChP2010）【示例11-35】盐酸氯丙嗪注射液的含量测定（ChP2010）2.提取后分光光度法

通过提取排除辅料等干扰以测定吩噻嗪类药物制剂【示例11-36】盐酸异丙嗪口服液的含量测定(USP32-NF27)提取方法：在碱性条件下采用三氯甲烷提取分离游离碱异丙嗪样品溶解：挥干三氯甲烷后，用稀硫酸溶解异丙嗪残渣测定：波长：298nm空白对照液：稀硫酸计算：式中：C(mg/ml)为对照品溶液的浓度；V(ml)为所取供试品的体积；AU和AS分别为供试品溶液及对照品溶液的吸光度。3.提取后双波长分光光度法

提取后分光光度法能够除去一些干扰物质，但却不能除去吩噻嗪类药物的氧化物。提取时，氧化物随游离碱进入有机相；测定时，因结构相近，氧化物在吩噻嗪类药物的测定波长处产生吸收，干扰测定。【示例11-37】盐酸氯丙嗪注射液的含量测定（USP32-NF27）测定波长：

254nm（最大吸收波长）及277nm（等吸收波长）空白对照液：0.1mol/L盐酸溶液计算公式：12.5C(A254−A277)U

/V(A254−A277)S式中：C(mg/ml)为对照品溶液的浓度；V(ml)为所取供试品的体积；括号内的公式分别为供试品溶液(U)和对照品溶液(S)在下标所示波长处的吸光度差。4.二阶导数分光光度法

吩噻嗪类药物制剂中其他成分对含量测定的干扰，虽然可以采用提取后分光光度法或提取后双波长分光光度法消除，但操作烦琐。5.钯离子比色法

吩噻嗪类药物在pH2±0.1的缓冲溶液中，与钯离子(Pd2+)形成红色配合物，在500nm波长附近具有最大吸收，由于钯离子仅与未被氧化的硫元素配合显色，消除了药物中氧化物对测定的干扰。比色液的浓度：50-250μg/mL显色稳定性：10分钟后可稳定约2小时【示例11-38】盐酸异丙嗪片的含量测定（USP32-NF27）操作步骤：略计算公式：50C（AU/AS）式中：C(mg/ml)为对照品溶液的浓度；AU和AS分别为供试品溶液及对照品溶液的吸光度三、高效液相色谱法1.反相高效液相色谱法在分离具有弱碱性的吩噻嗪类药物时，未硅烷化的硅醇基与吩噻嗪类药物发生吸附或离子交换作用，使分离效能下降，表现为吩噻嗪类药物的色谱峰拖尾、保留时间过长(甚至不能被洗脱)。通常在流动相中加入含氮碱性竞争试剂(扫尾剂)，以抑制碱性药物与未硅烷化的硅醇基作用。常用的扫尾剂：醋酸铵、三乙胺、二乙胺、乙腈等。【示例11-39】盐酸氯丙嗪片的含量测定（JP15）色谱条件：（1）色谱柱：ODS柱(15cm×4.6mm,5μm)（2）流动相：0.05mol/L磷酸二氢钠溶液的稀释液(1→2)-乙腈(27∶13)（3）柱温：25℃（4）检测波长：256nm系统适用性试验：（1）内标物质与氯丙嗪分离度不得小于10（2）氯丙嗪与内标物质峰面积比值的RSD不得大于1.0%（n=6)定量方法：内标法进行定量分析内标物：对羟基苯甲酸乙酯计算公式：

(C17H19ClN2S⋅HCl)=Ws

×(QT

/QS

)×2式中：WS为盐酸氯丙嗪对照品的量(mg)；QT和QS分别为供试品溶液及对照品溶液中氯丙嗪与内标物质的峰面积比值。

【示例11-40】氟奋乃静注射液的含量测定（ChP2010）

色谱条件：（1）色谱柱：ODS柱（2）流动相：碳酸铵甲醇溶液(1%碳酸铵溶液-甲醇(75∶450)，用醋酸调节pH至7.5±0.1)-乙腈(525∶450)（3）检测波长：260nm系统适用性试验：①出峰顺序依次为降解物Ⅰ、Ⅱ与氟奋乃静，降解物Ⅰ、Ⅱ两峰的分离度应大于2.0；②理论板数按氟奋乃静峰计算不低于5000。2.离子对高效液相色谱法在分析具有碱性的吩噻嗪类药物时，常用的离子试剂为烷基磺酸盐阴离子对试剂，如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷磺酸钠等。影响离子对形成的条件——影响待测组分的保留（1）pH（2）反离子的性质与浓度（3）流动相的组成（4）离子强度等【示例11-42】盐酸异丙嗪注射液的含量（USP32-NF27）色谱条件：（1）色谱柱：苯基柱（30cm×4.6mm）（2）流动相：0.2%戊烷磺酸钠溶液-乙腈-冰醋酸(100∶100∶1)（3）流速：1.5mL/min（4）检测波长：254nm系统适用性试验：（1）异丙嗪与吩噻嗪色谱峰的分离度不得小于3.0；（2）重复进样的相对标准偏差不得